长春花萜类吲哚生物碱生物合成途径中重要酶(DXR、SLS、G10H、STR)基因的克隆与表达
摘要： 以分离提取的2周龄长春花植物幼苗总RNA为模板，经两步Gateway-PCR反应扩增得到长春花萜类吲哚生物碱合成途径中编码重要酶：5—磷酸脱氧木酮糖还原酶（DXR）、次番木鳖苷合成酶 （SLS）、牻牛儿醇-10羟化酶（G10H）和异胡豆苷合成酶（STR）的cDNA 基因片段。利用BP重组酶将扩增片段克隆到Gateway化的入门载体pDONR201中，并进行测序验证。测序后的基因通过 LR重组酶的作用转移到带有HIS标签的目标载体pETG10A中，构成重组表达质粒，转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导得到了高效表达，通过Ni-TED树脂纯化方法得到了高纯度的蛋白。
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引用本文
韩 梅;赵 博;安志刚;Thomas Rausch;祖元刚*. 长春花萜类吲哚生物碱生物合成途径中重要酶(DXR、SLS、G10H、STR)基因的克隆与表达[J]. 植物研究, 2007, 27(5): 564-568.
HAN Mei;ZHAO Bo;AN Zhi-Gang;Thomas Rausch;ZU Yuan-Gang*. Cloning and Expression of cDNA Encoding Key Enzymes (DXR,SLS,G10H and STR) in Terpene Indole Alkaloids Biosynthesis Pathway from Catharanthus roseus[J]. Bulletin of Botanical Research, 2007, 27(5): 564-568.
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