黄花菜的组织培养国内外均有人进行研究,用叶片、花丝和花苔等外植体,通过组织培养的方法获得植株。具有取材少、繁殖系数高的优点。黄花菜的组织培养通常分为以下几个步骤:
(1)诱导愈伤组织:取黄花菜任何幼嫩部分,用饱和的漂白粉溶液消毒15分钟左右,再用无菌水淋洗4-5次,然后进行分割,接种到附加植物成长调节剂的诱导愈伤组织培养基中,放在24~28℃的黑暗处培养,10-15天后在外植体的切口或表面,就能形成白色或浅黄色半透明颗粒状的愈伤组织。有的外植体能长出胚状体或直接产生不定芽。若将良种种子放到诱导培养基上,25天后种子萌发出小苗,不久在小苗的基部出现许多大小不等的胚状体。
(2)培养分化成苗:将外植体产生的愈伤组织、不定芽、胚状体转到分化培养基上,置于25~35℃的温度下进行光照培养繁殖,光照强度为40瓦日光管距培养物15~18cm。
10~20天后小苗能长到5~8cm长,在小苗的基部逐渐膨大成瘤状,其膨大部分的上面能产生一些不定芽。有的小苗基部能产生愈伤组织,这些愈伤组织可以再行切割培养、诱导、分化成新的植株,也可以不转移分化使生成许多小苗,但这些小苗的质量较差。由于黄花菜继代培养生活力不易衰退,因此通常多利用所产生的愈伤组织,重复分离繁殖培养。
(3)诱导分化根:将分化出来较大的小苗转移到生根培养基中,可以分化出根。由于所用培养基不同,有的能在分化出根的同时不断产生愈伤组织,有的培养基只能分化根而不能产生愈伤组织。
当小苗通过生根分化长成一定大小的幼苗,同时又长出一定长度的根后,就可以进行移栽,移栽过迟,小苗在瓶内弯曲成长,会出现根和苗同向成长,或幼苗外叶逐渐枯黄等现象。由于试管内外温度、湿度差异较大,栽植前可将棉塞揭开1~3天,使小苗逐渐适应外界的环境条件。栽植前将小苗从试管内取出,轻轻洗去根上所带的培养基,以减少污染。小苗栽到营养钵或苗床内,可以单株栽植,但以数株丛栽较易成活。待小苗成活后成长一定时间,通常为一年左右,在黄花菜适宜栽植的季节定植到大田中。
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