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濒危蕨类植物水蕨的繁育方法.pdf

花匠小妙招
2025-01-16 23:52

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1、(10)授权公告号 CN 102613075 B (45)授权公告日 2013.10.16 CN 102613075 B *CN102613075B* (21)申请号 201210075022.5 (22)申请日 2012.03.21 A01H 4/00(2006.01) A01G 31/00(2006.01) (73)专利权人江汉大学地址 430056 湖北省武汉市沌口经济技术开发区江汉大学科研处 (72)发明人董元火 (74)专利代理机构武汉开元知识产权代理有限公司 42104 代理人俞鸿 (54) 发明名称濒危蕨类植物水蕨的繁育方法 (57) 摘要本发明公开了一种濒危蕨。

2、类植物水蕨的繁育方法，包括水蕨孢子采集，消毒，接种于培养皿，在人工气候箱中培养获得水蕨幼苗，然后将水蕨幼苗移植处理并移入铺有改良土壤的模拟野生水生环境的人工清水池中，完成水蕨孢子体幼苗生长、营养生长和孢子体成熟生长，最终获得水蕨孢子，实现了水蕨的人工繁殖。本发明实现了人工控制水蕨孢子萌发和配子体发育，提供了可供迁地保护和规模化栽培生产的水蕨幼苗；通过模拟水蕨的野生水生环境，实现了水蕨的异地繁殖，且成活率高，为大规模工业化栽培生产水蕨提供了技术支持。通过水蕨的人工繁殖技术的实施，有利于濒危水生蕨类植物水蕨的迁地保护和就地保护以及回归原产地与。

3、种群恢复等保护工作的实现。 (51)Int.Cl. 审查员夏文静权利要求书 1 页说明书 3 页附图 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利权利要求书1页说明书3页附图4页 (10)授权公告号 CN 102613075 B CN 102613075 B *CN102613075B* 1/1 页 2 1. 一种濒危蕨类植物水蕨的繁育方法，其步骤是：（1）水蕨孢子采集：在水蕨孢子成熟时期，采集水蕨孢子体，待干燥后从水蕨孢子体中采集黄褐色的水蕨孢子；（2）水蕨孢子消毒处理：将水蕨孢子用质量百分比浓度为5%次氯酸钠水溶液消毒10分钟，。

4、然后离心，除去其中的空孢子囊和杂物，除去次氯酸钠，再用蒸馏水多次冲洗消毒过的水蕨孢子，加蒸馏水制成水蕨孢子悬浮液，在显微镜下计数并稀释水蕨孢子悬浮液，得到浓度为 140 160 个 /ml 的水蕨孢子液；（3）接种：将含有 1% 琼脂的 knop s 营养液的培养基置于直径为 6cm 的培养皿中，以无菌操作法，将水蕨孢子液接种于所述培养皿中；（4）人工气候箱中培养：将接种后的培养皿置于 SPRX600B 智能人工气候箱中培养，光照强度为6000LX，培养温度为2426，湿度为80%以上，每日光照为1114h，直至培养皿中的水蕨孢子发育成具。

5、有 2 3 片营养叶，高 1.4 1.6cm 的水蕨幼苗；（5）水蕨幼苗移植处理：将水蕨幼苗从人工气候箱中移出并移栽到湿泥土中，保持室温 25 27，使水浸没水蕨幼苗顶端 0.5 0.8cm，于阴凉处 2 3 天，提高成活率；（6）水蕨幼苗的生长：将阴凉处的水蕨幼苗移入铺有改良土壤的模拟野生水生环境的人工清水池中，保持每日光照 11 14 小时，室温 28 32，水温 23 26，待水蕨幼苗生长 19 21 天后，升高室温至 33 37，升高水温至 26 30， 70 80 天后既获得水蕨孢子体，在水蕨幼苗的生长过程中，始终保持水蕨幼苗浸入水。

6、中部分的高度为 1.4 1.6cm ；其中，所述人工清水池中的水体 pH 值为 7.0 7.5，水体为微流动，流速为 250 310ml/min ；所述改良土壤为壤土、磨菇渣和黄砂的混合物，其中各组分的质量比为壤土 : 磨菇渣 : 黄砂 =6:1:1。 2. 根据权利要求 1 所述的濒危蕨类植物水蕨的繁育方法，其特征在于：改良土壤是以如下方法制备的：将壤土、磨菇渣和黄砂按照质量比 6:1:1 的比例混合，并置于水中 15 20 天，让磨菇渣充分腐烂，得到混合土壤，再用鸡粪，将混合土壤的 pH 值调至 6.80 6.85，既得改良土壤。 3. 根据权利要求。

7、 1 所述的濒危蕨类植物水蕨的繁育方法，其特征在于：所述人工清水池的深度为 23 27cm，其两端分别设有一个进水口和一个出水口，所述进水口和所述出水口的水平高度相同，且与池底的距离为 14 15cm。 4. 根据权利要求 1 所述的濒危蕨类植物水蕨的繁育方法，其特征在于：所述人工清水池中的水体流速为 300ml/min。权利要求书 CN 102613075 B 2 1/3 页 3 濒危蕨类植物水蕨的繁育方法技术领域 0001 本发明涉及一种蕨类植物的繁育方法，具体地指一种濒危蕨类植物水蕨的繁育方法。背景技术 0002 水蕨为一年生水生蕨类植物，现被。

