抑制植物病原菌的植物提取物筛选
抑制植物病原菌的植物提取物筛选
【摘要】： 从天然植物资源中寻找抑菌活性物质,深入探索其生物活性具有重要的科学研究和实际意义。自然界存在着丰富的抑菌植物资源,是研制具有低毒、无残留、高效、低成本等生物杀菌剂的理想材料来源。本研究共选取77种植物资源(以文献中报道较少或尚无研究的云南特色植物为主),利用12种植物病原菌模型,对所选植物的提取物进行抑菌活性筛选,从中选出具有较强抑菌活性的提取物进行分离、纯化,找出活性化合物并鉴定其化学结构。本实验抑菌模型选用稻瘟病菌(Pyricularia grisea),水稻恶苗病菌(Fusarium moniliforme),玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)等12种植物病原菌为供试菌种,采用生长速率法对红葱(Eleutherrine plicata)、龙舌兰(Agave americana)、海南草珊瑚(Sarcandra hainanensis)等77种植物的甲醇提取物(将提取物干粉配制成浓度为200μg/mL)进行抑菌试验。结果表明15种植物提取物对植物病原菌有较强抑制作用,其中华山姜(Alpinia chinensis)、硬骨藤(Pycnarrhena poilanei)、龙舌兰、红葱、大花哥纳香(Goniothalamus griffithii)、海南草珊瑚对至少一种菌的抑制率在50%以上,版纳青梅(Vatica xishuangbannensis)、大果巴戟(Morindu cochinchinensis)、华山姜等8种植物提取物对至少三种病原菌均有不同程度的抑制作用。红葱、海南草珊瑚、龙舌兰对百合炭疽病菌(Colletotrichum liliacearum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、玉米大斑病菌的抑制率分别为61.4%、70.7%、76.6%,与阳性对照(75%百菌清WP)在200μg/mL下的抑制率52.1%、69.7%、72.4%相比效果明显。因此,在同一条件下,不同植物提取物对植物病原菌的抑菌活性存在明显差别。选取对百合炭疽病菌显示出最强活性的红葱提取物,以PaperDisk法活性跟踪为指导,用环己烷、水、乙酸乙酯分段萃取,利用硅胶柱层析、结晶和高效液相色谱等方法进行分离、纯化,波谱解析等方法确定活性化合物的结构。结果发现：乙酸乙酯层对百合炭疽病菌具有抑制效应,以活性追踪试验为指导,分离得到结晶D-1。经高效液相色谱,波谱分析,并与相关文献对照,最终确定活性化合物a(结晶D-1)为异红葱甲素。化合物a的活性结果表明：EC50为284.91μg/mL。化合物a浓度为200μg/mL的抑制率46.5%与粗提物在200μg/mL下的抑制率61.4%相比,对百合炭疽病菌的抑制活性减弱。据此可以初步推定,红葱提取物对百合炭疽病菌生长的抑制可能是协同作用,活性成分以异红葱甲素为主。
【学位授予单位】：昆明理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
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