? ? 大花蕙兰的组培繁育和栽培技术研究 ? ? 葛坤红?李芹 摘 要: 大花蕙兰是一种具有很高观赏价值的兰科植物,深受广大消费者的欢迎。传统繁殖方式一般采用分株繁殖,繁殖系数较低,繁殖出的品种质量品质不高。本文主要介绍大花蕙兰的组培快繁和栽培技术两方面内容的研究情况。 关键词: 大花蕙兰;组织培养;栽培管理 大花蕙兰俗称“虎头兰”,为兰科兰属植物,属于复茎兰类的附生兰。原产于中国、印度、缅甸、泰国、越南。大花蕙兰是中国传统节日的主要礼品花卉之一,市场前景广阔,无论是切花品种还是盆花,在国际市场上都占有重要地位。兰花的传统繁殖方式为分株繁殖,然而,一株健壮的兰花一年只能繁殖几个芽,繁殖系数较低,增殖倍数也只有1~3倍。我国许多珍稀品种不能大量繁殖,多数需从国外进口,远远不能满足市场需求,价格长期居高不下,每个叶芽高达上万元。不少品种在栽培条件下不能或很少结种子,如果通过有性繁殖,由于兰花的种子小,胚发育不完全,没有提供营养的胚乳和其它组织,不易发芽。要借助共生的菌类提供营养才能发芽。许多名贵品种实际上是一些自然突变体,如果借助有性生殖过程产生种子,再由种子繁殖后代,那么,这个品种的绝大多数个体将失去原有品种的独特的观赏价值。另外,长期的无性繁殖,造成带病毒的植株日益增多,使兰花的品质严重下降。因此,通过组织培养技术快速繁殖兰花无毒苗和通过现代栽培管理技术生产高品质产品具有十分重要的现实意义。 一、大花蕙兰的组培繁育技术 大花蕙兰传统繁殖方式是分株繁殖,繁殖系数低,易引起退化,新品种少。通过组织培养繁殖,可大大提高繁殖率,且生产的同一批苗易控制花期,能较好地占有市场。 1.外植体的选择与原球茎的诱导。大花蕙兰原球茎诱导采用的外植体主要有茎尖、茎段、试管苗茎段、幼根、花梗等,切取试管苗茎段,用改良White、Vacinandwent培养基附加0.4BA+蔗糖20g/L。将培养物置于摇床上,进行液体振荡培养,光照每天12小时,光照强度2000lx,培养温度25℃±3℃。2周左右外植体膨大,6周左右形成绿色原球茎。取新芽8.0~10.0cm ,切取茎尖0.2~0.5cm。利用5cm以内的叶基进行诱导试验,发现只有在距叶基部0.5~1.0cm处才能诱导出原球茎;利用新出芽的2.0~3.0cm长的幼根,将其切成0.5~0.8cm 的根段,接种后2周左右切口开始膨大,3周以后形成淡绿色原球茎;而利用开花期的花梗进行培养,出愈率达61%,并由愈伤组织诱导出原球茎,诱导率为20%,由于花瓣和叶片在培养过程中褐化严重,均未能诱导出原球茎。由此可见,外植体的最佳选择是新芽和试管苗茎段。 2.原球茎的增殖。在原球茎分化出茎叶之前,将原球茎取出切成小块转移到增殖培养基上。增殖用培养基一般与诱导培养基成份相同,也可用液体振荡培养。将已出现叶原基或长出幼叶的原球茎转移到含有10%香蕉匀浆汁的Knud-sonc固体培养基,幼叶生长迅速,并向下长出根,3个月左后形成10~20cm的完整植株。培养时可根据不同培养物种类,对所有激素及附加物进行调整。加入精氨酸,天门冬氨酸,酵母提取物对原球茎和植株的生长均有促进作用。NAA低于0.1时促进芽的形成,含量约0.6促进根的生长。 将诱导出的大花蕙兰原球茎为培养原材料,在无菌条件下,选取呈嫩绿色、大小基本一致、生命力处于旺盛时期的原球茎,切割后接种到增殖培养基上。15d左右开始长出绿色的原球茎,一般25 d左右,原球茎增殖系数基本稳定。用不同浓度的香蕉汁、6-BA、NAA3种不同的添加物对原球茎的增殖效果进行了对比实验。实验结果表明,3种添加的物增殖效果各有不同。其中,增殖效果最好的是香蕉汁lO%+NAA0.5mg/L,增殖系数达到了4.8;其次为NAA0.5mg/L,增殖系数为4.4,再次为香蕉汁lO%+6-BA0.5mg/L,增殖系数为3.5。总的来说,在NAA浓度为0.5 mg/L的情况下,大花蕙兰的增殖效果均比较好。6-BA对大花蕙兰的原球茎增殖效果不如NAA。 3.原球茎继代过程褐化的防治。缩短继代周期,在诱导7天时做继代培养,可有效克服原球茎诱导过程中的褐化现象,或在初始培养过程中进行短时间的暗培养可显著抑制褐变发生。在原球茎或丛生芽的继代增殖过程中,在培养基中加人0.5~1.0g/L的活性炭,可抑制培养物产生红色的多酚氧化物,从而提高繁殖速度。另外,采用降低琼脂用量制成半固体培养基,将培养块浸在培养基内,可降低培养块黄枯和切口褐化的机会。 4.生根壮苗。生根阶段之前,降低培养基中的激素含量,以便形成健壮芽。在生根壮苗培养基中,NAA用量以0.2~1.0mg/L为最佳,幼苗健壮,叶色深绿,根粗且长、根毛多。在培养基中添加香蕉泥、肌醇和水解酪蛋白能够提高生根率。生根培养基中减少大量元素用量、添加适量的蔗
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