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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201510934428.8 (22)申请日 2015.12.15 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 105532651 A (43)申请公布日 2016.05.04 (73)专利权人 上海师范大学 地址 200234 上海市徐汇区桂林路100号 (72)发明人 吴倩倩 郭水良 于晶 (74)专利代理机构 上海科盛知识产权代理有限 公司 31225 代理人 赵志远 (51)Int.Cl. A01N 3/00(2006.01) (56)对比文件 CN 1048887 。
2、A,1991.01.30, CN 101571626 A,2009.11.04, CN 102835387 A,2012.12.26, CN 102902055 A,2013.01.30, JP 特开2000-191421 A,2000.07.11, 陈桐庵.介绍几种植物玻片标本的简便制 法. 生物学通报 .1987, (第11期), 杨永丽.跳虫的采集与标本制作. 生物学通 报 .2008,第43卷(第03期), 审查员 王克双 (54)发明名称 一种苔藓植物永久玻片标本制作方法 (57)摘要 本发明涉及一种苔藓植物永久玻片标本制 作方法。 将阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油、 水合氯醛 在常温。
3、下混合搅拌配备成液体封固剂; 将苔藓叶 片或其植株置于双蒸水中浸润后, 将其置于滴有 一滴双蒸水的载玻片中央, 在10倍显微镜下观察 并调整其形态; 用滤纸吸除标本周边1毫米之外 的双蒸水, 以既保持苔藓标本湿润周边又未有过 多双蒸水为准; 用玻璃棒蘸取1-2滴封固剂滴到 苔藓标本上, 在不含有气泡的情况下盖上盖玻 片, 常温下放置至封固剂干固标本不能移动后在 载玻片上贴上标签, 即制作得到苔藓植物永久玻 片标本。 与现有技术相比, 本发明方法制作出的 标本具有透明性好、 方法简单、 保存年限长、 较好 的保存标本原始状态的技术效果。 权利要求书1页 说明书3页 CN 105532651 B 。
4、2018.02.09 CN 105532651 B 1.一种苔藓植物永久玻片标本制作方法, 其特征在于, 包括以下步骤: (1)将阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油、 水合氯醛在常温下混合搅拌配备成液体封固剂; (2)将苔藓叶片或其植株置于双蒸水中浸润后, 将其置于滴有一滴双蒸水的载玻片中 央, 在10倍显微镜下观察并调整其形态; (3)用滤纸吸除标本周边1毫米之外的双蒸水, 以既保持苔藓标本湿润周边又未有过多 双蒸水为准; (4)用玻璃棒蘸取1-2滴封固剂滴到苔藓标本上, 在不含有气泡的情况下盖上盖玻片, 常温下放置至封固剂干固标本不能移动后在载玻片上贴上标签, 即制作得到苔藓植物永久 玻片标本;。
5、 配备液体封固剂时, 阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油、 水合氯醛的比例关系为30g: 50ml: 20ml: 180g; 所述的苔藓包括蓑藓或银叶真藓。 2.根据权利要求1所述的一种苔藓植物永久玻片标本制作方法, 其特征在于, 配备液体 封固剂时, 用电动磁力搅拌器搅拌阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油的混合液, 搅拌至阿拉伯树胶 溶解, 再加入水合氯醛搅拌。 3.根据权利要求1所述的一种苔藓植物永久玻片标本制作方法, 其特征在于, 所述的液 体封固剂用棕色试剂瓶避光环境中保存。 4.根据权利要求1所述的一种苔藓植物永久玻片标本制作方法, 其特征在于, 所述的标 签上注明标本名称、 标本取材地及制作时。
