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具有防治根结线虫病功能的生物有机肥及制备方法和应用与流程

花匠小妙招
2025-01-05 14:14

1.本技术涉及具有防治作物虫病功能的生物肥料技术领域，具体为具有防治根结线虫病功能的生物有机肥及制备方法和应用。

背景技术：

2.根结线虫(meloidogyne)是一种高度专化型的杂食性植物病原线虫，危害番茄、香蕉、葡萄、西瓜、黄瓜、烟草等多种作物，由于根结线虫主要危害作物的地下根部，因此在根结线虫的发生初期没有明显的症状，很容易让种植者与缺素症混淆，一旦表现明显症状，防治就会变得十分困难，往往给农户造成巨大损失。全世界每年因为根结线虫带来的危害，造成的农业经济损失高达上百亿美元。
3.根结线虫可以寄生于多种不同的农作物上(超过2000种植物)，并进行快速繁殖，再加上相对短的生活史等特点，对农作物的危害很大。寄生植物的根结线虫共有54种，其中比较常见的约在15种左右。在根结线虫属内，以南方根结线虫、花生根结线虫、爪哇根结线虫和北方根结线虫等4个种发生最为普遍。
4.当前农业上对于根结线虫的防治方法主要有物理防治、化学防治和生物防治三种方法。物理防治方法主要有：轮作防治、水淹防治、深翻防治。化学防治药剂主要有：克线磷、米乐尔、阿维菌素等。生物防治主要采用淡紫紫孢菌、厚孢轮枝菌等真菌侵染根结线虫。以上三种方式均能在根结线虫的防控上起到一定的作用，但主要在根结线虫病初期发挥预防作用，因为病害初期症状不明显，根结线虫病一旦爆发，基本已经错过最佳防控时期，虫体及虫卵很难被杀死，作物根部已经严重受损，失去正常功能，病害对作物造成的损害基本无法逆转。

技术实现要素：

5.基于当前根结线虫的防控现状，我公司研制出一款高效、创新、环保的生物防控有机肥，能够对根结线虫的虫体和虫卵起到杀灭作用，同时促进作物根系的重新生长，将其应用在病害已经大面积爆发的作物上，也能发挥较好的效用，这对有机农业的发展和具有一定的促进作用。本技术提供了一种具有防治根结线虫病功能的生物有机肥及其制备方法，用于解决当前根结线虫多发难防的农业生产问题。本技术中提供的的生物有机肥，可以促进作物根系的生长，在病害爆发后可以促使作物重新长出根系，减轻病害对作物产质量造成的损失。
6.具体的，本发明是这样实现的：一种具有防治根结线虫病功能的生物有机肥，包括：20％-25％的水分、5
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的菌株wswfj44功能菌剂，以及有机肥原料，所述有机肥原料为按重量配比3-5份的算聚谷氨酸、8-10份的矿物源黄腐酸、50-70份的万寿菊花渣、15-20 份的菜籽粕、0.1-0.5份的腐熟菌剂构成；所述菌株wswfj44为枯草芽孢杆菌bacillus subtilis，由云南省微生物发酵工程研究中心有限公司筛选获得，其保藏登记号为：cgmcc no.20144。分类命名：枯草芽孢杆菌bacillus sutbtilis，保藏该生物材料样品的单位为中
国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址在北京市朝阳区北辰西路 1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为2020年6月28 日。
7.本发明的另一方面，公开了一种具有防治根结线虫病功能的生物有机肥的制备方法，包括以下步骤：
8.步骤s1、按重称取聚谷氨酸3-5份、矿物源黄腐酸8-10份、万寿菊花渣50-70份、菜籽粕15-20份、腐熟菌剂0.1-0.5份后混合均匀，按照重量比将水分调整到50％-60％，采用可自动翻抛曝气的固体好氧发酵池，好氧发酵18-25天，每天翻抛1-2次，控制发酵物料温度在60℃以上保持10-15天，温度降低至室温后，得到有机肥半成品；
