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1、(10)申请公布号 CN 104186314 A (43)申请公布日 2014.12.10 CN 104186314 A (21)申请号 201410383427.4 (22)申请日 2014.08.06 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 宁明县红枫中药材种植专业合作社 地址 532500 广西壮族自治区崇左市宁明县 那楠乡 (财政所一楼) (72)发明人 农凯峰 (74)专利代理机构 北京远大卓悦知识产权代理 事务所 ( 普通合伙 ) 11369 代理人 靳浩 (54) 发明名称 一种金线莲的育苗方法 (57) 摘要 本发明公开了一种金线莲的育苗方法, 包括 : 步骤一,。
2、 选取植株健壮、 叶脉分明且已过花期的金 线莲, 取其地上和地下部分之间的 2 4cm 的一 段主茎, 将剩余部分捣碎形成溶液, 向溶液中加入 1 2吐温 -20, 之后将主茎置于溶液中, 在 4处理 24 72h ; 步骤二, 将步骤一中处理过的 主茎置于1/31/2MS固体培养基上生长1015 天得到生根后的幼苗, 培养期间采用全日光照 ; 步骤三, 将步骤二得到的幼苗移至1/41/3MS液 体培养基中培养5060天, 并将步骤一中的金线 莲溶液加入到 MS 液体培养基中 ; 步骤四, 将固体 基质装于可降解材料制成的杯状容器中, 将步骤 三得到的幼苗移栽到所述固体基质中培养 20 40 。
3、天。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 5 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书5页 (10)申请公布号 CN 104186314 A CN 104186314 A 1/1 页 2 1. 一种金线莲的育苗方法, 其特征在于, 包括 : 步骤一, 选取植株健壮、 叶脉分明且已过花期的金线莲, 取其地上部分和地下部分之间 的 2 4cm 的一段主茎, 将剩余部分捣碎形成金线莲溶液, 向金线莲溶液中加入 1 2 吐温 -20, 之后将所述主茎置于金线莲溶液中, 在 4处理 24 72h ; 步骤二, 将步骤一中处理过的所述主茎置于 。
4、1/3 1/2MS 固体培养基上生长 10 15 天得到生根后的幼苗, 培养期间采用全日光照, 光照强度为 1000 1500Lux, 培养温度为 24 28 ; 步骤三, 将步骤二得到的幼苗移至 1/4 1/3MS 液体培养基中培养 50 60 天, 并将步 骤一中的金线莲溶液加入到 MS 液体培养基中, 培养时采用长日照光周期照射, 明期 16h 光 照, 光照强度为 2000 2500Lux, 温度为 28, 暗期 8h, 温度为 22 ; 步骤四, 将固体基质装于可降解材料制成的杯状容器中, 将步骤三得到的幼苗移栽到 所述固体基质中培养 20 40 天, 第 1 3 天采用与步骤三中相。
5、同的条件进行培养, 第 4 天 至第 20 40 天, 采用明期 16h 光照, 光照强度为 3000 3500Lux, 温度为 30, 暗期 8h, 温 度为 22, 其中, 所述固体基质包括以下重量分数的组分 : 土壤 10 20 份, 蛭石 15 30 份, 腐殖 质 3 6 份, 香蕉 10 20 份, 芒果 1 2 份, 山竹果皮 2 4 份和火龙果果皮 1 2 份。 2. 如权利要求 1 所述的金线莲的育苗方法, 其特征在于, 所述步骤二中, 首先将所述主 茎处理为 0.4 0.6cm 的小块, 再均匀置于 MS 固体培养基上生长。 3. 如权利要求 1 所述的金线莲的育苗方法, 。
