【技术领域】
本发明涉及一种杂交种的培育方法,尤其是球形扶郎花杂交种的培育方法,属于植物育种技术领域。
背景技术
扶郎花(Gerbera jamesonii Bolus,也称非洲菊)为世界著名的五大鲜切花之一,全世界30多个国家广泛种植,据荷兰PVS和PGF统计,2004年扶郎花在荷兰切花拍卖中销售额排名第5位,达1.159亿欧元。上世纪90年代引入我国上海和云南,如今已成为我国六大鲜切花之一,13个省(市)广泛种植。2008年,全国扶郎花的种植面积为2764.3公顷,名列五大切花第四位。目前,我国市场上的扶郎花品种几乎来自国外,而且这些品种的外形几乎都是单一的平层状或“碟”状,未见到球形状(即类似重瓣球形状的菊花)。为此,培育出球形扶郎花杂交种是十分必要的,它可为市场提供外形独特极具观赏价值的扶郎花新品种,为进一步美化、装饰人们的生活增添一分色彩。
通过文献检索,没有查到有关重瓣度高的球形扶郎花杂交种的培育方法的报道与说明。
【发明内容】
本发明的目的在于提供一种观赏性极强的球形扶郎花杂交种的培育方法,培育出具有新奇特的扶郎花新品种,以满足人们对花卉多样化的消费需求。
本发明通过下列技术方案实现:一种球形扶郎花杂交种的培育方法,包括亲本选择,杂交授粉、母本植株生长至收获第一代种子,播第一代种子至长出幼苗,移栽幼苗至开花,其特征在于:
A、选择开花时重瓣度高的单株分别作为母本和父本;
B、采集多个父本单株的花粉,混合均匀后,对母本进行混合花粉的杂交授粉,使母本生长至收获第二代种子;
C、播第二代种子至长出幼苗,移栽幼苗生长至开花;
D、取上述C步骤开花的第二代重瓣度高的优株上未露心花芽为外植体,经常规消毒后,置于下列诱导培养基中:MS+8.0~12.0mg/L的BA+0.4~0.6mg/L的IBA+7g/L的琼脂+30g/L的蔗糖,在无光照、温度24~26℃的条件下培养12~15天,而后,在光照强度为2000~2500勒克斯、每日光照8~12小时、温度为20~25℃的条件下培养14~21天,诱导出不定芽;
E、将上述D步骤的不定芽转接到下列增殖培养基中:MS+0.5~0.7mg/L的6-BA+0.05~0.1mg/L的NAA+7g/L的琼脂+30g/L的蔗糖,pH为5.8~6.0,在温度为21~25℃,每日光照10~12小时,光照强度为2000~2500勒克斯的条件下,增殖培养20~25天;
F、将E步骤增殖培养的植株移至下列生根培养基中:MS+0.4~0.6mg/L的NAA+琼脂7g/L+蔗糖30g/L,pH为5.5~6.0,在温度为23±2℃,每日光照8~12小时,光照强度为2000~2500勒克斯的条件下,培养至生根;
G、将上述F步骤的生根植株移栽至下列过渡基质中:腐植土∶珍珠岩∶红土=6∶1∶2,在温度为26~30℃,湿度为85~90%,遮光率为60~80%的条件下,培养4~6星期;再在温度为23~26℃,湿度为85~90%,遮光率为40~60%的条件下,培养2~3星期;最后在温度为18~22℃,自然湿度和自然光照条件下,培养1~2星期,直至幼苗长出4~5片真叶,即得球形扶郎花杂交品种的组培苗。
所述G步骤所得球形扶郎花杂交品种的组培苗,直接移栽定植于大田中,浇透定根水,并用遮光率为65~70%的遮光网遮光7~10天,待苗成活后,按常规管理生长至开花,即得球形扶郎花杂交种鲜切花。
所述亲本选择是:选择外舌状花瓣大于3层且外翻、内舌状花瓣大于10层且内卷呈“抱心”状,且内舌状花瓣的长度是外舌状花瓣长度的1/2以上的扶郎花作为杂交亲本。
所述杂交授粉是:于早晨9~11点间,当父本花由内轮向外轮开放2~3圈时,用毛笔蘸花粉后轻抖在牛皮纸上28~35分钟,而后倒入带盖的玻璃容器中,置于2~6℃的冰箱中避光保存备用,保存时间一般不能超过5天,或者根据实际需求收集后当即授粉;于早晨8~10点间,当母本第一轮管状花开始吐粉且分泌出粘液时,用毛笔蘸上采集的父本花粉轻刷母本,授粉后,用尼龙网套上花序,按常规田间管理,使母本植株生长至收获第一代种子。