9.步骤s2：将菌株wswfj44采用液体好氧发酵2-3天，制成防控根结线虫病的功能菌剂；所述菌株wswfj44为枯草芽孢杆菌bacillus subtilis，由云南省微生物发酵工程研究中心有限公司筛选获得，其保藏登记号为：cgmcc no.20144；
10.步骤s3：将功能菌剂按照重量比5
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的比例喷洒至所述有机肥半成品表面，混合均匀，得到生物有机肥半成品；
11.步骤s4：将步骤3中的生物有机肥半成品进行陈化，10-15天后低温烘干，烘干温度为40-60℃，烘干后水份至物料总重量的20-25％，得具有防治根结线虫病功能的生物有机肥。
12.进一步到的，步骤s1中采用的菜籽粕为油菜枯饼；所述万寿菊花渣在使用前需粉碎至20目以下。
13.进一步到的，步骤s1中采用的腐熟菌剂为云南云叶化肥股份有限公司研制的专利号为“201310055173.9”的腐熟菌剂。
14.进一步到的，步骤s1中所述发酵原料的c/n为25-30:1；步骤 s2中所述功能菌剂的发酵培养基原料为：葡萄糖10-30份、蛋白胨 10-20份、氯化钠3-7份、牛肉膏0.3-0.8份，水1000份。
15.进一步到的，步骤s2中所述功能菌剂的培养温度为30-37℃，适宜酸碱度为6-8。
16.进一步到的，步骤s3中的功能菌剂用水稀释200-500倍使用。
17.本发明的工作原理和有益效果介绍：菌株为枯草芽孢杆菌 bacillus subtilis，由云南省微生物发酵工程研究中心有限公司筛选获得，其保藏登记号为：cgmcc no.20144。该菌株具有杀灭根结线虫虫卵的功能，不仅能够长期存活在土壤中，并且能够在作物中定殖，成为作物内生菌，从而有效减少根结线虫在作物根部的寄生，减轻根结线虫对作物根部的损害；基于生物有机肥中添加了聚谷氨酸和矿物源黄腐酸，这两种生物刺激素可以促进作物根系的生长，能够在功能微生物发挥防控效果后，促进植物根系的重新生长，以减少由于根系受损造成的损失，且与菌株wswfj44能够很好的共生，生防有机肥中添加了万寿菊花渣，万寿菊可以分泌一种杀线虫物质，以万寿菊花渣作为生物有机肥的主要原料，与功能菌种配合作用，可以增强生物有机肥对根结线虫的防控效果。菜籽粕腐熟之后会分解出大量氨基酸、腐植酸、脂肪酸等营养成分，对于作物病害防控及根系重新生长后的营养吸收具有促进作用，能够在作物病害预后促使作物重新恢复生长活力。本技术所提供的生防有机肥及制备方法，采用内生菌定殖、病害防治、根系重新生长、促进营养吸收的技术手段，将根结线虫防治和作物营养吸收融于一体，与常规防治方法相比，能够大大减少根结线虫病发生后出现的作物死亡和减产，帮助作物恢复到健康状态，促进农业的可持续发展；与当前农业
生产中常用的淡紫紫孢菌、厚孢轮枝菌相比，采用以上两种真菌进行防控，只能在病害发生初期对根结线虫进行侵染杀灭，病害大规模发生后即无法有效进行防控；采用本技术中的枯草芽孢杆菌进行防控，菌株可作为作物内生菌，长期、稳定、持久、有效地存活在作物体内，并发挥防控效果，能够在病害发生初期进行有效杀灭，在病害大规模发生后也可进行有效防控，更加适用于农业生产的实际需求。
具体实施方式
18.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面结合具体实施方式，对本发明进一步详细说明。应该理解，这些描述只是示例性的，而并非要限制本发明的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知结构和技术的描述，以避免不必要地混淆本发明的概念。
19.本实施例提供了一种如上述的防控根结线虫病的生物有机肥的制备方法，包括主要按以下步骤流程操作：
20.步骤1：按重称取发酵原料后混合均匀，按照重量比将水分调整到50％-60％，采用可自动翻抛曝气的固体好氧发酵池，好氧发酵18-25 天，每天翻抛1-2次，控制发酵物料温度在60℃以上保持10-15天，温度降低至室温后，得到有机肥半成品；
