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一种大马士革Ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法与流程

花匠小妙招
2025-01-21 14:05

本发明属于植物育苗
技术领域：
：，尤其涉及一种大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法。
背景技术：
：大马士革玫瑰(rosadamascenemiller)属蔷薇科、蔷薇属的植物，所产玫瑰精油纯正、香气浓郁、质量稳定，符合iso9842国际质量标准，是世界上最好的玫瑰精油生产品种之一，精油价格高于黄金数倍，被誉为“液体黄金”，在化妆品、食品、药品及保健品等领域具有广泛用途。大马士革ⅲ玫瑰(rosadamascenetyigintipetala)是从大马士革玫瑰中分离、筛选所得优良专用油用玫瑰品种，既具有大马士革玫瑰的优点，同时又具有抗病力强，适应性广，产花量和出油率高的特点，广泛用于栽培生产。大马士革ⅲ玫瑰无种子进行实生繁殖，采用压条和嫁接繁殖速度较慢，繁殖系数低，与国内另外两个主要用玫瑰栽培品种紫枝玫瑰(rosarugosa)和苦水玫瑰(rosastertata×rosarugosa)相比扦插生根成活较难。在产业化发展进程中，优良种苗本地化供应不足，导致现有的栽培面积远远不能满足市场的需求，已成为当前制约大马士革ⅲ玫瑰产业化发展的瓶颈问题。嫩枝扦插穗条比较幼嫩，内源生长促进物质较多，抑制物质较少，细胞分生能力强，较硬枝扦插生根容易且迅速，同时与压条、嫁接等相比，它具有简单易行、不受植物种类限制、繁殖速度快、系数高，成本低的优点。随着植物生长素的运用以及对插穗生根机理的认识，温室大棚的应用和推广，绿枝扦插在许多难生根树种的扦插繁殖获得很大成功。研究还表明，过氧化物酶pod、多酚氧化酶ppo和吲哚乙酸氧化酶iaao在植物的生长发育中起重要作用，在植物不定根形成期间呈现一定规律性变化，和不定根的发生和发展有着密切的关系。综上所述，现有技术存在的问题是：目前的大马士革ⅲ玫瑰无种子进行实生繁殖，采用压条和嫁接繁殖速度较慢，繁殖系数低。常规的扦插繁育成活率低，种苗本地化供应相对不足，已成为制约大马士革ⅲ玫瑰产业化发展的瓶颈问题。本发明通过优化扦插育苗方法，建立高效种苗繁育体系，为产业化扩大提供批量的优质扦插苗，切实推进大马士革ⅲ玫瑰产业化进程，带动华农增收致富。技术实现要素：针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法。本发明是这样实现的，一种大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法，所述大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法采用100mg/labt1浸泡插穗2h，以珍珠岩作为扦插基质。扦插苗床底层用腐叶土、油枯和土杂堆肥打底，每平方米2-3kg，铺好打底层后用300-500倍多菌灵液喷施消毒；每平方米再加100g生石灰洒于床面，对苗床作彻底消毒处理；将基质配比好，选择晴天暴晒1天，在使用前一天用800倍多菌灵溶液消毒灭菌；将处理后的基质铺于苗床；在秋季9-10月，选取定植3年以上的优良大马士革ⅲ玫瑰植株为母树，春花采摘后剪取当年或次年生、健壮整齐、节间匀称、无病虫害、半木质化枝条的中上部位为插穗；早上10点以前有露水时采完插穗，采回的枝条保湿处理，或用500-800倍多菌灵药液全面喷洒，待明水静后使用；插穗长10cm，每根插条保证有2-4个饱满芽，留两对复叶，徒长枝不能使用；插穗上切口平剪，上切口距最上一芽1-2cm，下部紧靠节下处理成马耳形，削成45°斜面，保留上部复叶2-3片，每片复叶留2-4个小叶；将浸好生根剂的枝条按株距2-3cm，行距5-7cm；扦插完毕后插穗不能倒下，再洒一次500倍多菌灵药液，对插条全面消毒，同时将扦插时插条与基质之间的缝隙填满；当老叶不掉，新芽已出时，40天之后开始炼苗，取掉小拱棚，让苗床处于自然状态，用糠壳+木削1：1覆盖0.5cm于苗床表面。