首页 > 分享 > 一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法.pdf

一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法.pdf

花匠小妙招
2024-12-20 07:49

《一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法.pdf（9页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611054616.2 (22)申请日 2016.11.25 (71)申请人秦小波地址 610015 四川省成都市一环路南二段 24号 (72)发明人秦小波 (74)专利代理机构北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 代理人夏艳 (51)Int.Cl. C12N 1/14(2006.01) C05G 1/00(2006.01) A01G 1/04(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方。

2、法 (57)摘要本发明公开了一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法，利用羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基进行羊肚菌诱导，利用羊肚菌栽培菌种栽培培养基进行羊肚菌栽培；诱导方法包括：将保存试管种取出，接种于母种诱导培养基平板，置于 1822培养箱培养，待菌丝满板后，作为接种的菌丝，备用于栽培培养基；栽培方法包括：灭菌、接种、菌丝体生长期和子实体生长期两个阶段的管理。本发明经过长时间的试验摸索探讨，提供了一种在国内外有突破性的羊肚菌人工栽培技术方法，是一种优化诱导羊肚菌菌种，并使其稳产与连续生产的一体化技术，实现了商业化生产。权利要求书2页说明。

3、书5页附图1页 CN 106544279 A 2017.03.29 CN 106544279 A 1.一种羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基，其特征在于，所述羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基组分按质量计由蛋白胨2g4g、酵母浸膏3g7g、葡萄糖15g25g、琼脂18g30g、硫酸镁0.2g0.5g、磷酸二氢钾0.2g0.5g、硝酸钾1.0g1.5g、丁酸钠0.1g0.3g、叶酸 0.1g0.2g、维生素B1 0.1g0.3g、维生素B6 0.1g0.3g、维生素C 0.1g0.3g；加蒸馏水至总容积为1000mL。 2.如权利要求1所述的羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基，。

4、其特征在于，所述羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基组分按质量计由马铃薯200g250g的水浸提液、葡萄糖15g25g,、琼脂18g30g、硫酸镁0.2g0.5g、磷酸二氢钾0.2g0.5g、硝酸钾1.0g1.5g、丁酸钠0.1g 0.3g、叶酸0.1g0.2g、维生素B1 0.1g0.3g、维生素B6 0.1g0.3g、维生素C 0.1g 0.3g；加蒸馏水至总容积为1000mL。 3.一种如权利要求1所述羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基的诱导方法，其特征在于，该羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基的诱导方法包括：将保存试管种取出，接种于母种诱导培养基平板，置于1822培。

5、养箱培养，待菌丝满板后，作为接种的菌丝，备用于接入栽培培养基。 4.一种羊肚菌栽培菌种栽培培养基，其特征在于，该羊肚菌栽培菌种栽培培养基由羊肚菌栽培菌种栽培培养基干基和水组成；所述羊肚菌栽培菌种栽培培养基干基按质量百分比由小麦1070、玉米碎粒1070、木屑1025、土壤515、蛋白胨 0.52.0、蔗糖1.03.0、磷酸二氢钾0.10.3、硫酸镁0.10.3、尿素 0.10.3、维生素B1 0.10.3组成。 5.如权利要求4所述的羊肚菌栽培菌种栽培培养基，其特征在于，所述小麦+玉米总量为6080；添加的水量为5070；所述栽培培养基pH6.07。

6、.5。 6.一种如权利要求4所述羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法，其特征在于，该羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法包括：灭菌：将栽培培养基装瓶后放进灭菌锅灭菌，在100下保持8h10h进行常压灭菌；或在1.4kg/cm2压力下保持1.5h2.0h进行高压灭菌；灭菌后瓶内栽培培养基上下一致，麦粒之间有通透的空隙；接种：当灭菌后瓶温降到低于30时，在无菌状态下接入诱导后准备好的菌种；接种后，将栽培玻璃瓶放入控温栽培房进行菌丝体生长期和子实体生长期两个阶段的管理。 7.如权利要求6所述羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法，其特征在于，所述菌丝体生长期的管理方法。