21.步骤2：将菌株wswfj44采用液体好氧发酵2-3天，制成防控根结线虫病的功能菌剂；
22.步骤3：将功能菌剂按照重量比5
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的比例喷洒至所述有机肥半成品表面，混合均匀，得到生物有机肥半成品；
23.步骤4：将步骤3中的生物有机肥半成品进行陈化，10-15天后低温烘干，烘干温度为40-60℃，烘干后水份至物料总重量的20-25％，即为生物有机肥成品。
24.步骤5，检测、称量、包装。将成品仓生物有机肥按ny884标准进行全项检测，合格后转入计量称，称量并包装。
25.进一步优选地，步骤1中所述发酵原料包括：聚谷氨酸、矿物源黄腐酸、万寿菊花渣、菜籽粕、腐熟菌剂。
26.进一步优选地，步骤1中所述发酵原料重量配比为：聚谷氨酸 3-5份、矿物源黄腐酸8-10份、万寿菊花渣50-70份、菜籽粕15-20 份、腐熟菌剂0.1-0.5份。
27.进一步优选地，步骤1中采用的菜籽粕为油菜枯饼。采用该菜籽粕，能有效提高有机肥中蛋白质和脂肪酸含量，增加施肥后肥田效果。
28.进一步优选地，步骤1中采用的万寿菊花渣在使用前需粉碎至20目以下，以便能够快速、充分地腐熟。
29.进一步优选地，步骤1中采用的聚谷氨酸和矿物源黄腐酸均为工业生产等级。
30.进一步优选地，步骤1中采用的腐熟菌剂为云南云叶化肥股份有限公司研制的专利号为“201310055173.9”的腐熟菌剂。
31.进一步优选地，步骤1中所述发酵原料的c/n为25-30:1，可以通过调节各原料配比进行调整，按此碳氮比能够有效促进物料分解，加快发酵进程，得到技术指标较优质的有机肥半成品。按此条件发酵后，能有效分解万寿菊花渣中所含大量植物纤维，提高有机物料的分解程度，提高肥料中营养成分在土壤中的利用率。
32.进一步优选地，步骤2中所述功能菌剂的发酵培养基原料为：葡萄糖、蛋白胨、氯化
钠、牛肉膏、水。
33.进一步优选地，步骤2中所述功能菌剂的发酵培养基重量配比为：葡萄糖10-30份、蛋白胨10-20份、氯化钠3-7份、牛肉膏0.3-0.8份，水1000份。
34.进一步优选地，步骤2中所述功能菌剂的培养温度为30-37℃，适宜酸碱度为6-8。
35.进一步优选地，步骤2中所述功能菌剂发酵2-3天后，有效活菌数可达到2-10亿个/ml。
36.进一步优选地，步骤2中所述功能菌剂可以在作物体内存活，成为作物内生菌，长效持久地进行根结线虫的防控。
37.进一步优选地，步骤3中功能菌剂可以先用水进行稀释，稀释倍数为200-500倍，稀释后再进行喷洒，以保证喷洒更加均匀。
38.进一步优选地，步骤3中有机肥半成品可以采用发酵池中的翻抛装置进行混匀，之后再通过皮带运送至陈化池进行陈化。
39.进一步优选地，步骤4中生物有机肥半成品进行陈化是在陈化池中进行，在此过程中不进行翻抛。
40.进一步优选地，步骤4中所述烘干为：在40-60℃下，烘干至物料含水量至20-25％止。采用该温度进行烘干，一方面减少生防功能微生物死亡及代谢产物失活，同时降低物料含水量，避免物料在包装后继续发热。
41.进一步优选地，步骤5中所得到生物有机肥成品的外观、技术指标符合ny884-2012《生物有机肥》的要求，重金属及其他有毒有害物质限量指标符合gb38400-2019《肥料中有毒有害物质的限量要求》的要求。
42.优选地，可以理解为这样的具体操作步骤：
43.步骤1：将万寿菊花渣粉碎至20目以下，称取聚谷氨酸3-5份、矿物源黄腐酸8-10份、万寿菊花渣50-70份、菜籽粕15-20份、腐熟菌剂0.1-0.5份，混合均匀，发酵原料的c/n为25-30:1，按照重量比将水分调整到50％-60％，采用可自动翻抛曝气的固体好氧发酵池，好氧发酵18-25天，每天翻抛1-2次，控制发酵物料温度在60℃以上保持10-15天，温度降低至室温后，得到有机肥半成品；