所述播种是:播种前用42~44℃的温水浸种3~5分钟,晾干水份后,用种子量的0.2%质量比的多菌灵拌种后播于下列基质中:泥炭∶珍珠岩=6∶1,pH值为5.5~6.5;盖一层泥炭,使泥炭不超过种子的厚度,洒水后用塑料薄膜覆盖,在温度为24~25℃,空气湿度为98%,日照时间为12~16小时,光照强度为每平方米3500~4000勒克斯的条件下,保持5~7天,种子即发芽并长出幼苗;2~3周内,让塑料薄膜内通风,期间温度控制在20~22℃,空气湿度为75~80%,光照强度5000~10000勒克斯,日照10~15小时,并在浇水的同时微施肥,水的EC值为1.0~1.5mS/cm、pH值为5.5~6.0,幼苗生长5~6周,直至长出4~5片真叶。
移栽幼苗至开花期间的管理是:幼苗长出4至5片真叶移栽,种苗定植时深穴浅植,根颈部露于基质表面1~1.5cm,定植完后浇透定根水,并用遮光率为70%的遮阴网遮光7~10天,待苗成活后再逐渐增光,按常规进行肥水管理,苗期施肥为:N∶P∶K=5∶3∶2,开花期施肥为:N∶P∶K=12∶12∶17,营养液pH值保持在6.0~6.5,EC值为1.5~2.0mS/cm,相对湿度为70~85%,光照强度为2~5万勒克斯,温度为20~25℃。
本发明与现有技术相比具有下列优点和效果:采用上述方案,即通过杂交手段实现扶郎花品种间优异基因渗入,筛选出杂种优势强的第一代种子,再进行第一代多父本混合授粉得到具有目标性状的第二代种子,经第二代种子播种、长出幼苗、移栽至开花后,利用离体组织培养进行快速繁殖,并稳定第二代种苗的优异特性,从而获得具有极高观赏价值的球形扶郎花杂交品种组培苗。是一种培育球形扶郎花杂交种的有效方法。
【具体实施方式】
下面结合实施例对本发明做进一步描述。
实施例1
1、选择杂交亲本:选择外舌状花瓣大于3层且外翻、内舌状花瓣大于10层且内卷呈“抱心”状,且内舌状花瓣的长度是外舌状花瓣长度地1/2以上的扶郎花作为杂交亲本,本实施例的杂交亲本采用普通种植的阳光路“Sunway”和雅粉“Pink Elegance”;
2、收集和保存花粉:于早晨9点,当阳光路“Sunway”和雅粉“PinkElegance”的两性花由内轮向外轮开放2圈时,用毛笔蘸花粉后轻抖在牛皮纸上30分钟,而后倒入带盖的玻璃容器中,置于2℃的冰箱中分别避光保存备用,保存时间一般不能超过5天;
3、杂交授粉:于早晨9点,当大田中的阳光路“Sunway”植株上的第一轮管状花开始吐粉,即外舌状花的柱头成“Y”字型,且分泌出粘液时,用毛笔蘸上收集的雅粉“Pink Elegance”的花粉轻刷阳光路“Sunway”的柱头,授粉分两次进行,第一次完成外舌状花的授粉,次日再进行内舌状花和两性花的授粉,授粉后,用尼龙网套上花序,并挂牌注明父母本名称、授粉时间及日期;
4、管理授粉后的母本植株:授粉后的母本植株停止施用氮肥,用质量浓度为0.3%的磷酸二氢钾溶液进行叶面喷施,以减少Ca/K比值,每周1次,同时用质量浓度为0.2%的硼酸加6ppm的钼酸钠交替进行叶面喷施,2周1次,保持昼温在22℃,夜温高于12℃,湿度80%,空气中的二氧化硫低于30微克/立方米,氯气浓度低于100微克/立方米;
5、收获和保存种子:授粉25天后,种子即成熟,收种后,选出棕褐色、饱满、冠毛银白色的优良种子,置于干燥环境自然干燥15天,而后放入4℃的冰箱中保存,保存时间不能超过2年,根据需求,采收种子干燥后也可以直接播种;
6、浸种、播种及管理:播种前用42℃的温水浸种5分钟,晾干水分后,用种子质量的0.2%的多菌灵拌种后播于穴盘中的基质中,基质为:泥炭∶珍珠岩=6∶1,pH值为5.5,EC值为0.7mS/cm,播种后盖一层泥炭,使之不超过种子的厚度,洒水后将穴盘用塑料薄膜覆盖,以保持较高的湿度,覆膜阶段温度为24℃,空气湿度为98%,发芽期的日照时间为12小时,低光照时期人工增光,光照强度为每平方米4000勒克斯,播种5天后,幼苗长出,随后的2周内,让塑料薄膜内的通风,期间温度控制在20℃,空气湿度为75%,光照强度5000勒克斯,并在浇水过程中略微施肥,水的EC值为1.5mS/cm、pH值为5.6,这一阶段幼苗的生长周期是5周;