6、其特征在于, 所述步骤二中, 第 1 至 20 天, 利用 1/4MS 液体培养基培养金线莲, 每隔 7 10 天更换一次溶液 ; 第 21 至第 50 60 天, 利用 1/3MS 液体培养基培养金线莲, 每隔 7 10 天更换一次溶液。 4. 如权利要求 1 所述的金线莲的育苗方法, 其特征在于, 将所述步骤二中没有生根的 主茎和所述步骤三中高度小于 2cm 的幼苗粉粹后加入到所述固体基质中。 5. 如权利要求 4 所述的金线莲的育苗方法, 其特征在于, 所述固体基质包括以下重量 分数的组分 : 土壤 15 份, 蛭石 18 份, 腐殖质 4 份, 香蕉 15 份, 芒果 1 份, 山竹果。
7、皮 3 份和火 龙果果皮 1 份。 6. 如权利要求 5 所述的金线莲的育苗方法, 其特征在于, 将所述香蕉、 芒果、 山竹果皮 和火龙果果皮粉碎为粒径小于 40 目的颗粒。 7.如权利要求16任一项所述的金线莲的育苗方法, 其特征在于, 培养过程中空气湿 度为 80 95。 8. 如权利要求 7 所述的金线莲的育苗方法, 其特征在于, 所述步骤三中, 使用等离子水 配制 1/4 1/3MS 液体培养基。 9. 如权利要求 7 所述的金线莲的育苗方法, 其特征在于, 所述杯状容器由聚乳酸、 聚乙 烯醇和聚酯类材料中的任意一种制成。 权 利 要 求 书 CN 104186314 A 2 1/5 。
8、页 3 一种金线莲的育苗方法 技术领域 0001 本发明涉及一种金线莲的育苗方法。 背景技术 0002 金线莲为兰科开唇兰属花叶开唇兰, 具有显著的清热解毒祛风袂湿凉血平肝固肾 的功效, 是极其珍稀名贵的中药材。在民间具有广泛药用价值, 素有 “药王” 、“金草” 、“神 草” 、“鸟人参” 等美称。金线莲为典型的阴性药用植物, 常生长在阴蔽的阔叶林下的肥沃腐 叶土中, 对林中空气湿度、 光照、 积温等生态条件要求严格。 近年来金线莲需求量猛增, 野生 产区由于人们过度采挖, 使其资源日渐枯竭。 发明内容 0003 本发明提供一种金线莲的育苗方法, 本发明通过组培技术快速安全培养金线莲种 苗,。
9、 通过在 MS 培养基和固体基质中先后培养金线莲幼苗, 得到的种苗可以直接移栽到土壤 中, 不需要移植, 解决了金线莲快速大量繁殖种苗和种苗移栽后存活率低的问题。 0004 本发明提供的技术方案为 : 0005 一种金线莲的育苗方法, 包括 : 0006 步骤一, 选取植株健壮、 叶脉分明且已过花期的金线莲, 已过花期的金线莲的植株 茎部更粗壮, 取其地上部分和地下部分之间的24cm的一段主茎, 将剩余部分捣碎形成金 线莲溶液, 向金线莲溶液中加入 1 2吐温 20, 之后将所述主茎置于金线莲溶液中, 在 4处理 24 72h, 金线莲中的氨基酸和微量元素的含量很高, 其所含牛磺酸、 多糖类成。
10、 分也能更好的保持主茎的活性, 在 4处理主茎可以使主茎的生物活性接近, 使其生根时生 根率更加一致 ; 0007 步骤二, 将步骤一中处理过的所述主茎置于 1/3 1/2MS 固体培养基上生长 10 15天得到生根后的幼苗, 培养期间采用全日光照, 光照强度为10001500Lux, 培养温度为 24 28, 培养期间采用低强度的全日光照, 既避免了因光照过强而造成的金线莲生根 较快、 生长细弱的现象, 又能快速促进金线莲的生长, 缩短其生长周期 ; 0008 步骤三, 将步骤二得到的幼苗移至 1/4 1/3MS 液体培养基中培养 50 60 天, 并将步骤一中的金线莲溶液加入到 MS 液体。
11、培养基中, 培养时采用长日照光周期照射, 明期 16h 光照, 光照强度为 2000 2500Lux, 温度为 28, 暗期 8h, 温度为 22 ; 长日照照射下 金线莲叶脉清晰, 叶缘光滑。 0009 步骤四, 将固体基质装于可降解材料制成的杯状容器中, 将步骤三得到的幼苗移 栽到所述固体基质中培养 20 40 天, 第 1 3 天采用与步骤三中相同的条件进行培养, 使 之逐渐适应在该固体基质中生长。第 4 天至第 20 40 天, 采用明期 16h 光照, 光照强度 为 3000 3500Lux, 温度为 30, 暗期 8h, 温度为 22, 至金线莲在杯状容器中生长到 5 6cm 时,。