44.步骤2：按照葡萄糖10-30份、蛋白胨10-20份、氯化钠3-7份、牛肉膏0.3-0.8份，水1000份的配比进行液体发酵培养基的配制，采用盐酸和氢氧化钠调节酸碱度为6-8，将菌株wswfj44接种到此灭菌培养基中好氧发酵2-3天，培养温度为30-37℃，制成防控根结线虫病的功能菌剂，有效活菌数可达到2-10亿个/ml；
45.步骤3：将功能菌剂按照重量比5
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的比例喷洒至所述有机肥半成品表面，功能菌剂用水稀释200-500倍，再进行喷施，以保证喷洒更加均匀，喷洒后采用发酵池中的翻抛装置对物料进行翻抛混匀，得到生物有机肥半成品，之后再通过皮带运送至陈化池进行陈化；
46.步骤4：将步骤3中的生物有机肥半成品进行陈化，10-15天后低温烘干，烘干温度为40-60℃，烘干后水份至物料总重量的20-25％，即为生物有机肥成品。
47.步骤5，检测、称量、包装。将成品仓生物有机肥按ny884标准进行全项检测，生物有机肥成品的外观、技术指标符合ny884-2012 《生物有机肥》的要求，重金属及其他有毒有害物质限量指标符合 gb38400-2019《肥料中有毒有害物质的限量要求》的要求，检测合格后
转入计量称，称量并包装。
48.基于以上步骤，实施例1：
49.步骤1：将万寿菊花渣粉碎至20目以下，称取聚谷氨酸3份、矿物源黄腐酸10份、万寿菊花渣60份、菜籽粕15份、腐熟菌剂0.5 份，混合均匀，发酵原料的c/n为25:1，按照重量比将水分调整到 60％，采用可自动翻抛曝气的固体好氧发酵池，好氧发酵18天，每天翻抛2次，控制发酵物料温度在60℃以上保持10天，温度降低至室温后，得到有机肥半成品；
50.步骤2：按照葡萄糖10份、蛋白胨20份、氯化钠3份、牛肉膏0.8份，水1000份的配比进行液体发酵培养基的配制，采用盐酸和氢氧化钠调节酸碱度为6，将菌株wswfj44接种到此灭菌培养基中好氧发酵3天，培养温度为30℃，制成防控根结线虫病的功能菌剂，有效活菌数可达到5亿个/ml；
51.步骤3：将功能菌剂按照重量比5
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的比例喷洒至所述有机肥半成品表面，功能菌剂用水稀释200倍，再进行喷施，以保证喷洒更加均匀，喷洒后采用发酵池中的翻抛装置对物料进行翻抛混匀，得到生物有机肥半成品，之后再通过皮带运送至陈化池进行陈化；
52.步骤4：将步骤3中的生物有机肥半成品进行陈化，10天后低温烘干，烘干温度为60℃，烘干后水份至物料总重量的20％，即为生物有机肥成品。
53.步骤5，检测、称量、包装。将成品仓生物有机肥按ny884标准进行全项检测，生物有机肥成品的外观、技术指标符合ny884-2012 《生物有机肥》的要求，重金属及其他有毒有害物质限量指标符合 gb38400-2019《肥料中有毒有害物质的限量要求》的要求，检测合格后转入计量称，称量并包装。
54.实施例2
55.步骤1：将万寿菊花渣粉碎至20目以下，称取聚谷氨酸5份、矿物源黄腐酸8份、万寿菊花渣50份、菜籽粕20份、腐熟菌剂0.1 份，混合均匀，发酵原料的c/n为30:1，按照重量比将水分调整到 50％，采用可自动翻抛曝气的固体好氧发酵池，好氧发酵25天，每天翻抛1次，控制发酵物料温度在60℃以上保持15天，温度降低至室温后，得到有机肥半成品；
56.步骤2：按照葡萄糖30份、蛋白胨10份、氯化钠7份、牛肉膏 0.3份，水1000份的配比进行液体发酵培养基的配制，采用盐酸和氢氧化钠调节酸碱度为8，将菌株wswfj44接种到此灭菌培养基中好氧发酵2天，培养温度为37℃，制成防控根结线虫病的功能菌剂，有效活菌数可达到2亿个/ml；
57.步骤3：将功能菌剂按照重量比10
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的比例喷洒至所述有机肥半成品表面，功能菌剂用水稀释500倍，再进行喷施，以保证喷洒更加均匀，喷洒后采用发酵池中的翻抛装置对物料进行翻抛混匀，得到生物有机肥半成品，之后再通过皮带运送至陈化池进行陈化；