7、移栽后实生苗的管理:幼苗长出4片真叶时移栽种苗,种苗定植时深穴浅植,使根颈部露于基质表面1cm,定植完后浇透定根水,并用遮光率为70%的遮阴网遮光7天,待苗成活后再逐渐增光,肥水管理按常规的“见干见湿”和“薄肥勤施”原则进行,使种苗生长至开花,期间:苗期施肥为:N∶P∶K=5∶3∶2,开花期施肥为:N∶P∶K=12∶12∶17,营养液的pH值保持在6.0,EC值为1.5mS/cm,相对湿度为70%,光照强度为2万勒克斯,温度为20℃;
8、重瓣性优株的选择:根据育种目标,筛选出重瓣度高的单株,即外舌状花瓣大于3层且外翻、内舌状花瓣大于10层且内卷呈“抱心”状,且内舌状花瓣的长度是外舌状花瓣长度的1/2以上,整个花序呈半球形的植株,待连续开出3枝花后,3枝花的性状相对稳定一致,即定为优株;
9、杂交授粉:分别选择单个优株作为母本和父本,采集多个优株的父本花粉混合后,按步骤3分别对单个母本优株进行杂交授粉;再按步骤4对授粉后的母本进行管理,直至获得第二代种子;按步骤5收获和保存第二代种子;按步骤6对第二代种子进行浸种、播种及管理后,使种子发芽并长成幼苗;按步骤7将幼苗移栽后对实生苗进行管理,直至进入开花期;
10、花蕾离体组培快繁:取步骤9的优株未露心的花芽为外植体,将花芽放于浓度为70%的乙醇溶液中处理2分钟,而后置于浓度为1.5%的次氯酸钠溶液中处理90分钟,接种在下列诱导培养基中:MS+8.0mg/L BA+0.4mg/L IBA+琼脂7g/L+蔗糖30g/L中,在无光照、温度24℃的条件下培养15天,而后,在光照强度为2000勒克斯、温度为20℃的条件下培养21天,诱导出不定芽;把诱导芽转接于增殖培养基中:MS+6~BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L,pH为5.8上,在温度为21℃,每日光照10小时,光照强度为2000勒克斯条件下培养25天;之后移至下列生根培养基中:MS+NAA0.4mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L,pH为5.5上,在温度为21℃,每日光照8小时,光照强度为2000勒克斯条件下培养至生根;之后移至灭菌的腐叶土∶珍珠岩∶红土按=6∶1∶2的质量比的过渡基质中;在温度为26℃,湿度为85%,遮光率为60%的条件下,培养6星期;再在温度为23℃,湿度为85%,遮光率为40%的条件下,培养3星期;最后在温度为18℃,自然湿度和自然光照条件下,培养2星期,直至幼苗长出4片真叶,即得球形扶郎花杂交品种的组培苗。
11、将步骤10所得球形扶郎花杂交品种的组培苗,直接移栽定植于农田中,浇透定根水,并用遮光率为70%的遮光网遮光7天,待苗成活后,按常规管理生长至开花,即得球形扶郎花杂交种鲜切花。
12、按照步骤10规模化繁殖后即可获得球形扶郎花杂交种的商业性组培苗。
实施例2
1、选择杂交亲本:选择外舌状花瓣大于3层且外翻、内舌状花瓣大于10层且内卷呈“抱心”状,且内舌状花瓣的长度是外舌状花瓣长度的1/2以上的扶郎花作为杂交亲本,本实施例采用的杂交亲本为普通种植的阳光路“Sunway”和雅粉“Pink Elegance”;
2、收集和保存花粉:于早晨10点,当阳光路“Sunway”和雅粉“PinkElegance”的两性花由内轮向外轮开放3圈时,用毛笔蘸花粉后轻抖在牛皮纸上30分钟,而后倒入带盖的玻璃容器中备用;
3、杂交授粉:于早晨10点,以大田中的雅粉“Pink Elegance”植株为母本,用收集的阳光路“Sunway”的花粉与之杂交,用尼龙网套上花序,并挂牌注明父母本名称、授粉时间及日期;
4、管理授粉后的母本植株:授粉后的母本植株停止施用氮肥,用质量浓度为0.3%的磷酸二氢钾溶液进行叶面喷施,以减少Ca/K比值,每周1次,同时用质量浓度为0.2%的硼酸加6ppm的钼酸钠交替进行叶面喷施,2周1次,保持昼温在28℃,夜温高于12℃,湿度85%,空气中的二氧化硫低于30微克/立方米,氯气浓度低于100微克/立方米;
5、收获和保存种子:授粉32天后,种子即成熟,收种后,选出棕褐色、饱满、冠毛银白色的优良种子,置于干燥环境自然干燥15天,而后放入4℃的冰箱中保存,保存时间不能超过2年,根据需求,采收种子干燥后也可以直接播种;