进一步，所述大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法包括以下步骤：步骤一，苗床底层用腐叶土、油枯和土杂堆肥打底，每平方米2-3kg，铺好打底层后用300-500倍多菌灵液喷施消毒；每平方米再加100g生石灰洒于床面，对苗床作彻底消毒处理；步骤二，将基质配比好，选择晴天暴晒1天，在使用前一天用800倍多菌灵溶液消毒灭菌；将处理后的基质铺于苗床；步骤三，在秋季9-10月，选取定植3年以上的优良大马士革ⅲ玫瑰植株为母树，春花采摘后剪取当年或次年生、健壮整齐、节间匀称、无病虫害、半木质化枝条的中上部位为插穗；早上10点以前有露水时采完插穗，采回的枝条保湿处理，或用500-800倍多菌灵药液全面喷洒，待明水静后使用；步骤四，插穗长10cm，每根插条保证有2-4个饱满芽，留两对复叶，徒长枝不能使用；插穗上切口平剪，上切口距最上一芽1-2cm，下部紧靠节下处理成马耳形，削成45°斜面，保留上部复叶2-3片，每片复叶留2-4个小叶；步骤五，将浸好生根剂的枝条按株距2-3cm，行距5-7cm；扦插完毕后插穗不能倒下，再洒一次500倍多菌灵药液，对插条全面消毒，同时将扦插时插条与基质之间的缝隙填满；步骤六，扦插完成后再在大棚内套白色薄膜的小拱棚，7-10天，用70％黑色遮阳网套在薄膜外；白天大棚气温保持45-50℃，苗床基质温度32-34℃，湿度保持80％，叶面干水后就喷水；步骤七，当老叶不掉，新芽已出时，40天之后开始炼苗，取掉小拱棚，让苗床处于自然状态，用糠壳+木削1：1覆盖0.5cm于苗床表面。本发明提供的大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法，所述大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法采用100mg/labt1浸泡插穗2h，以珍珠岩作为扦插基质。该方法改变了生根过程中过氧化物酶peroxidase(pod)、多酚氧化酶polyphenoloxidase(ppo)和吲哚乙酸氧化酶indoleaceticacidoxidase(iaao)活性，生长素种类、生长素浓度、浸泡时间和扦插基质4个因素不同水平，对生根指标(生根率、生根数、根长和生根指数)存在不同程度的影响(结果见表3)，筛选出了大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的最优组合(100mg/labt1浸泡插穗2h，以珍珠岩作为扦插基质，插穗生根率可达92％)，显著提供大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗成活率，可以满足大田生产栽培的需求。本发明的另一目的在于提供一种利用所述大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法培育的大马士革ⅲ玫瑰。本发明的优点及积极效果为：以大马士革ⅲ玫瑰为材料，选用生长素种类、生长素浓度、浸泡时间和扦插基质4个因素，采用l9(34)正交试验设计研究其嫩枝扦插育苗技术，测定并比较生根过程中过氧化物酶pod、多酚氧化酶ppo和吲哚乙酸氧化酶iaao活性动态变化。