8、列为国家二级保护野生植物。因二型叶，造型美观，常用作园艺观赏植物；还是重要的药用植物，有活血、解毒、治痞积、痢疾、胎毒和跌打等功效，也是名贵的菜肴，在基础研究和应用中起着很重要的作用。 0003 目前，水蕨的主要来源仍为野生水蕨，而且野生水蕨种质资源极其匮乏，对水蕨的人工繁育的研究进行得较少，也未见有大规模人工繁育的技术报道。 0004 开展对濒危水生蕨类植物水蕨繁育技术的研究，不仅有利于水蕨保护而且有利于水蕨的食用、药用和观赏资源的合理利用与开发，有利于促进菜蓝子工程和人民身体健康工作的开展，有利于 “两型社会” 的构建和生物多样性的保护。。

9、发明内容 0005 本发明的目的在于填补现有技术中的空白，提供一种优良的濒危蕨类植物水蕨的繁育方法，实现大规模人工繁育水蕨。 0006 为实现上述目的，本发明所提供的濒危蕨类植物水蕨的繁育方法，其步骤是： 0007 (1) 水蕨孢子采集：在水蕨孢子成熟时期，采集水蕨孢子体，待干燥后从水蕨孢子体中采集黄褐色的水蕨孢子； 0008 (2) 水蕨孢子消毒处理：将水蕨孢子用质量百分比浓度为 5次氯酸钠水溶液消毒 10 分钟，然后离心，除去其中的空孢子囊和杂物，再用蒸馏水多次冲洗消毒过的水蕨孢子，加蒸馏水制成水蕨孢子悬浮液，在显微镜下计数并稀释水蕨孢子悬浮液，。

10、得到浓度为 140 160 个 /ml 的水蕨孢子液； 0009 (3)接种：将含有1琼脂的knop s营养液的培养基置于直径为6cm的培养皿中，以无菌操作法，将水蕨孢子液接种于所述培养皿中； 0010 (4) 人工气候箱中培养：将接种后的培养皿置于 SPRX-600B 智能人工气候箱中培养，光照强度为 6000LX，培养温度为 24 26，湿度为 80以上，每日光照为 11 14h，直至培养皿中的水蕨孢子发育成具有 2 3 片营养叶，高 1.4 1.6cm 的水蕨幼苗； 0011 (5) 水蕨幼苗移植处理：将水蕨幼苗从人工气候箱中移出并移栽到湿泥土中，。

11、保持室温 25 27，使水浸没水蕨幼苗顶端 0.5 0.8cm，于阴凉处 2 3 天，提高成活率； 0012 (6) 水蕨幼苗的生长：将阴凉处的水蕨幼苗移入铺有改良土壤的模拟野生水生环境的人工清水池中，保持每日光照 11 14 小时，室温 28 32，水温 23 26，待水蕨幼苗生长 19 21 天后，升高室温至 33 37，升高水温至 26 30， 70 80 天后既获得水蕨成熟的孢子体； 0013 其中，所述人工清水池中的水体 pH 值为 7.0 7.5，水体为微流动，流速为 250 说明书 CN 102613075 B 3 2/3 页 4 31。

12、0ml/min ；微流动的清水，有利于保持水蕨根部供养充分。 0014 所述改良土壤为壤土、磨菇渣和黄砂的混合物，其中各组分的质量比为壤土磨菇渣黄砂 6 1 1。 0015 所述步骤 (6) 的水蕨幼苗的生长过程中，始终保持水蕨幼苗浸入水中部分的高度为 1.4 1.6cm。 0016 改良土壤是以如下方法制备的：将壤土、磨菇渣和黄砂按照质量比611的比例混合，并置于水中约 15 20 天，让磨菇渣充分腐烂，得到混合土壤，再用偏酸性的鸡粪，将混合土壤的pH值调至6.806.85，既得改良土壤。改良土壤湿润，肥力良好，透气，指压有绵感，符合水蕨的生长特。

13、性，利用改良土壤繁育的水蕨长势茂盛，孢子产量大。 0017 优选地，所述人工清水池的深度为 23 27cm，其两端分别设有一个进水口和一个出水口，所述进水口和所述出水口的水平高度相同，且与池底的距离为 14 15cm。 0018 优选地，所述人工清水池中的水体流速为 300ml/min。 0019 本发明的有益效果：通过濒危蕨类植物水蕨的繁育方法实现了人工控制水蕨孢子萌发和配子体发育，提供了可供迁地保护和规模化栽培生产的水蕨幼苗；通过模拟水蕨的野生水生环境，实现了水蕨的异地繁殖，且成活率高，为大规模工业化栽培生产水蕨提供了技术支持，有利于水蕨的食用、药。