12、 即可将其直接在杯状容器中直接种植到大棚或者自然环境的树荫下, 由于杯状容器 由可降解材料制成, 在生长中, 杯状容器可被降解掉, 而且, 金线莲的根有可能穿过所述杯 说 明 书 CN 104186314 A 3 2/5 页 4 状容器而生长, 对其本身生长无影响, 对环境也无污染。 此时金线莲的根生长的已经比较发 达, 如果将其从固体基质中挖出, 对其根部伤害较大, 这样做有益于保护其根部, 同时, 与传 统上直接从液体培养基中将其移至到大气环境中相比, 这样的做法使得金线莲种苗的存活 率更高, 更能快速适应新的生长环境。 0010 其中, 所述固体基质包括以下重量分数的组分 : 土壤 10。
13、 20 份, 蛭石 15 30 份, 腐殖质 3 6 份, 香蕉 10 20 份, 芒果 1 2 份, 山竹果皮 2 4 份和火龙果果皮 1 2 份。腐殖质中含有植物生长发育所需要的一些元素, 能改善土壤, 增加肥力 ; 香蕉果肉营养 价值颇高, 含多种微量元素和维生素, 能促进生长, 增强金线莲的抗病能力 ; 山竹果皮和火 龙果果皮能使金线莲的抗病能力更强, 芒果 0011 优选的是, 所述的金线莲的育苗方法, 所述步骤二中, 首先将所述主茎处理为 0.4 0.6cm 的小块, 再均匀置于 MS 固体培养基上生长。 0012 优选的是, 所述的金线莲的育苗方法, 所述步骤二中, 第 1 至 。
14、20 天, 利用 1/4MS 液 体培养基培养金线莲, 每隔 7 10 天更换一次溶液 ; 第 21 至第 50 60 天, 利用 1/3MS 液 体培养基培养金线莲, 每隔 7 10 天更换一次溶液。 0013 优选的是, 将所述步骤二中没有生根的主茎和所述步骤三中高度小于 2cm 的幼苗 粉粹后加入到所述固体基质中。 金线莲中的氨基酸和微量元素的含量很高, 其所含牛磺酸、 多糖类成分也很丰富, 对金线莲植株本身的生长具有很好的营养作用。 0014 优选的是, 所述的金线莲的育苗方法中, 所述固体基质包括以下重量分数的组分 : 土壤15份, 蛭石18份, 腐殖质4份, 香蕉15份, 芒果1份。
15、, 山竹果皮3份和火龙果果皮1份。 0015 优选的是, 所述的金线莲的育苗方法中, 将所述香蕉、 芒果、 山竹果皮和火龙果果 皮粉碎为粒径小于 40 目的颗粒。 0016 优选的是, 所述的金线莲的育苗方法中, 培养过程中空气湿度为 80 95。 0017 优选的是, 所述的金线莲的育苗方法中, 所述步骤三中, 使用等离子水配制 1/4 1/3MS 液体培养基, 这样培养基中各种营养成分更容易被金线莲吸收。 0018 优选的是, 所述的金线莲的育苗方法中, 所述杯状容器由聚乳酸、 聚乙烯醇和聚酯 类材料中的任意一种制成。 0019 本发明的有益效果为 : 0020 依照本发明的方法缩短了金线。
16、莲的生长周期, 植株生长优越, 提高了金线莲的移 栽存活率, 其存活率高达 99以上, 长成的金线莲株高达 16 20cm, 平均重量 3g/ 株, 育苗 过程中绿色安全、 无激素添加、 有机培育, 不含化肥农药和激素, 种苗和鲜品金线莲更安全、 口感更好。 具体实施方式 0021 下面对本发明做进一步的详细说明, 以令本领域技术人员参照说明书文字能够据 以实施。 0022 实施例 1 : 0023 培养基 : 0024 MS 培养基配方 : 0025 大量元素 : 说 明 书 CN 104186314 A 4 3/5 页 5 0026 1650mg/L NH4NO3, 1900mg/L KN。
17、O3, 440mg/L CaCl22H2O, 370mg/L MgSO47H2O 和 700mg/L KH2PO4; 0027 微量元素 : 0028 0.83mg/L KI, 6.25mg/L H3BO3, 22.3mg/LMnSO44H2O, 8.65mg/L ZnSO47H2O, 0.25mg/LNa2MnO42H2O, 0.025mg/L CuSO45H2O 和 0.025mg/LCoCl26H2O 0029 铁盐 : 27.8mg/L FeSO47H2O 和 7.3mg/L Na2-EDTA2H2O3 0030 蔗糖 30mg/L, 0031 另加入琼脂粉 8mg/L, 0032 T。