6、间。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105532651 B 2 一种苔藓植物永久玻片标本制作方法 技术领域 0001 本发明涉及一种生物永久玻片的制作方法, 尤其是涉及一种苔藓植物永久玻片标 本制作方法。 背景技术 0002 在自然科学研究、 苔藓植物种类鉴定、 生物实验教学以及课外科技活动中, 尤其是 在苔藓植物种类鉴定和形态研究中需要进行大量的苔藓显微玻片标本制作; 苔藓玻片可分 为临时玻片和永久玻片, 目前临时玻片制作一般直接用水做浮载剂, 盖上盖玻片后直接观 察, 但这样制作的临时玻片只能保存使用较短时间, 时间稍长水分便会挥发, 影响进一步观 察, 且不能进一步封固保存;。
7、 永久玻片因需要反复观察和长期保存, 故要求所用封固剂保存 时间长、 不变质、 粘合力强、 折光率与所用的载玻片、 盖玻片等的折光率相近。 目前通常采用 石蜡制片技术来封固, 但石蜡制片技术过程繁琐, 制片时间较长, 易受条件限制, 制作过程 中使用化学试剂较多, 部分试剂对人有一定毒害, 易使材料变脆、 变硬或变形, 影响观察正 确性, 并且因苔藓植物细胞中含水量较高, 在脱水过程中易使组织收缩变形, 因此不适用于 苔藓植物。 0003 中国专利CN 101571626A公布了一种生物显微玻片标本透明封固的方法, 用酚醛 清漆作为封固剂对标本进行封固, 该方法用清漆进行封存透光率较高, 物美。
8、价廉, 易于取 材, 但酚醛清漆干固后较脆, 在紫外光的作用下易变黄, 因此会影响后续观察和标本保护。 发明内容 0004 本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种制作方法简单、 透明度好、 保存时间久、 易于观察、 适用于苔藓植物的永久玻片制作方法。 0005 本发明的目的可以通过以下技术方案来实现: 0006 一种苔藓植物永久玻片标本制作方法, 包括以下步骤: 0007 (1)将阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油、 水合氯醛在常温下混合搅拌配备成液体封固剂; 0008 (2)将苔藓叶片或其植株置于双蒸水中浸润后, 将其置于滴有一滴双蒸水的载玻 片中央, 在10倍显微镜下观察并调整。
9、其形态; 0009 (3)用滤纸吸除标本周边1毫米之外的双蒸水, 以既保持苔藓标本湿润周边又未有 过多双蒸水为准; 0010 (4)用玻璃棒蘸取1-2滴封固剂滴到苔藓标本上, 在不含有气泡的情况下盖上盖玻 片, 常温下放置至封固剂干固标本不能移动后在载玻片上贴上标签, 即制作得到苔藓植物 永久玻片标本。 0011 配备液体封固剂时, 阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油、 水合氯醛的比例关系为30g: 50ml: 20ml: 180g。 阿拉伯胶与水的混合比最高值是60, 当阿拉伯胶用量过多时会达到饱和状 态, 不能完全溶解, 以致影响胶体形成; 因阿拉伯胶具有很好的水溶性和乳化性, 在制片过 程中可。
10、以使标本的微胶囊化效率增加, 防止标本内部水分挥发干燥, 提高标本的稳定性, 若 说 明 书 1/3 页 3 CN 105532651 B 3 阿拉伯胶用量太少, 则会影响标本后期的保存状态; 若水合氯醛用量太少, 则会影响标本的 透明度; 水和甘油的混合液可防止水合氯醛结晶, 若甘油用量太小, 易影响试剂稳定性; 在 不同比例对照实验过程中发现, 当维持阿拉伯树胶30g和双蒸水50ml, 溶解度60的比例不 变时, 调整甘油和水合氯醛的比例, 在甘油20ml, 水合氯醛180g时, 试剂的稳定性、 标本的透 明度、 保湿效果较好。 0012 配备液体封固剂时, 用电动磁力搅拌器搅拌阿拉伯树胶。
11、、 双蒸水、 甘油的混合液, 搅拌至阿拉伯树胶溶解, 再加入水合氯醛搅拌。 0013 所述的液体封固剂用棕色试剂瓶避光环境中保存。 0014 所述的标签上注明标本名称、 标本取材地及制作时间。 0015 所述的苔藓包括蓑藓或银叶真藓。 0016 与现有技术相比, 本发明具有以下优点及有益效果: 0017 本发明中阿拉伯树胶的折光率与光学玻璃相似, 有较强的粘合力, 因具有亲水亲 油性, 可溶于水和甘油, 因此是一种天然水包油性天然乳化剂, 具有高溶解性, 并且在热酸 环境有高稳定性, 可防止氧化, 且不会被微生物侵蚀; 水合氯醛易溶于水和甘油, 为常用优 良的化学透明剂之一, 特点是能迅速透入。