58.步骤4：将步骤3中的生物有机肥半成品进行陈化，15天后低温烘干，烘干温度为40℃，烘干后水份至物料总重量的25％，即为生物有机肥成品。
59.步骤5，检测、称量、包装。将成品仓生物有机肥按ny884标准进行全项检测，生物有机肥成品的外观、技术指标符合ny884-2012 《生物有机肥》的要求，重金属及其他有毒有害物质限量指标符合 gb38400-2019《肥料中有毒有害物质的限量要求》的要求，检测合格后转入计量称，称量并包装。
60.实施例3
61.步骤1：将万寿菊花渣粉碎至20目以下，称取聚谷氨酸4份、矿物源黄腐酸9份、万寿
菊花渣70份、菜籽粕17份、腐熟菌剂0.3 份，混合均匀，发酵原料的c/n为28:1，按照重量比将水分调整到 55％，采用可自动翻抛曝气的固体好氧发酵池，好氧发酵22天，每天翻抛1次，控制发酵物料温度在60℃以上保持13天，温度降低至室温后，得到有机肥半成品；
62.步骤2：按照葡萄糖20份、蛋白胨15份、氯化钠5份、牛肉膏 0.5份，水1000份的配比进行液体发酵培养基的配制，采用盐酸和氢氧化钠调节酸碱度为7，将菌株wswfj44接种到此灭菌培养基中好氧发酵3天，培养温度为35℃，制成防控根结线虫病的功能菌剂，有效活菌数可达到10亿个/ml；
63.步骤3：将功能菌剂按照重量比8
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的比例喷洒至所述有机肥半成品表面，功能菌剂用水稀释300倍，再进行喷施，以保证喷洒更加均匀，喷洒后采用发酵池中的翻抛装置对物料进行翻抛混匀，得到生物有机肥半成品，之后再通过皮带运送至陈化池进行陈化；
64.步骤4：将步骤3中的生物有机肥半成品进行陈化，13天后低温烘干，烘干温度为50℃，烘干后水份至物料总重量的23％，即为生物有机肥成品。
65.步骤5，检测、称量、包装。将成品仓生物有机肥按ny884标准进行全项检测，生物有机肥成品的外观、技术指标符合ny884-2012 《生物有机肥》的要求，重金属及其他有毒有害物质限量指标符合 gb38400-2019《肥料中有毒有害物质的限量要求》的要求，检测合格后转入计量称，称量并包装。
66.对产品效果进行测试
67.测试1根结线虫生防菌防控效果验证
68.1、目的
69.为验证具有防控根结线虫功能的生防菌剂的效果，将功能菌株发酵培养液稀释不同倍数，对烟草根结线虫进行生测试验，以便验证所筛选得到菌群的功能性，为后期菌株的应用提供依据。
70.2、材料与方法
71.2.1材料
72.供试根结线虫：烟草根结线虫
73.供试菌群：编号为wswfj44的枯草芽孢杆菌
74.供试药剂：20％噻唑膦水乳剂、广谱抑菌素
75.2.2方法
76.采用通过卡勃过筛法筛选得到的根结线虫悬浮液为试验材料，吸取10ml线虫悬浮液放入灭菌的直径6cm培养皿中，再将菌株培养液或其稀释培养液加入培养皿中，每个培养皿中加入1ml，以广谱抑菌素、20％噻唑膦水乳剂和清水作为对照处理，试验设置处理如下表1，每个处理重复3次，放置于常温黑暗条件下培养，分别于1h、2h、 4h、8h、24h、48h在解剖显微镜下观察线虫的活性情况，并记录。
77.表1试验处理设置
78.处理编号处理稀释倍数添加剂量a1菌株发酵液(原液)原液1mla2菌株发酵液62.5倍1mla3菌株发酵液125倍1mla4菌株发酵液250倍1ml
a5菌株发酵液500倍1mlb1广谱抑菌素原液1mlb2广谱抑菌素62.5倍1mlb3广谱抑菌素125倍1mlb4广谱抑菌素250倍1mlb5广谱抑菌素500倍1mlc120％噻唑膦水乳剂1000倍1mld1空白对照(清水处理)/1ml
79.3、结果记录及分析