18、ris 和 MES 调节 pH 至 5.80 左右即得到 MS 固体培养基。 0033 不添加琼另加入琼脂粉 8mg/L 脂粉即为 MS 液体培养基 0034 1/3MS固体培养基 : 大量元素、 微量元素、 铁盐和蔗糖成分为MS培养基的1/3, 另加 入琼脂粉 8mg/L, Tris 和 MES 调节 pH 至 5.80 左右即得到 1/3MS 固体培养基。 0035 1/2MS固体培养基 : 大量元素、 微量元素、 铁盐和蔗糖成分为MS培养基的1/2, 另加 入琼脂粉 8mg/L, Tris 和 MES 调节 pH 至 5.80 左右即得到 1/2MS 固体培养基。 0036 1/4MS液。
19、体培养基 : 大量元素、 微量元素、 铁盐和蔗糖成分为MS培养基的1/4, Tris 和 MES 调节 pH 至 5.80 左右即得到 1/4MS 固体培养基。 0037 1/3MS液体培养基 : 大量元素、 微量元素、 铁盐和蔗糖成分为MS培养基的1/3, Tris 和 MES 调节 pH 至 5.80 左右即得到 1/3MS 固体培养基。 0038 固体基质包括以下重量分数的组分 : 土壤 15 份, 蛭石 18 份, 腐殖质 4 份, 香蕉 15 份, 芒果 1 份, 山竹果皮 3 份和火龙果果皮 1 份, 其中将香蕉、 芒果、 山竹果皮和火龙果果皮 粉碎为粒径小于 40 目的颗粒与其他。
20、组分混合均匀。 0039 实施例 2 : 0040 一种金线莲的育苗方法, 包括如下步骤 : 0041 1)、 选取植株健壮、 叶脉分明且已过花期的金线莲, 取其地上部分和地下部分之间 的3cm的一段主茎, 将剩余部分捣碎形成金线莲溶液, 向金线莲溶液中加入1.5吐温-20, 之后将所述主茎置于金线莲溶液中, 在 4处理 48h。 0042 2)、 将步骤 1) 中处理过的所述主茎处理为 0.5cm 的小块, 均匀置于 1/3MS 固体培 养基上生长 12 天得到生根后的幼苗, 培养期间采用全日光照, 光照强度为 1200Lux, 培养温 度为 26, 空气湿度为 90。 0043 3)、 将。
21、步骤 2) 得到的幼苗移至等离子水配制的 1/4MS 液体培养基培养 20 天, 每隔 8 天更换一次溶液 ; 从第 21 天, 移至等离子水配制的 1/3MS 液体培养基中培养至第 55 天, 每隔 8 天更换一次溶液。并将步骤 1) 中的金线莲溶液加入到 1/4MS 液体培养基中, 培养时 采用长日照光周期照射, 明期 16h 光照, 光照强度为 2300Lux, 温度为 28, 暗期 8h, 温度为 22 ; 培养过程中空气湿度为 90。 0044 4)、 将固体基质装于聚乳酸制成的杯状容器中, 将步骤 3) 得到的幼苗移栽到所述 固体基质中培养 30 天, 第 1 3 天采用与步骤 3。
22、) 中相同的条件进行培养, 第 4 天至第 30 天, 采用明期 16h 光照, 光照强度为 3200Lux, 温度为 30, 暗期 8h, 温度为 22, 将步骤 2) 中没有生根的主茎和步骤 3 中高度小于 2cm 的幼苗粉粹后加入到固体基质中。培养过程中 空气湿度为 90。 说 明 书 CN 104186314 A 5 4/5 页 6 0045 固体基质包括以下重量分数的组分 : 土壤 15 份, 蛭石 18 份, 腐殖质 4 份, 香蕉 15 份, 芒果 1 份, 山竹果皮 3 份和火龙果果皮 1 份, 其中将香蕉、 芒果、 山竹果皮和火龙果果皮 粉碎为粒径小于 40 目的颗粒与其他组。
23、分混合均匀。 0046 实施例 3 : 0047 一种金线莲的育苗方法, 包括如下步骤 : 0048 1)、 选取植株健壮、 叶脉分明且已过花期的金线莲, 取其地上部分和地下部分之间 的2cm的一段主茎, 将剩余部分捣碎形成金线莲溶液, 向金线莲溶液中加入1吐温-20, 之 后将主茎置于金线莲溶液中, 在 4处理 24h。 0049 2)、 将步骤 1) 中处理过的所述主茎处理为 0.4cm 的小块, 均匀置于 1/3MS 固体培 养基上生长 10 天得到生根后的幼苗, 培养期间采用全日光照, 光照强度为 1000Lux, 培养温 度为 24, 空气湿度为 80。 0050 3)、 将步骤 2。