结果表明，大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插生根是以愈伤组织生根为主兼有皮部生根的综合生根型；不同生长素种类间生根率和生根指数差异极显著，根长差异显著；不同生长素浓度水平间生根数和生根指数差异极显著；不同浸泡时间水平间生根率差异极显著，生根指数差异显著；不同扦插基质间生根率和生根指数差异极显著。综合生根率、根长、生根数和生根指数4个指标，通过正交试验和隶属函数分析筛选出了扦插育苗的最佳水平组合，即100mg/labt1浸泡插穗2h，以珍珠岩作为扦插基质，插穗生根率可达92％。插穗生根过程中，pod、ppo和iaao活性各自呈现一定规律的动态变化。pod活性在愈伤组织诱导期和不定根形成期各有一个明显峰值，属双峰型变化曲线；ppo活性在愈伤组织诱导期内持续上升，进入不定根形成期和伸长期后活性逐步下降；iaao活性在愈伤组织诱导期和不定根形成期内持续上升，进入不定根伸长期后活性逐步下降。使用生长素abt1和iba处理插穗后，改变了插穗内三种氧化酶活性，与不定根的发生和发展密切相关。本发明筛选出了大马士革ⅲ玫瑰最佳扦插因素组合，得到与生根密切相关的三种氧化酶生根期活性变化规律，初步揭示了扦插生根机理，对于大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗具有一定理论和现实指导意义。附图说明图1是本发明实施例提供的大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法流程图。图2是本发明实施例提供的大马士革ⅲ玫瑰扦插生根过程中pod活性变化示意图。具体实施方式为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。本发明采用正交试验研究植物生长素种类、浓度、浸泡时间和扦插基质四个因素对大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的影响，筛选提高扦插生根效果的适宜方法。同时，测定不同处理生根过程中三种氧化酶pod、ppo和iaao活性动态变化，揭示大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插生根机理，以期为大马士革ⅲ玫瑰种苗批量化繁育和产业化推广提供科学的理论依据和源头技术保障。下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。如图1所示，本发明实施例提供的大马士革ⅲ玫瑰嫩枝扦插育苗的方法包括以下步骤：s101：苗床的准备和底层基质处理：苗床内宽1.2m，长度依地势而定，最好不要超过15m。设计时必须做好滤水层，严防床内积水；苗床底层可用腐叶土、油枯和土杂堆肥(提前暴晒2-3天)打底，每平方米2-3kg为宜，铺好打底层后用300-500倍多菌灵液喷施消毒，然后每平方米再加100g生石灰均匀洒于床面，对苗床作彻底消毒处理；s102：扦插基质的准备：将基质的各种组合按照表2的设置配比好，选择晴天暴晒1天，在使用前一天用800倍多菌灵溶液消毒灭菌。将处理后的基质铺于苗床，基质铺好后不能压，保持自然疏松；s103：扦插时期的选择及插穗的准备：在秋季9-10月，选取定植3年以上的优良大马士革ⅲ玫瑰植株为母树,春花采摘后剪取当年或次年生、健壮整齐、节间匀称、无病虫害、半木质化枝条的中上部位为插穗。