7、包括：接种后的料瓶，置于清洁、避光的环境中培养，保持空气湿度5070；初始阶段，室内温度保持1620；待料面布满羊肚菌菌丝后，将温度升到2023 ，培养1520天后菌丝封面，在2025天后长到瓶底，菌丝吃透培养料，完成营养生长阶段。 8.如权利要求6所述羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法，其特征在于，进行菌丝体生长期的管理时，当菌丝出现多气生菌丝后，进行原基形成期的管理；具体包括： (1)温差刺激，白天室温控制在2023；晚上为812，刺激6h10h； (2)光照刺激，光照强度在50lx200lx，每天光照10h14h；权利要求书 1/2 页。

8、2 CN 106544279 A 2 (3)进行空气相对湿度保持在6075； (4)通风，每天早上、中午、晚上各通风15min20min,或早、晚各通风30min；对已形成的菌核，把表层的菌核或贴瓶壁生长的菌核去掉,适当补充含碳营养液,约10多天可形成原基。 9.如权利要求6所述羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法，其特征在于，子实体生长期管理的方法包括：子实体长出后，先把封口膜扎几个孔，室温控制在2025；光照强度在500lx以内，每天光照时间不少于10h；空气相对湿度保持在7090；每天通风时间根据子实体的生长而不断增加通风时间；此子实体生长期管理阶段。

9、时间为1520天。 10.如权利要求6所述羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法，其特征在于，在采收一茬羊肚菌后，由于培养基还存在养料，保持子实体生长期的管理，进行二茬羊肚菌管理。权利要求书 2/2 页 3 CN 106544279 A 3 一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法技术领域 0001 本发明属于羊肚菌工厂化、商业化培养领域，尤其涉及一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法。背景技术 0002 羊肚菌Morchella esculenta(L.)Pers隶属于羊肚菌科(Morchellaceae)羊肚菌属(Morchella)，是国际著名的珍贵食用菌，世界畅销，。

10、是中国主要出口到法国等欧洲国家的食用菌产品。并且随着德、法、意、美等国家对羊肚菌的需求量增大，其价格不断攀升。羊肚菌最早记载于本草纲目，在我国利用的历史悠久。现代科学发现羊肚菌中富含蛋白质、脂肪酸和碳水化合物，特别是多种稀有氨基酸(如顺-3-氨基-L-脯氨酸、 2-氨基异丁酸、 2, 4-三氨基异丁酸等)、矿质元素(钾、磷、镁、钙、铁、锌、铜、锰等)和多种维生素(硫胺素、核黄素、尼古酸、泛酸、叶酸、吡哆醇、生物素、抗坏血酸、 VB12)等成分赋予了羊肚菌独特的风味和营养价值，成为国际餐饮中的高档食材。并且，羊肚菌食药同源，。

11、现代医学研究表明，羊肚菌能够补肾、补脑、壮阳、提神、降血脂、抗肿瘤等作用。另外，羊肚菌可用于泡酒原料，其液体发酵培养物又可用于调味品的生产等，故其在食品、保健品、医药化工等多领域有着广阔的应用前景。目前，中国出口的羊肚菌大多采于自然野生，其远远不能满足国内与国际市场的需求，并且野生资源的过度采集造成其产量急剧减少，极大破坏了羊肚菌的生物多样性。羊肚菌是春末夏初出生的珍贵食用菌。探索人工栽培羊肚菌已有近百年的历史，但是，直到 1986年才由美国旧金山州立大学生物系植物标本室的Ron Ower首次在真菌学杂志上发表了人工栽培成功的报告，并分。

12、别在1982年和1986年取得了羊肚菌栽培的两个美国专利。在此之前，国内外都有报道羊肚菌人工栽培成功的例子，但只是偶尔有羊肚菌子实体长出。近年来，我国科技工作者对羊肚菌的人工栽培进行了许多探索，已栽培出羊肚菌子实体，并探讨了一些子实体发生的生理条件。但目前人工栽培均属于仿生栽培，需在室外完成，同时重复性差，出菇不稳定，至今不能进行成熟的商业化栽培。因此，羊肚菌的人工或半人工栽培技术一直是国际食用菌研究的热点。 0003 综上所述，现有技术羊肚菌人工栽培中不能在室内完成，同时制备的羊肚菌重复性差，出菇不稳定，不能进行成熟的商业化栽培。发明内容 000。

