萼脊兰胚培养和快速繁殖技术
萼脊兰为兰科(Orchidaceae )萼脊兰属(Sedirea)植物,为国家二级保护植物。因其花色清丽,香味芬芳,观赏期长,养护简单且耐寒,故越来越受到人们的喜爱。兰花的传统繁殖方法主要是将兰花分株繁殖,繁殖速度慢,不少品种在栽培条件下很少结种子。同时由于兰花的种子极小,且胚发育不完全,因此不易发芽,必须借助共生的菌类供给养料才能萌发。萼脊兰因其种子极为细小,胚未分化,不含胚乳,萌发率很低。随着组织培养技术的发展,利用无菌播种方式来繁殖,能使许多兰花种子发芽率大幅度提高。但国内还无人对萼脊兰进行组织培养方面的研究。为探索萼脊兰组织培养快速繁殖的有效途径,本文以以萼脊兰的胚为材料,研究了萼脊兰的组织培养和快速繁殖技术,着重研究其胚培养和原球茎增殖分化的最佳培养基配方及培养程序,建立萼脊兰快速繁殖技术体系。综合试验结果及分析,萼脊兰组织培养体系各环节技术要点如下:1、胚培养:培养基中无机盐的浓度和激素影响胚的萌发,在1/4MS培养基加入0.5mg/L的KT效果最佳,培养80天,萌发率可达70%以上;培养基中加入椰子水、土豆提取物、蛋白胨和活性炭对胚的萌发均有明显的促进作用。2、原球茎增殖:培养基为1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L+椰子水10%+蛋白胨2g/L+活性炭2g/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L,年理论增殖系可达3.25×105。3、原球茎分化:培养基为:1/3MS+6-BA 10 mg/L+NAA0.5mg/L时分化率最高,平均每个外植体可分化出2.8个芽。4、成苗阶段:促进苗生长的最适培养基为1/2MS+IAA0.2mg/L+6-BA 6mg/L+ AC 1g/L。促进根生长的最适培养基为1/2MS+IAA0.5mg/L++6-BA 1mg/L+AC 2g/L。5、(活性炭)AC对外植体褐变的防止有一定作用,浓度为2g/L在胚培养、PLB增殖阶效果最好。6、小苗在苔藓基质中生长良好,成活率可达100%。
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