80.根据下述表2中统计结果得出：菌株发酵液在使用原液、稀释 62.5倍液、稀释125倍液时，36h能达到与化学农药噻唑膦稀释1000 倍的效果，线虫均完全死亡；稀释250倍后效果逐渐减弱，只有大部分线虫死亡；稀释500倍后，只有一小部分现充死亡。而广谱抑菌素由于原液浓度较高，导致加入后与线虫悬浮液混合后无法观察到线虫，因此该处理未进行统计；从稀释62.5倍到500倍，线虫均有部分死亡，而相对较好的处理为稀释125倍，有两个重复中有大部分线虫死亡，其余处理均未能达到预期效果，无法与化学农药噻唑膦稀释1000 倍及菌群原液相比。
81.表2根结线虫室内生测统计
82.[0083][0084]
注：注：“—”表示无线虫死亡，“+”表示极少部分线虫死亡；“++”表示大部分线虫死亡；“+++”表示线虫完全死亡。
[0085]
通过本试验的统计情况可以得知，筛选得到的菌株具有明显致死线虫的能力，并且将菌株培养液稀释到500倍，依然能够杀死部分线虫，这表明功能菌株可以应用与有机肥及其他产品中，将功能菌株与其他防控材料相结合有可能会具有更佳的防控效果。
[0086]
测试2防控线虫功能菌剂与有机肥互配对线虫的作用
[0087]
目的：为验证杀线虫菌剂与油枯型有机肥互配后对模式线虫室内活性的影响，特开展以下试验。
[0088]
1试验材料
[0089]
1.1供试材料：
[0090]
秀丽隐杆线虫(实验室养殖)
[0091]
wswfj44枯草芽孢杆菌菌粉(云南省微生物发酵工程研究中心有限公司生产)
[0092]
油枯型有机肥(云南云叶化肥股份有限公司生产)
[0093]
1.2供试培养基
[0094]
lb培养基，按常规方法配置。
[0095]
2试验方法
[0096]
根据生物有机肥技术指标要求，有效活菌数≧0.2亿/g。将 wswfj44枯草芽孢杆菌菌粉按照有效活菌数比例添加至有机肥中，添加后进行有效活菌数检测及生物有机肥浸出液室内线虫抑制试验。
[0097]
2.3.1有效活菌数检测采用稀释涂布平板法进行检测，检测得到的有效活菌数≧0.2亿/g时才可应用于试验。
[0098]
2.3.2生物有机肥浸出液室内线虫抑制试验，将配制好的生物有机肥浸泡2h后过滤得到浸出液，再将浸出液与模式线虫按1:1进行混合，混合后在显微镜下观察其抑制情况，同时以未添加菌粉的有机肥浸出液作为对照，将不同时间段的抑制情况进行统计并记录。表格。
[0099]
3结果统计与分析
[0100]
根据上述试验结果进行统计分析，以期得到生防线虫生物有机肥。
[0101]
取生物有机肥10g置于100ml水中浸泡两小时，过滤得到生物有机肥浸出液，按上述方法进行室内线虫抑制试验，其结果如下表：
[0102]
表3生物有机肥浸出液对线虫抑制活性情况统计
[0103]
处理5min10min30min1h生物有机肥浸出液+++++++有机肥浸出液
‑‑‑‑
[0104]
注：上述抑制情况表示方法为：“+++”表示完全死亡、“++”表示明显抑制(大部分死亡)、“+”表示部分抑制(少部分死亡)、
“‑”
表示无抑制(无死亡)。
[0105]
根据表3中统计结果来看：生物有机肥浸出液从5min开始对模式线虫有少部分抑制，出现少部分模式线虫僵直，到1h时完全死亡。而对照有机肥浸出液则对模式线虫无抑制，这说明主要对线虫有效的成分为功能菌剂。通过本试验可以得到以下结论：采用防线虫功能菌种与有机肥料进行复配，得到的生物有机肥对线虫具有杀灭作用。
[0106]
测试3防控线虫功能生物有机肥在田间的应用效果
[0107]
采用小面积示范的方式，开展防控线虫功能生物有机肥的推广应用工作，通过对施肥前后植烟土壤养分、烟株的田间长势长相和农艺性状、线虫的发生状况、经济性状和烟叶品质等数据的综合分析，客观评价生防功能有机肥在曲靖烟区的应用效果，为后期大面积的推广应用提供技术支撑。
[0108]
1.材料与方法
[0109]
1.1示范地点
[0110]
示范安排在云南省内主要烟区进行，示范地块往年发病严重，示范前对两块试验地土壤中线虫的虫口密度进行了统计，结果如下：
[0111]
表4示范地块土壤中线虫虫口密度调查
[0112][0113]