13、4 本发明的目的在于提供一种羊肚菌栽培菌种及其诱导和栽培方法，旨在解决现有技术栽培中不能在室内完成、制备的羊肚菌重复性差、出菇不稳定、不能进行商业化栽培的问题。 0005 本发明是这样实现的，一种羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基，所述羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基组分按质量计由蛋白胨2g4g、酵母浸膏3g7g、葡萄糖15g25g、琼脂 18g30g、硫酸镁0.2g0.5g、磷酸二氢钾0.2g0.5g、硝酸钾1.0g1.5g、丁酸钠0.1g 0.3g、叶酸0.1g0.2g、维生素B1 0.1g0.3g、维生素B6 0.1g0.3g、维生素C 0.1g 说明书 1。

14、/5 页 4 CN 106544279 A 4 0.3g；加蒸馏水至总容积为1000mL。 0006 所述羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基组分按质量计由马铃薯200g250g的水浸提液、葡萄糖15g25g,、琼脂18g30g、硫酸镁0.2g0.5g、磷酸二氢钾0.2g0.5g、硝酸钾1.0g1.5g、丁酸钠0.1g0.3g、叶酸0.1g0.2g、维生素B1 0.1g0.3g、维生素B6 0.1g0.3g、维生素C 0.1g0.3g；加蒸馏水至总容积为1000mL。 0007 本发明另一目的在于提供一种羊肚菌栽培菌种栽培培养基由羊肚菌栽培菌种栽培培养基干基和水组成；所。

15、述羊肚菌栽培菌种栽培培养基干基按质量百分比由小麦10 70、玉米碎粒1070、木屑1025、土壤515、蛋白胨0.52.0、蔗糖 1.03.0、磷酸二氢钾0.10.3、硫酸镁0.10.3、尿素0.10.3、维生素B1 0.10.3组成。 0008 进一步，所述小麦+玉米总量为6080；添加的水量为5070；所述栽培培养基pH6.07.5。 0009 本发明另一目的在于提供一种羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基的诱导方法，该母种诱导培养基的诱导方法包括： 0010 将保存试管种取出，接种于母种诱导培养基平板，置于1822培养箱培养，待菌丝满板后，作为接种的菌丝。

16、，备用于接入栽培培养基。 0011 本发明另一目的在于提供一种羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法，该栽培培养基的栽培方法包括： 0012 灭菌：将栽培培养基装瓶后放进灭菌锅灭菌，在100下保持8h10h进行常压灭菌；或在1.4kg/cm2压力下保持1.5h2.0h进行高压灭菌；灭菌后瓶内栽培培养基上下一致，麦粒之间有通透的空隙； 0013 接种：当灭菌后瓶温降到30时及以下，在无菌状态下接入诱导后准备好的菌种； 0014 接种后，将栽培玻璃瓶放入控温栽培房进行菌丝体生长期和子实体生长期两个阶段的管理。 0015 进一步，所述菌丝体生长期的管理方法包括： 0016 。

17、接种后的料瓶，置于清洁、避光的环境中培养，保持空气湿度5070； 0017 初始阶段，室内温度保持1620；待料面布满羊肚菌菌丝后，将温度升到20 23，培养1520天后菌丝封面，在2025天后长到瓶底，菌丝吃透培养料，完成营养生长阶段。 0018 进一步，进行菌丝体生长期的管理时，当菌丝出现多气生菌丝后，进行原基形成期的管理；具体包括： 0019 (1)温差刺激，白天室温控制在2023；晚上为812，刺激6h10h； 0020 (2)光照刺激，光照强度在50lx200lx，每天光照10h14h； 0021 (3)进行空气相对湿度保持在6075；如湿。

18、度太大会造成气生菌丝过旺而影响子实体芽包的形成，易诱发基内气生菌丝，对子实体生长不利；湿度太小，易使培养基提早失水而影响产量； 0022 (4)通风，每天早上、中午、晚上各通风15min20min,或早、晚各通风30min；此外如需要，还要给予机械刺激，如气生菌丝生长旺盛时，可用消毒的芽签、铁丝或钢针等在培养基表面间隔约12cm划24mm深的方格；对已形成的菌核，把表层的菌核或贴瓶壁生长说明书 2/5 页 5 CN 106544279 A 5 的菌核去掉,适当补充含碳营养液,约10多天可形成原基。 0023 进一步，子实体生长期管理的方法包括： 002。