早上10点以前有露水时采完插穗，采回的枝条保湿处理，或用500-800倍多菌灵药液全面喷洒，待明水静后使用；s104：插穗的处理：插穗长10cm左右，每根插条保证有2-4个饱满芽，留两对复叶，徒长枝不能使用；插穗上切口平剪，上切口距最上一芽1-2cm，下部紧靠节下处理成马耳形，削成45°斜面，保留上部复叶2-3片，每片复叶留2-4个小叶；s105：扦插：将浸好生根剂的枝条按株距2-3cm，行距5-7cm，总之叶片不能相互重叠为准插入基质中，深度为2-3cm，可借助于打孔器完成。扦插完毕后插穗不能倒下，然后再洒一次500倍多菌灵药液，对插条全面消毒，同时将扦插时插条与基质之间的缝隙填满，枝条在基质中稳定，与基质更紧密结合；s106：扦插后期管理：扦插完成后再在大棚内套白色薄膜的小拱棚，7-10天，用70％黑色遮阳网套在薄膜外，使苗床内基质不见光；白天大棚气温保持45-50℃，苗床基质温度32-34℃，湿度保持80％，叶面干水后就喷水；s107：炼苗：当老叶不掉，新芽已出时，证明插条已经大量生根。40天之后开始炼苗，取掉小拱棚，让苗床处于自然状态，用糠壳+木削(1：1)均匀覆盖0.5cm于苗床表面,适当保温和保湿，同时减少杂草生长；s108：实验记录：详细记准确记录整个扦插育苗细节过程。扦插30-40天后进行生根情况和扦插苗生长状况调查，包括调查各处理插穗的生根率(生根率＝生根株数/扦插株数)，不同处理新生稍的长度以及新生叶片数量及长势。在本发明的优选实施例中：插穗的处理：插穗长10cm左右，每根插条保证有2-4个饱满芽，留两对复叶，徒长枝不能使用。插穗上切口平剪，上切口距最上一芽1-2cm，下部紧靠节下处理成马耳形，削成45°斜面，务必保证切刀锋利，削制动作迅速，切忌不能削破切面，保留上部复叶2-3片，每片复叶留2-4个小叶。使用的枝条为中、下节半木质化偏老的为好，顶节太嫩不宜使用。剪后枝条50枝一捆，下口齐，放在0.2％多菌灵溶液中浸泡消毒，然后按正交实验中设计表2中不同的生长素种类、浓度和浸泡时间做处理。下切口的浸泡深度为2-3cm，生长素溶液不能沾到叶和芽上。浸泡完成后，将蜂蜡加猪油(炼制过程中不能粘盐)按1：1的配比混制，加热至40℃左右开始融化，待温度降至30以下开始用插穗去浸蘸形成保护膜，封严伤口。扦插后期管理：扦插完成后再在大棚内套白色薄膜的小拱棚。7-10天，用70％黑色遮阳网套在薄膜外，使苗床内基质不见光。白天大棚气温保持45-50℃，苗床基质温度32-34℃，湿度保持80％，叶面干水后就喷水，此期为愈伤组织形成期；10-20天，此期为大量愈伤组织形成生根期，取掉70％黑色遮阳网，上午10点前下午4点后可揭开薄膜，适当光照，加快愈伤组织的形成和生根。苗床内温度控制在25-30℃，湿度不低于70％，叶面保持一定水膜，基质减少喷水时水份进入，减少喷雾次数，每次喷雾后保证苗床表面浸润，但又不能积水。20-30天，大量生根期，保证光照，中午打开小拱棚两头，保证棚内降温、散热和透气，下午5-6点关闭。叶面有水不积水，空气湿度60-80％，温度22-25℃，基质湿润偏干，严格控水，防治愈伤组织腐烂。每周一次喷施0.2％kh2po4+0.5％尿素溶液，补充营养，促进扦插苗根的生长。及时将腐烂的叶片及时剪掉，保持插盘内清洁无杂草。每周傍晚喷施1次10mg/kg的抗枯灵和喷洒1-2次5mg/kg新型多功能植物杀菌剂。下面结合试验对本发明的应用原理作进一步的描述。1.材料与方法1.1插穗的采集与扦插条件试验于2016年9月上旬在绵阳宏林玫瑰开发有限公司示范基地温室大棚内进行，选取定植3年以上的优良大马士革ⅲ玫瑰植株为母树，剪取当年或次年生、健壮整齐、节间匀称、隐芽充实，无病虫害，半木质化枝条的中上部位为插穗。插穗长10cm左右，2-4个饱满芽，上切口平剪，切口距最上一芽1-2cm，下部紧靠节下剪成45°斜面，保留上部复叶2-3片，每片复叶留2-4个小叶。