1.2示范材料
[0114]
供试品种：当地主栽品种云烟97。
[0115]
供试肥料：烟草专用复合肥(n-p2o
5-k2o＝15-8-25)，防控线虫功能生物有机肥，油枯发酵有机肥，普通过磷酸钙(p2o5≥17％)，硝酸钾(n-p2o
5-k2o＝13.5-0-44.5)，硫酸钾(k2o≥50％)。
[0116]
供试生物菌剂(制剂)：由云南省微生物发酵工程研究中心统一提供的各类功能菌剂及其制剂产品。
[0117]
1.3试验示范设计
[0118]
在两个示范点各设置15亩的示范区，示范区内施用防控线虫功能生物有机肥200g/株，以示范区周围施用油枯发酵有机肥108g/株的连片地块为对照，其余水肥管理一致。
[0119]
(1)a示范区的施肥方案
[0120]
亩施肥量：亩施纯氮6.5kg，氮、磷、钾比为1:1.5:3，每亩施用防控线虫功能生物有机肥185.2kg、烟草专用复合肥34.3kg、普钙41.2kg、硫酸钾13kg、硝酸钾10kg。
[0121]
施肥方法：防控线虫功能生物有机肥、烟草专用复合肥、普钙和硫酸钾作基肥，其中防控线虫功能生物有机肥在移栽前塘施，烟草专用复合肥、普钙和硫酸钾在移栽时中层环施；硝酸钾作追肥，在移栽后30天左右兑水浇施。
[0122]
单株肥料用量：示范区株行距为120cm
×
60cm，每亩栽烟926株，折合每株施用防控线虫功能生物有机肥200g、烟草专用复合肥37g、普钙44.5g、硫酸钾14g、硝酸钾10.8g。
[0123]
(2)b示范区的施肥方案
[0124]
亩施肥量：亩施纯氮6.5kg，氮、磷、钾比为1:1.5:3，每亩施用防控线虫功能生物有机肥185.2kg、烟草专用复合肥46.6kg、普钙48.3kg、硫酸钾18.67kg。
[0125]
施肥方法：防控线虫功能生物有机肥、烟草专用复合肥、普钙和硫酸钾均作基肥，其中防控线虫功能生物有机肥在移栽前塘施，烟草专用复合肥、普钙和硫酸钾在移栽时中层环施。
[0126]
单株肥料用量：示范区株行距为120cm
×
60cm，每亩栽烟926株，折合每株施用防控线虫功能生物有机肥200g、烟草专用复合肥50.3g、普钙52.2g、硫酸钾20.1g。
[0127]
1.4调查和记录
[0128]
1.4.1土壤养分调查
[0129]
每个示范点在施肥前取一个基础土样，烤烟采烤后示范区和对照区各取1个土样，合计6个土样(每个土样1kg)，对土壤ph值、有机质、全氮、全磷、全钾、水解性氮、有效磷、速效钾进行检测分析。
[0130]
1.4.2农艺性状调查
[0131]
在移栽后50天和采烤前，大田示范的示范区和对照区各选15株有代表性的烟株，测量其株高、茎围、叶片数、最大叶长和最大叶宽等。
[0132]
1.4.3病害发生情况调查
[0133]
(1)在采烤后取根系调查各处理根结线虫的发生情况。
[0134]
(2)在整个大田生育期对其他主要病害的发生情况进行调查。
[0135]
1.4.4经济性状调查
[0136]
每个处理单独挂牌烘烤，对其亩产量、亩产值、均价、上等烟比例和中上等烟比例进行统计。
[0137]
1.4.5烟叶品质分析
[0138]
各示范点的示范区和对照区分别选取x2f、c3f、b2f各1kg统一送检，进行烟叶内在化学成分分析。
[0139]
2.结果与分析
[0140]
2.1增施防控线虫功能生物有机肥对烤烟采烤后土壤养分的影响
[0141]
由表5可知，增施生防有机肥后土壤各项养分指标较对照均有所增加，ph略有下降；除b对照区全磷含量略有增加外，其余养分含量均低于示范区，表明示范区增施防控线虫功能生物有机肥后，对于土壤肥力的保持具有积极的作用。
[0142]
表5土壤养分情况
[0143][0144]
2.2增施防控线虫功能生物有机肥对烤烟农艺性状的影响
[0145]
由表6可知，移栽后55天，a区示范与对照各农艺性状指标差异不明显，b区示范区各指标均高于对照区；采烤前，两个示范点示范区烟株株高、叶片数、中部叶最大叶面积均优于对照区，表明增施防控线虫功能生物有机肥有利于促烟株的生长发育，促进叶片开片，改善烤烟的农艺性状。