19、4 子实体长出后，先把封口膜扎几个孔，室温控制在2025；光照强度在500lx 以内，每天光照时间不少于10h；羊肚菌有较强的趋光性,因此在子实体形成后,应根据情况适当调整培养瓶与光源的相对方向,或调整室内光源方向,以保证子实体的正常生长,从而提高产量；空气相对湿度保持在7090，最高不能超过95；每天通风时间根据子实体的生长而不断增加通风时间；此子实体生长期管理阶段时间为1520天。 0025 进一步，在采收一茬羊肚菌后，由于培养基还存在养料，保持子实体生长期的管理，进行二茬羊肚菌管理。 0026 本发明提供的羊肚菌是一种有极大开发前景的珍贵食用菌，本发明。

20、经过长时间的试验摸索探讨，提供了一种在国内外有突破性的，可使羊肚菌在室内全季候的工厂化栽培的技术方法，是一种优化诱导羊肚菌菌种，达到工厂化栽培要求，同时相较于现有室外仿生栽培仅有一季出菇的落后现状，使其全季候连续生产的一体化技术，实现了商业化生产。现有技术在室外一年只有一季出菇，本发明在室内连续生产，出菇无次数限制。附图说明 0027 图1是本发明实施例提供的羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法流程图。具体实施方式 0028 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅。

21、用以解释本发明，并不用于限定本发明。 0029 下面结合附图对本发明的应用原理作详细描述。 0030 如图1所示，本发明实施例提供的羊肚菌栽培菌种栽培培养基的栽培方法，包括： 0031 S101：灭菌：将栽培培养基装瓶后放进灭菌锅灭菌，在100下保持8h10h进行常压灭菌；或在1.4kg/cm2压力下保持1.5h2.0h进行高压灭菌；灭菌后瓶内栽培培养基上下一致，麦粒之间有通透的空隙； 0032 S102：接种：当灭菌后瓶温降到30时及以下，在无菌状态下接入诱导后准备好的菌种； 0033 S103：接种后，将栽培玻璃瓶放入控温栽培房进行菌丝体生长期和子实体生。

22、长期两个阶段的管理。 0034 本发明实施例提供的羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基按质量计由：蛋白胨2g 4g、酵母浸膏3g7g、葡萄糖15g25g,、琼脂18g30g、硫酸镁0.2g0.5g、磷酸二氢钾 0.2g0.5g、硝酸钾1.0g1.5g、丁酸钠0.1g0.3g、叶酸0.1g0.2g、维生素B1 0.1g 0.3g、维生素B6 0.1g0.3g、维生素C 0.1g0.3g；加蒸馏水至总容积为1000mL。 0035 所述羊肚菌栽培菌种母种诱导培养基组分按质量计由马铃薯200g250g的水浸提液、葡萄糖15g25g,、琼脂18g30g、硫酸镁0.2g0.5。

23、g、磷酸二氢钾0.2g0.5g、硝酸钾1.0g1.5g、丁酸钠0.1g0.3g、叶酸0.1g0.2g、维生素B1 0.1g0.3g、维生素B6 0.1g0.3g、维生素C 0.1g0.3g；加蒸馏水至总容积为1000mL。说明书 3/5 页 6 CN 106544279 A 6 0036 本发明实施例提供的羊肚菌栽培菌种栽培培养基干基按质量比由：小麦10 70、玉米(碎粒)1070(注：小麦+玉米总量控制在6080)，木屑1025、土壤515、蛋白胨0.52.0、蔗糖1.03.0、磷酸二氢钾0.10.3、硫酸镁 0.10.3、尿素0.10.3、维生素。

24、B1 0.10.3，羊肚菌栽培菌种栽培培养基干基加水组成羊肚菌栽培菌种栽培培养基。 0037 控制含水量5070， pH6.07.5。 0038 下面结合控温栽培房建设对本发明的应用原理作进一步描述。 0039 本发明控温栽培房建设： 0040 培养房的面积通常为1550m2，根据栽培规模确定培养房的数量，每个房间四面墙壁、天花板、门窗粘贴35cm厚的泡沫板，地面铺5cm厚的泡沫板后再铺水泥，进行周年栽培的还要安装空调和排气扇。房间内摆放长2m、宽1m、高2.3m的铁制4层床架，第一层离地 30cm，每层间隔60cm。每层安装1支25W的日光灯。一个15m2的。