14、用和观赏价值的开发与利用。通过水蕨的人工繁殖技术的实施，有利于濒危水生蕨类植物水蕨的迁地保护和就地保护以及回归原产地与种群恢复等保护工作的实现。附图说明 0020 图 1 为本发明实施例中的云南西双版纳的水蕨孢子接种在培养皿中的状态图。 0021 图 2 为图 1 中的水蕨孢子发育为水蕨配子体的状态图。 0022 图 3 为图 2 中的水蕨配子体发育为水蕨幼苗的状态图。 0023 图 4 为图 3 中的水蕨幼苗进一步生长后的待移植的状态图。 0024 图 5 为为图 4 中的水蕨幼苗移植处理后移入人工清水池中的状态图。 0025 图 6 为图 5 中的水蕨幼苗进入营养生长时期的的状态。

15、图。 0026 图 7 为图 6 中的水蕨在营养生长和生殖生长时期的的状态图。 0027 图 8 为图 7 中的水蕨在完全生殖生长的的状态图。具体实施方式 0028 以下结合附图和云南西双版纳的水蕨在武汉地区的繁育例对本发明作进一步的详细描述。 0029 云南西双版纳的水蕨在武汉地区的繁育方法，步骤如下： 0030 1、水蕨孢子采集与无菌培养 0031 (1) 水蕨孢子采集：在水蕨孢子成熟时期，约 11 12 月份，采集水蕨孢子体，待自然风干后从水蕨孢子体中采集黄褐色的水蕨孢子； 0032 (2) 水蕨孢子消毒处理：将水蕨孢子用质量百分比浓度为 5次氯酸钠水溶液消。

16、毒 10 分钟，然后离心，除去其中的空孢子囊和杂物，再用蒸馏水多次冲洗消毒过的水蕨孢子，加少量蒸馏水制成水蕨孢子悬浮液，在显微镜下计数并稀释水蕨孢子悬浮液，得到浓度说明书 CN 102613075 B 4 3/3 页 5 为 150 个 /ml 的水蕨孢子液； 0033 (3)接种：将含有1琼脂的knop s营养液的培养基置于直径为6cm的培养皿中，以无菌操作法，将水蕨孢子液接种于此培养皿中 ( 图 1) ； 0034 (4) 人工气候箱中培养：将接种后的培养皿置于 SPRX-600B 智能人工气候箱中培养，光照强度为 6000LX，培养温度为 24 2。

17、6，湿度为 80以上，每日光照为 12h，在接种后，约 10 15 天，在光学显微镜下观测到孢子萌发，并逐渐发育成配子体 ( 图 2)，约 40 45 天，绿色的水蕨幼苗 ( 孢子体 ) 开始形成 ( 图 3)， 60 天左右，水蕨幼苗高约 1.5cm，并长有 2 3 片营养叶 ( 图 4)。 0035 2、水蕨幼苗移植处理：将 1.5cm 高的水蕨幼苗从人工气候箱中移出并移栽到湿泥土中，保持室温 25 27，使水浸没水蕨幼苗顶端 0.5 0.8cm，于阴凉处 2 3 天，提高成活率。 0036 3、水蕨幼苗与发育的技术与管理 0037 (1) 制备。

18、改良土壤：将壤土、磨菇渣和黄砂按照质量比 6 1 1 的比例混合，并置于水中约 15 20 天，让磨菇渣充分腐烂，得到混合土壤，再用鸡粪，将混合土壤的 pH 值调至 6.83，既得改良土壤。 0038 (2) 设置模拟野生水生环境的人工清水池：人工清水池的深度为 25cm，其两端分别设有一个进水口和一个出水口 ( 或者在池底设置一个排水口替代出水口，排水口与一弯曲的 PV 管相连， PV 管的另一端伸出池外形成出水口 )，所述进水口和所述出水口的水平高度相同，且与池底的距离为 15cm，人工清水池中的水体 pH 值为 7.0 7.5，水体为微流动，。

19、流速为 300ml/min ；。 0039 (3) 水蕨幼苗的生长：将阴凉处的水蕨幼苗移入铺有改良土壤的模拟野生水生环境的人工清水池中 ( 图 5)，保持每日光照 12 小时，室温 28 32，水温 23 26，待水蕨幼苗生长 19 21 天后，升高室温至 33 37，升高水温至 26 30， 70 80 天后既获得水蕨成熟的孢子体；在上述水蕨幼苗的生长过程中，始终保持水蕨幼苗浸入水中部分的高度为 1.5cm，并保持水温恒定和控制水流速均匀，同时要注意蜗牛等软体动物取食营养叶。 0040 水蕨在人工清水池中经历幼苗生长、营养生长和孢子体生殖生长三个阶段，其中幼苗生长和营养生长约 45 50 天 ( 图 6)，由营养生长进入生殖生长直至孢子体完全成熟约 50 天 ( 图 7 8)。利用本发明的水蕨的繁育方法繁育的云南西双版纳水蕨成活率达到 75以上。说明书 CN 102613075 B 5 1/4 页 6 图 1 图 2 说明书附图 CN 102613075 B 6 2/4 页 7 图 3 图 4 说明书附图 CN 102613075 B 7 3/4 页 8 图 5 图 6 说明书附图 CN 102613075 B 8 4/4 页 9 图 7 图 8 说明书附图 CN 102613075 B 9 。