[0146]
表6农艺性状调查
[0147][0148]
2.3增施防控线虫功能生物有机肥对烤烟病害发生情况的影响
[0149]
2.3.1增施防控线虫功能生物有机肥对根结线虫发生情况的影响
[0150]
从表7可以看出，a区烟株的根系受线虫的侵染程度整体稍低，示范区的发病率和病情指数均低于对照，说明防控线虫功能生物有机肥对根结线虫有一定的防效。b区由于受前期干旱气候影响，导致烟株发育受阻，根系弱小，导致烟株抵抗线虫的侵染能力变弱，示范区和对照区的发病率分别为16.78％和20.50，示范区的病情指数仍然低于对照。
[0151]
表7根结线虫发生情况
[0152][0153]
2.3.2增施防控线虫功能生物有机肥对烤烟其他病害发生情况的影响
[0154]
由表8可知，两个示范点其他的主要病害均为普通花叶病、气候性斑点病和黑胫病。示范处理较对照普通花叶病、气候性斑点病、黑胫病的发病率均有所下降，表明增施防控线虫功能生物有机肥在一定程度上可以提高烟株的抗病性，减少病害的发生。
[0155]
表8主要病害统计
[0156][0157]
2.3.3增施防控线虫功能生物有机肥对烤烟经济性状的影响
[0158]
由表9可知，a区示范区产量较对照增加2.79％,上等烟比例较对照增加3.24％、中上等烟比例较对照增加2.19％，亩产值较对照增加 1.21％；b区示范区亩产量较对照增加3.65％、亩产值较对照增加3.44％，上等烟比例增加8.38％，中上等烟比例增加3.32％，表明增施防控线虫功能生物有机肥可有效提高烟叶中上等烟比例和烟叶产质量，改善烤烟的经济性状。
[0159]
表9增施防控线虫功能生物有机肥对烤烟经济性状的影响
[0160][0161][0162]
2.3.4增施防控线虫功能生物有机肥对烤后烟叶化学成分的影响
[0163]
由表10可知，就下部叶而言，a区示范区总糖、总氮、氧化钾、氯离子含量高于对照，还原糖、烟碱含量差异不明显；b区示范区总糖、还原糖、烟碱、氧化钾、氯离子含量均高于对照，且氧化钾含量均在2.0％以上，达到优质烟叶标准。
[0164]
就中部叶而言，b区示范总糖、还原糖和烟碱含量高于对照，其余均低于对照，且各化学成分指标比较适中，符合优质烟叶的标准； b区示范区烟叶总氮、烟碱均高于对照区，氧化钾含量均在2.0％以上，氯离子含量较a区稍高，可能是由于当地有施用含氯肥料的习惯所致。
[0165]
就上部叶而言，a区示范烟株总糖、还原糖、总氮、烟碱含量均高于对照，氧化钾含量均达2.0％以上，氯离子含量相差不大；b区示范区总糖、总氮、氧化钾含量高于对照，对照烟碱含量稍高，劲头较大，整体氧化钾含量稍低，氯离子含量相差不大。
[0166]
综上所述，增施防控线虫功能生物有机肥使烟叶还原糖含量维持在15％以上的适宜范围，可有效提高烟叶的吸食品质，同时维持氧化钾含量都在2.0以上，达到优质烟叶的范围。
[0167]
表10烟叶化学成分统计
[0168][0169]
3.结论与讨论
[0170]
在a区和b区开展的防控线虫功能生物有机肥示范，各区在栽培、管理条件一致的情况下，增施防控线虫功能生物有机肥后，对于土壤肥力的保持具有积极的作用，有利于烟株的生长发育，促进叶片开片，提高烟叶产量和质量，降低烟草病害的发生率；同时示范烟叶化学成分还原糖含量维持在15％以上的适宜范围，可有效提高烟叶的吸食品质，同时维持氧化钾含量都在2.0以上，达到优质烟叶的范围。
[0171]
整体而言，增施防控线虫功能生物有机肥对于植烟土壤保育、烤烟增产、烟农增收具有积极影响，同时，对于烟草根结线虫病具有一定的防治效果，因此认为本产品中的功能菌种和生防有机肥具有广阔的应用前景，对于烤烟根结线虫及其他病害的防控有较好的效果，对于烤烟产量及品质的保证具有重要意义。
[0172]
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