25、房间可摆放5个床架，栽培面积 40m2。 0041 下面结合实施例对本发明的应用原理作进一步描述。 0042 本发明母种诱导培养基的诱导： 0043 将保存试管种取出，接种于母种诱导培养基平板，置于1822培养箱培养，待菌丝满板后，即可作接种使用。 0044 本发明栽培培养基的灭菌： 0045 装瓶后应马上放进灭菌锅灭菌,常压灭菌应在100下保持810h；高压灭菌应在 1.4kg/cm2压力下保持1.52.0h。灭菌后瓶内培养基要上下一致,麦粒之间有空隙,麦粒可有粘连但能通透。 0046 本发明栽培培养基的接种： 0047 当灭菌后瓶温降到30时,在无菌状态下接入事先准备好的。

26、菌种。要注意接种时保证无菌操作,否则会出现霉菌或细菌感染。霉菌感染可产生不同色素,并进一步扩散,与羊肚菌争夺营养,抑制羊肚菌菌丝生长；细菌感染导致瓶内培养料发稀发臭,羊肚菌停止生长。 0048 本发明栽培培养基的菌丝体生长与出菇管理包括： 0049 接种后,将栽培玻璃瓶直接放入控温栽培房进行管理。本发明培育羊肚菌把栽培管理技术分为菌丝体生长期和子实体生长期两个阶段。 0050 1)菌丝生长阶段的管理 0051 此阶段需2025天,管理关键是避光和低温培养。接种后的料瓶,应置于清洁、避光的环境中培养,保持空气湿度5070。关键是避光和低温培养。初始阶段,为减少杂菌污染。

27、,室内温度宜保持在1620之间,待料面布满羊肚菌菌丝后,将温度升到2023 ,培养1520天后菌丝封面,2025天后长到瓶底,菌丝即可吃透培养料,完成营养生长阶段。 0052 2)原基形成期的管理 0053 此阶段需1015天。当菌丝出现较多气生菌丝后,应给予原基形成所需的条件: 0054 (1)温差刺激。白天室温控制在2023,晚上降为812,每天低温刺激6 10h。说明书 4/5 页 7 CN 106544279 A 7 0055 (2)光照刺激。光照强度在50lx200lx,每天光照10h14h以上。光照太强、通风差,原基分化则密,甚至菌丝老化死亡。 0056 (3)湿度。

28、。空气相对湿度保持在6075左右。如湿度太大会造成气生菌丝过旺而影响子实体芽包的形成,易诱发基内气生菌丝,对子实体生长不利；湿度太小,易使培养基提早失水而影响产量。 0057 (4)通风。每天早上、中午、晚上各通风1520min,或早、晚各通风30min。此外如需要，还要给予机械刺激,如气生菌丝生长旺盛时,可用消毒的芽签、铁丝或钢针等在培养基表面间隔约12cm划24mm深的方格；对已形成的菌核,要把表层的菌核或贴瓶壁生长的菌核去掉,适当补充含碳营养液,约10多天可形成原基。 0058 3)子实体生长期的管理： 0059 此阶段需1520天,子实体长出后,先把封口。

29、膜扎几个孔,室温控制在2025, 最高不能超过28。光照强度在500lx以内，每天光照时间不少于10h。羊肚菌有较强的趋光性,因此在子实体形成后,应根据情况适当调整培养瓶与光源的相对方向,或调整室内光源方向,以保证子实体的正常生长,从而提高产量。空气相对湿度保持在7090,最高不能超过95。每天通风时间根据子实体的生长而不断增加通风时间。 0060 本发明羊肚菌的采收及保存： 0061 羊肚菌子实体长至10cm左右时,菌盖表面出现色素去颜色较深时,表明子实体成熟,即可采收。采收后的子实体80以下烘干或晾干,密封于塑料袋中,短期保存置阴凉干燥处,长期保存可置于低温冰柜中。 0062 本发明栽培培养基的二茬羊肚菌的管理： 0063 在采收一茬羊肚菌后，由于培养基还存在不少养料，保持子实体生长期的培养还会长出二茬羊肚菌。 0064 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。说明书 5/5 页 8 CN 106544279 A 8 图1 说明书附图 1/1 页 9 CN 106544279 A 9 。