插穗采集宜选在阴天早晨进行，剪后枝条放在0.2％多菌灵溶液中浸泡消毒，然后按正交实验中不同的生长素种类、浓度和浸泡时间做处理。将基质的各种组合配置好，选择晴天暴晒1天，在使用前一天用800倍多菌灵溶液消毒灭菌，处理后的插条及时插入扦插池内，扦插深度2-3cm,大棚遮光率为70％左右，相对湿度控制在60％-90％，温度控制在20-30℃，生根后逐渐减少喷雾次数，并每隔一周喷施0.2％kh2po4+0.5％尿素溶液，以促进扦插苗根的生长。1.2试验设计正交试验设计见表1。每处理300条插穗。其中200株用于生根进程观察和酶活性测定，100株用于全面生根指标调查。完全随机区组排列3次重复。表1l9(34)正交试验因素水平1.3指标及测定方法1.3.1生根指标的测定扦插后每隔5天进行1次生根形态观察，于40天进行全面调查生根类型、愈伤组织形成期、生根期、生根率、生根数、根长和生根指数，每处理各重复选具有代表性的100株统计根数和根长，取平均值进行分析。生根指数＝生根率×平均根数×平均根长。隶属函数计算公式为:u(xj)＝(xj－xmin)/(xmax－xmin)，式中：xj为指标测定值，xmin，xmax为所有处理某一指标的最小值和最大值；将各处理不同指标的隶属值进行累加求其平均值，平均值越大生根效果越好。1.3.2酶活性的测定取处理1(100mg/labt1浸泡2h，珍珠岩为扦插基质)、处理9(400mg/liba浸泡4h，珍珠岩为扦插基质)和空白对照ck(清水快速浸泡，直接扦插于珍珠岩中，其它管理水平相同)，三个处理插穗基部2.0cm范围内的皮层测定氧化酶活性，每5d测定一次，测到第40天。其中pod活性为每g鲜质量每min改变1个od值为1个酶活性单位(u·g-1min-1)；ppo活性以每g鲜质量每min光密度每变化0.01为一个酶活性单位(u·g-1min-1)；iaao活性以每g鲜质量在1h内分解破坏iaa的ug数表示一个酶活性单位(u·g-1h-1)。1.4数据处理采用excel2016及dps7.05进行正交试验方差分析、lsd多重比较、极差分析等及图表绘制。2.结果与分析2.1正交实验结果与生根类型的确定大马士革ⅲ玫瑰扦插15d左右愈伤组织大量形成，愈伤组织较薄，呈痂状。20d左右插穗开始生根，不定根原基发端于切口处靠近愈伤组织的地方为主，兼有皮部生根，属混合生根类型，30d以后不定根系不断伸长。因此，由实验观察结果可知，插穗扦插后0-15d为插穗愈伤组织诱导期，15-30d为不定根形成期，30d以后为不定根伸长期。正交实验结果见表2。不同处理对大马士革ⅲ玫瑰插穗愈伤组织形成期和生根期均有一定影响，各处理愈伤组织形成期和生根期前后大致相差5d左右。各处理生根条数8-13条，根长3.23-4.47cm，生根率46％-92％，生根指数14.71-51.56。表2：正交实验结果注：表中数据为3次重复平均值。thedateintableistheaverageofthreereplications。2.2不同因素对大马士革ⅲ玫瑰扦插生根指标的影响选取生根率、生根数、根长和生根指数作为评价大马士革ⅲ玫瑰扦插生根效果的4个指标，对扦插结果进行方差分析和lsd多重比较，见表3和表4。2.2.1生长素种类对生根的影响由表3可知，不同生长素处理之间生根率、根长和生根指数差异分别达到极显著、显著和极显著水平，生根数差异不显著。由表4多重比较结果可知，iba处理生根率1.02最高，abt1处理生根率0.97次之，两处理生根率在0.05和0.01水平下均无显著差异，但都极显著的高于naa处理生根率0.79；iba处理根长4.11cm最高，abt1处理根长4.02cm次之。