24、) 得到的幼苗移至等离子水配制的 1/4MS 液体培养基培养 20 天, 每隔 7 天更换一次溶液 ; 从第 21 天, 移至等离子水配制的 1/3MS 液体培养基中培养至第 50 天, 每隔 7 天更换一次溶液。并将步骤 1) 中的金线莲溶液加入到 1/4MS 液体培养基中, 培养时 采用长日照光周期照射, 明期 16h 光照, 光照强度为 2000Lux, 温度为 28, 暗期 8h, 温度为 22 ; 培养过程中空气湿度为 80。 0051 4)、 将固体基质装于聚酯类材料制成的杯状容器中, 将步骤 3) 得到的幼苗移栽到 所述固体基质中培养 20 天, 第 1 天采用与步骤 3) 中相。
25、同的条件进行培养, 第 4 天至第 20 天, 采用明期 16h 光照, 光照强度为 3500Lux, 温度为 30, 暗期 8h, 温度为 22, 将步骤 2) 中没有生根的主茎和步骤 3 中高度小于 2cm 的幼苗粉粹后加入到所述固体基质中。培养过 程中空气湿度为 80。 0052 其中, 固体基质还包括如下重量份数的组分 : 土壤120份, 蛭石30份, 腐殖质6份, 香蕉 20 份, 芒果 2 份, 山竹果皮 4 份和火龙果果皮 2 份。 0053 实施例 4 : 0054 一种金线莲的育苗方法, 包括如下步骤 : 0055 1)、 选取植株健壮、 叶脉分明且已过花期的金线莲, 取其地。
26、上部分和地下部分之间 的4cm的一段主茎, 将剩余部分捣碎形成金线莲溶液, 向金线莲溶液中加入2吐温-20, 之 后将所述主茎置于金线莲溶液中, 在 4处理 72h。 0056 2)、 将步骤 1) 中处理过的所述主茎处理为 0.6cm 的小块, 均匀置于 1/2MS 固体培 养基上生长 15 天得到生根后的幼苗, 培养期间采用全日光照, 光照强度为 1500Lux, 培养温 度为 28, 空气湿度为 95。 0057 3)、 将步骤 2) 得到的幼苗移至等离子水配制的 1/4MS 液体培养基培养 20 天, 每隔 10 天更换一次溶液 ; 从第 21 天, 移至等离子水配制的 1/3MS 液。
27、体培养基中培养至第 60 天, 每隔 10 天更换一次溶液。并将步骤 1) 中的金线莲溶液加入到 1/4MS 液体培养基中, 培养 时采用长日照光周期照射, 明期 16h 光照, 光照强度为 2500Lux, 温度为 28, 暗期 8h, 温度 为 22 ; 培养过程中空气湿度为 95。 0058 4)、 将固体基质装于聚乙烯醇制成的杯状容器中, 将步骤 3) 得到的幼苗移栽到所 述固体基质中培养 40 天, 第 3 天采用与步骤 3) 中相同的条件进行培养, 第 4 天至第 40 天, 采用明期 16h 光照, 光照强度为 3000Lux, 温度为 30, 暗期 8h, 温度为 22, 将步。
28、骤 2) 中 说 明 书 CN 104186314 A 6 5/5 页 7 没有生根的主茎和步骤 3 中高度小于 2cm 的幼苗粉粹后加入到所述固体基质中。培养过程 中空气湿度为 95。 0059 其中, 所述固体基质包括以下重量分数的组分 : 土壤 10 份, 蛭石 15 份, 腐殖质 3 份, 香蕉 10 份, 芒果 1 份, 山竹果皮 2 份和火龙果果皮 1 份。 0060 依照本发明的方法缩短了金线莲的生长周期, 植株生长优越, 提高了金线莲的移 栽存活率, 其存活率高达 99以上, 长成的金线莲株高达 16 20cm, 平均重量达 3g/ 株。 0061 尽管本发明的实施方案已公开如上, 但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列 运用, 它完全可以被适用于各种适合本发明的领域, 对于熟悉本领域的人员而言, 可容易地 实现另外的修改, 因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下, 本发明并不限 于特定的细节和这里示出与描述的实施例。 说 明 书 CN 104186314 A 7 。
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