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花蓟马雄虫对雄虫气味源的嗅觉反应.docx

花匠小妙招
2025-01-02 00:22

花蓟马雄虫对雄虫气味源的嗅觉反应花生鱼刺（trybom），也被称为台湾花鱼，属于营马科，属于环马科。花鱼属于蔷薇科和蓟马科，分布在中国和世界大部分地区（韩云台洞，1997）。它是森林植物的一个重要害虫之一。花蓟马对寄主植物的危害主要表现在2个方面:一是直接锉食植物的茎、叶、花、果实等器官,导致叶片变小、干枯;二是传播多种番茄斑萎病毒属Tospovirus病毒,诱发植物病毒病,造成严重的经济损失(Lewis,1997;Nagata and Peters,2001)。目前,对花蓟马的防治方法主要以化学防治为主(吴青君等,2005;钟锋等,2009),但由于花蓟马发育历期较短,个体小且易隐蔽于寄主植物花中,对大多数杀虫剂易产生抗性,从而导致防治的效果并不理想。昆虫信息素作为一种非化学控制措施,不仅可以用于害虫种群动态的监测,同时也可同其他防控措施结合以提高害虫防治效果。聚集信息素是昆虫信息素的一种,已有研究表明,利用聚集信息素是防治蓟马的有效措施之一(Kirk and Hamilton,2004;Hamilton et al.,2005)。目前有关蓟马聚集信息素成分鉴定及生物活性的相关研究国内外仍然较少。迄今为止,只有西花蓟马F.occidentalis的聚集信息素得到有效分离和鉴定,包含有(R)-lavandulyl acetate和neryl(S)-2-methylbutanoate 2种组分(Hamilton et al.,2005),并且已经开发出相应的生防产品。西花蓟马雄虫产生的性信息素不仅有引诱异性以完成交配的功能,也有聚集两性成虫的功效,因此西花蓟马雄虫产生的性信息素也称为聚集信息素(Hamilton et al.,2005)。而目前对于其他蓟马释放的聚集信息素成分的提取鉴定目前国内外未见报道。花蓟马和西花蓟马同属于花蓟马属,二者形态及生物学特性均非常相似,那么花蓟马是否同西花蓟马一样也可以释放聚集信息素?其活性成分同西花蓟马所释放的活性成分是否相同?对于这些问题的回答,不仅有助于更深地理解这两种蓟马之间的关系,同时也为开发花蓟马引诱剂提供理论依据。本研究采用Y型嗅觉仪分别测定花蓟马雌雄成虫和西花蓟马雌雄成虫对其自身气味源的嗅觉反应,通过固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)方法提取花蓟马雄虫挥发物,然后利用含有不同手性柱的气-质联用仪(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)对挥发物进行组分分离和鉴定。 1 材料和方法 1.1 试验设计和饲养花蓟马于2010年采自杭州,西花蓟马于2007年采自北京,两种蓟马分别以四季豆Phaseolus vulgaris L.饲养于人工气候箱(温度26±1℃、相对湿度75%±5%、光照周期14L∶10D)内,试验前花蓟马、西花蓟马已分别在室内连续饲养10代、60代。试验用虫为羽化后2-5 d的成虫。 1.2 机器和工作条件 1.2.1 仪器 1.2.2 irasil-dexbc-质谱条件气相色谱工作条件:手性色谱柱BGB-176 SE(30 m×0.25 mm×0.25μm)和手性色谱柱CP-chirasil-Dex CB(25 m×0.25 mm×0.25μm);不分流进样;程序升温:40℃,保持3 min,以8℃/min升到200℃,保持5 min。进样口温度200℃;载气He(99.999%)。质谱工作条件:离子源:EI;离子源温度:230℃;四级杆温度:150℃;电子能量:70 e V;扫描质量范围35~320 amu。 1.2.3 测试臂之间的夹角依Koschier等(2000)方法设计,并略加改进,Y型嗅觉仪由玻璃制成,适应臂长和测试臂长均为60 mm,内径均为5 mm,两个测试臂之间的夹角为90°。此装置以气泵为动力,空气流经活性炭、分子筛过滤后形成两个分支,每个分支流经一个空气流量计(LZB-3,余姚市奇泉流量仪表有限公司)、50 m L的圆底烧瓶,与Y型管的测试臂相连,各部件之间用teflon管相连。试验温度:25±1℃。 1.3 行为选择测试 1.3.1 确定中使用检察器的制作条件及内容利用Y型嗅觉仪测定花蓟马雄虫释放的挥发性物质的生物活性。在进行行为测试之前,利用高纯二氧化碳气体将花蓟马种群瞬间麻醉,然后用软毛笔轻轻将雄虫或雌虫挑出,约50~60头,将其转移至50 mL圆底烧瓶中,同时瓶中放一湿润的滤纸片,作为聚集信息素气味源。另一相同的圆底烧瓶,瓶中仅放一相同大小的湿润的滤纸片,不放任何蓟马,作为空气对照源。两个圆底烧瓶的进气口和出气口塞上少量的棉花,防止花蓟马成虫从瓶中跑出,用冷光源(10 000 lx)对味源瓶进行光照刺激(Terry and Gardne