表3：正交实验方差分析注：*：显著significance(α＝0.05)，**：极显著extremelysignificance(α＝0.01)。生根率数据开平方后取反正炫，再进行方差分析。rootingratedatewastransformedusingsquare-rootandsintransformation。两处理根长在0.05水平和0.01水平下均无显著差异，但都显著高于naa处理根长3.52cm；iba处理生根指数32.63最高，abt1处理生根指数次之31.20，两处理生根指数在0.05和0.01水平下均无显著差异，但都极显著高于naa处理生根指数16.24。表4：各试验因素对扦插生根指标影响及lsd多重比较注：α＝0.05水平下，相同小写字母表示差异不显著，不同小写字母表示差异显著；α＝0.01水平下，相同大写字母表示差异不显著，不同大写字母表示差异极显著，下同。thesamelowercaselettershowsnodifferenceatα＝0.05,differentlowercaselettersshowsdifference；thesamecapitallettershowsnodifferenceatα＝0.05,differentcapitallettersshowsextremelydifference，thesamebelow；2.2.2生长素浓度对生根的影响不同生长素浓度间生根数和生根指数差异均达到极显著水平，生根率和根长差异不显著。100mg/l和200mg/l的处理生根数最高，均为11.67，两处理生根数在0.05和0.01水平下均无显著差异，但都极显著的高于400mg/l处理生根数8.33；100mg/l的处理生根指数31.98最高，200mg/l的处理生根指数28.55次之，两处理生根指数在0.05和0.01水平下均无显著差异，但都极显著高于400mg/l处理生根指数19.54。不同生长素浓度间生根率和根长虽然无显著差异，但均表现出随着浓度的增加，两个指标值呈逐步下降的趋势。2.2.3浸泡时间对生根的影响不同浸泡时间之间生根率差异极显著，生根指数差异显著，生根数和根长差异不显著。2h处理生根率1.04最高，4h处理生根率0.92次之，6h处理生根率0.82最低，三个浸泡时间处理生根率两两之间差异均达到极显著水平，并且随着处理时间的增加，生根率呈下降趋势；4h处理生根指数25.63和6h处理生根指数0.82较低，两处理生根指数之间差异不显著，但都显著低于2h处理生根指数31.15。随着处理时间的增加，生根指数呈逐步下降的趋势。2.2.4扦插基质对生根的影响不同扦插基质间生根率和生根指数差异极显著，生根数和根长差异不显著。珍珠岩扦插生根率1.11最高，草炭扦插生根率0.87次之，珍珠岩+草炭(1:1)扦插生根率0.81最低，三类基质处理生根率两两之间均在0.05水平下差异显著。在0.01水平下，草炭与珍珠岩+草炭(1:1)处理间生根率差异不显著，但都极显著的低于珍珠岩处理生根率；珍珠岩处理生根指数37.3最高，草炭23.92次之，珍珠岩+草炭(1:1)处理18.84最低。草炭处理与珍珠岩+草炭(1:1)处理之间在0.05和0.01水平下均无显著差异，但都极显著低于珍珠岩处理生根指数37.3。2.2.5生根效果综合分析四个因素中，扦插基质对生根率影响最大，其次依次为生长素种类、浸泡时间和生长素浓度。对生根指数影响由大到小的因素依次为扦插基质、生长素种类、生长素浓度和浸泡时间。综合生根率、根长、生根数和生根指数4个指标，处理1(abt1、100mg/l浓度、浸泡2h、珍珠岩为扦插基质)对提高大马士革ⅲ玫瑰扦插生根效果最佳。