6、浸种、播种及管理:播种前用44℃的温水浸种3分钟,晾干水份后,用种子质量的0.2%的多菌灵拌种后播于穴盘中的基质是,基质为:泥炭∶珍珠岩=6∶1,pH值为6.5,EC值为1.0mS/cm,播种后盖一层泥炭,使之不超过种子的厚度,洒水后将穴盘用塑料薄膜覆盖,以保持较高的湿度,覆膜阶段温度为25℃,空气湿度为98%,发芽期的日照时间为16小时,低光照时期人工增光,光照强度为每平方米4000勒克斯,播种7天后,幼苗长出,随后的3周内,让塑料薄膜内的通风,期间温度控制在22℃,空气湿度为80%,光照强度10000勒克斯,并在浇水过程中略微施肥,水的EC值为1.5mS/cm、pH值为5.6,这一阶段幼苗的生长周期是6周;
7、移栽后实生苗的管理:幼苗长出5片真叶时移栽种苗,种苗定植时深穴浅植,使根颈部露于基质表面1.5cm,定植完后浇透定根水,并用遮光率为70%的遮阴网遮光10天,待苗成活后再逐渐增光,肥水管理按常规的“见干见湿”和“薄肥勤施”原则进行,使种苗生长至开花,期间:苗期施肥为:N∶P∶K=5∶3∶2,开花期施肥为:N∶P∶K=12∶12∶17,营养液的pH值保持在6.5,EC值为2.0mS/cm,相对湿度为85%,光照强度为5万勒克斯,温度为25℃;
8、重瓣性优株的选择:根据育种目标,筛选出重瓣度高的单株,即外舌状花瓣大于3层且外翻、内舌状花瓣大于10层且内卷呈“抱心”状,且内舌状花瓣长度大于外舌状花瓣长度1/2,整个花序呈半球形的植株,待连续开出3枝花后,3枝花的性状相对稳定一致,即定为优株;
9、杂交授粉:分别选择单个优株作为母本和父本,采集多个优株的父本花粉混合后,按步骤3分别对单个母本优株进行杂交授粉;再按步骤4对授粉后的母本进行管理,直至获得第二代种子;按步骤5收获和保存第二代种子;按步骤6对第二代种子进行浸种、播种及管理后,使种子发芽并长成幼苗;按步骤7将幼苗移栽后对实生苗进行管理,直至进入开花期;
10、花蕾离体组培快繁:取步骤9的优株未露心的花芽为外植体,将花芽放于浓度为70%的乙醇溶液中处理2分钟,而后置于浓度为1.5%的次氯酸钠溶液中处理90分钟,接种在下列诱导培养基中:MS+12.0mg/L BA+0.6mg/L IBA+琼脂7g/L+蔗糖30g/L中,在无光照、温度26℃的条件下培养12天,而后,在光照强度为2500勒克斯、温度为25℃的条件下培养14天,诱导出不定芽;把诱导芽转接于下列增殖培养基中:MS+6~BA0.7mg/L+NAA0.05mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L,pH为6上,在温度为25℃,每日光照12小时,光照强度为2500勒克斯条件下培养20天;之后移至下列生根培养基中:MS+NAA0.6mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L,pH为6上,在温度为25℃,每日光照12小时,光照强度为2500勒克斯条件下培养至生根;之后移至:灭菌的腐叶土∶珍珠岩∶红土按=6∶1∶2的质量比的过渡基质上;在温度为30℃,湿度为90%,遮光率为80%的条件下,培养4星期;再在温度为26℃,湿度为90%,遮光率为60%的条件下,培养2星期;最后在温度为22℃,自然湿度和自然光照条件下,培养1星期,直至幼苗长出4片真叶,即得球形扶郎花杂交品种的组培苗。
11、移栽生长成鲜切花:将步骤10所得球形扶郎花杂交品种的组培苗,直接移栽定植于农田中,浇透定根水,并用遮光率为70%的遮光网遮光7天,待苗成活后,按常规管理生长至开花,即得球形扶郎花杂交种鲜切花。
12、按照步骤10规模化繁殖后即可获得球形扶郎花杂交种的商业性组培苗。
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网址: 球形扶郎花杂交种的培育方法.pdf https://m.huajiangbk.com/newsview1053301.html
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