12、组织, 使干燥收缩的细胞逐渐膨胀复原, 并能溶解 大多数细胞内含物, 如淀粉粒、 叶绿体、 菊糖、 树脂、 蛋白质、 挥发油等, 使细胞组织清晰透 明, 易于观察; 甘油即可作为溶解质, 又因其具有较好的锁水保湿性能, 是一种较好的保湿 剂; 将阿拉伯树胶、 水合氯醛、 甘油和双蒸水按比例混合配制成的封固剂可长期保存, 随时 取用, 因此制作出的标本具有透明性好、 方法简单、 保存年限长、 较好的保存标本原始状态 的技术效果。 具体实施方式 0018 下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。 0019 实施例1 0020 (1)将阿拉伯树胶30g、 双蒸水50ml、 甘油20ml、 水合氯醛1。
13、80g在常温下混合搅拌配 备成液体封固剂; 0021 (2)将蓑藓叶片或其植株置于双蒸水中浸润, 用镊子将其置于滴有一滴双蒸水的 载玻片中央, 在10倍显微镜下观察并调整其形态; 0022 (3)用滤纸吸除标本周边1毫米之外的双蒸水, 以既保持蓑藓标本湿润周边又未有 过多双蒸水为准; 0023 (4)用玻璃棒蘸取1-2滴封固剂滴到蓑藓标本上, 在不含有气泡的情况下盖上盖玻 片, 常温下放置一个星期至封固剂干固标本不能移动后在载玻片一贴上标签, 注明标本名 称、 标本取材地、 制作时间即制成永久玻片标本。 0024 其中, 封固剂配备流程中需用电动磁力搅拌器搅拌阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油的混 。
14、合液。 封固剂配备流程中需先将阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油混合搅拌至阿拉伯树胶溶解, 再 加入水合氯醛搅拌。 封固剂需用棕色试剂瓶避光环境中保存。 0025 实施例2 0026 (1)、 将阿拉伯树胶30g、 双蒸水50ml、 甘油20ml、 水合氯醛180g在常温下混合搅拌 配备成液体封固剂; 说 明 书 2/3 页 4 CN 105532651 B 4 0027 (2)将银叶真藓叶片或其植株置于双蒸水中浸润, 用镊子将其置于滴有一滴双蒸 水的载玻片中央, 在10倍显微镜下观察并调整其形态; 0028 (3)用滤纸吸除标本周边1毫米之外的双蒸水, 以既保持银叶真藓标本湿润周边又 未有过多双蒸。
15、水为准; 0029 (4)用玻璃棒蘸取1-2滴封固剂滴到银叶真藓标本上, 在不含有气泡的情况下盖上 盖玻片, 常温下放置一个星期至封固剂干固标本不能移动后在载玻片一贴上标签, 注明标 本名称、 标本取材地、 制作时间即制成永久玻片标本。 0030 其中, 封固剂配备流程中需用电动磁力搅拌器搅拌阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油的混 合液。 封固剂配备流程中需先将阿拉伯树胶、 双蒸水、 甘油混合搅拌至阿拉伯树胶溶解, 再 加入水合氯醛搅拌。 封固剂需用棕色试剂瓶避光环境中保存。 0031 上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。 熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改, 并把在此说明的一般 原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。 因此, 本发明不限于上述实施例, 本领 域技术人员根据本发明的揭示, 不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的 保护范围之内。 说 明 书 3/3 页 5 CN 105532651 B 5 。
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