2.3生根效果极差分析由表5生根效果极差分析结果可知，仅以生根率为主要考虑因素，影响扦插生根的主要因子为扦插基质(r＝0.30)，其次依次为生长素种类(r＝0.24)、浸泡时间(r＝0.22)和生长素浓度(r＝0.05)，理论优组合为a3b1c1d1；仅以根长为主要考虑因素，影响扦插生根的主要因子为生长素种类(r＝0.59)，其次依次为扦插基质(r＝0.48)、浸泡时间(r＝0.43)和生长素浓度(r＝0.27)，理论优组合为a3b1c2d1；仅以生根数为主要考虑因素，影响扦插生根的主要因子为生长素浓度(r＝0.43)，其次依次为生长素种类(r＝1.89)、扦插基质(r＝1.44)和浸泡时间(r＝0.44)，理论优组合为a1b1c3d1；仅以生根指数为主要考虑因素，影响扦插生根的主要因子为为扦插基质(r＝18.46)，其次依次为生长素种类(r＝16.39)、生长素浓度(r＝12.43)和浸泡时间(r＝7.87)，理论优组合为a3b1c1d1；对生根率和生根指数两个重要生根指标的理论优组合一致，均为a3b1c1d1，以上3个理论优组合在实验处理中均不存在，这些组合的作用效果是否受因素水平间交互作用影响，尚需进一步的试验验证。表5：各试验因素对生根指标影响的极差分析2.4不同处理对大马士革ⅲ玫瑰扦插育苗指标的影响及隶属函数评价由表6可知，4个生根指标在9处理组合中均存在显著差异，同一处理组合，不同生根指标优劣表现也不尽相同，单一或少数指标难以全面、客观地反映各因素水平组合的扦插生根效果，故采用隶属函数法对各处理的育苗效果进行综合评价。隶属函数法综合评价结果见表6，可知处理1(100mg/l的abt1，浸泡2h，珍珠岩)的隶属函数值0.97最大，其生根率1.29、生根数13.0、和生根指数51.57均在9个处理组合中最大，仅根长在9个处理组合中位列第2，为本实验最佳扦插处理。处理9(400mg/l的iba，浸泡4h,珍珠岩)的隶属函数值0.88排第2，其根长4.5在9个处理组合中最大，生根率1.18、生根数12.67和生根指数44.05在9个处理组合中均位列第2。由此，处理1为大马士革ⅲ玫瑰扦插育苗生根的最优组合，处理9为次优组合。表6：不同因素组合对大马士革ⅲ玫瑰扦插育苗指标的影响及隶属函数评价2.5相关氧化酶活性变化由隶属函数评价分析结果可知，处理1和处理9为大马士革ⅲ玫瑰扦插育苗生根的最优组合和次优组合。为了探索其内在相关氧化酶活性变化，本实验还对处理1(使用abt1生长素处理)、处理9(使用iba生长素处理)和空白对照ck(清水快速浸泡，直接扦插于珍珠岩中，其它管理水平相同)在扦插生根过程中插穗基部3种氧化酶ppo、pod和iaao活性的动态变化进行了研究。2.5.1过氧化物酶(pod)活性变化本发明中三个处理pod活性在插穗生根的不同时期均呈现一定规律性变化(见图2)。处理1与处理9插穗皮层中pod活性在愈伤组织诱导期(0-15d)内上升，不定根形成前期(15-25d)下降，不定根形成后期(25-30d)内继续上升，30天后进入不定根伸长期，pod活性又开始下降，在第15d和30d其活性各有一个明显的峰值，属双峰型变化曲线。对照各时期pod活性值变化趋势相对平缓，第一峰值出现在20d,相对处理1和处理9更晚，但曲线总体变化趋势与处理1和处理9大致相同。方差分析表明，处理1和处理9pod活性值均极显著的高于对照(f＝19.64,p<0.01)，处理1不同生根天数之间、处理9不同生根天数之间pod活性值差异均达到极显著水平(f＝1367.96,p<0.01；f＝1345.78,p<0.01)。2.5.2多酚氧化酶(ppo)活性变化处理1和处理9插穗ppo活性变化趋势大致相同，在愈伤组织诱导期(前15天内)持续上升，15天以后进入不定根形成期和伸长期，ppo活性逐步降低，但始终高于扦插初期。对照pod活性值变曲线变化趋势相对平缓，在第20天出现一个不明显峰值，后期ppo活性也逐步降低。方差分析表明，处理1和处理9ppo活性值均极显著的高于对照(f＝30.17,p<0.01),处理1不同生根天数之间、处理9不同生根天数之间ppo活性值差异均达到极显著水平(f＝524.73,p<0.01；f＝493.10,p<0.01)。2.5.3吲哚乙酸氧化酶(iaao)活性变化三个处理吲哚乙酸氧化酶iaao活性在插穗生根的不同时期变化曲线，处理1插穗内iaao活性在前30天内逐步上升，并在30天达到峰值，30天以后进入不定根伸长期，活性逐步下降。处理9插穗iaao活性变化趋势与处理1大致相同，但在25天活性达到峰值，此后进入不定根形成期后期和伸长期，iaao活性逐步下降。对照iaao活性曲线变化趋势与处理9类似。方差分析表明，处理1和处理9iaao活性值均极显著的低于对照(f＝30.17,p<0.01),处理1不同生根天数之间、处理9不同生根天数之间iaao活性值差异均达到极显著水平(f＝79.54,p<0.01；f＝669.26,p<0.01)。3.结果扦插作为常规无性繁殖技术具有简单、快速、高效、高质量繁殖苗木和可完整的保持亲本植株的优良遗传特性等优点，生长素种类、生长素浓度、浸泡时间和扦插基质，对愈伤组织形成期、生根期、生根率、生根数、根长和生根指数等生根指标存在不同程度的影响。本发明通过方差分析得到，生长素种类对生根率和生根指数影响显著，abt1处理的生根率和生根指数最高。生长素浓度对生根数和生根指数影响显著,最低浓度水平100mg/l处理生根数和生根指数最高，表现出“低促高抑”效应。浸泡时间对生根率和生根指数影响显著，最短浸泡是2h处理的生根率和生根指数最高，同样也表现出“低促高抑”效应。正交试验方差分析和隶属函数评价筛选出的大马士革ⅲ玫瑰扦插育苗的最佳处理组合均为处理1(100mg/l的abt1，浸泡2h,以珍珠岩为扦插基质)。可以看出采用最低浓度水平的生长素，最短浸泡时间,更有利于提高大马士革ⅲ玫瑰扦插育苗效果，本发明得出纯珍珠岩基质处理的生根率和生根指数都极显著的高于另外两种扦插基质，为大马士革ⅲ玫瑰扦插育苗最佳基质，推测是因为珍珠岩质量轻、间隙大，保证了定期的水、温、肥管理后，能同时满足上述理想基质的条件，非常有利于穿透生根，而且移栽也方便。处理1和处理9中三种氧化酶活性pod、ppo和iaao活性与空白对照差异极显著，表明使用abt1和iba后改变了植物体内三种氧化酶活性。在生根过程的不同天数,处理1和处理9三种氧化酶活性活性差异极显著,表明大马士革ⅲ玫瑰的不定根发生和发展与三类酶活性有密切联系。过氧化物酶pod与植物离体生根关系密切,是植物生根标志性物质之一。本发明中处理1和处理9pod活性在扦插后15天和30天均出现两个明显峰值，是插穗具有生根能力的标志。pod能氧化植物体内iaa，消除过多的内源iaa，更有利于根原基的诱导和不定根的形成。处理1和处理9pod活性值在生根过程中均极显著的高于对照，说明两处理均有效提高了插穗内源pod活性，提高了扦插生根效果。本发明中处理1和处理9插穗ppo活性在愈伤组织诱导期内持续上升，导致植物体内生产更多的“iaa-酚酸复合物”，促进了不定根的形成，进入不定根形成期和伸长期，ppo活性逐步降低，但始终高于扦插初期，促进了不定根的继续生长。并且两处理ppo活性值在整个生根过程中均极显著的高于对照，说明两处理均有效提高了插穗内源ppo活性。本实验结果处理1和处理9插穗iaao活性在愈伤组织形成和不定根形成期内持续上升，使插穗内iaa水平降低，符合低iaa水平有利于生根的观点，进入不定根伸长期后iaao活性逐步下降，使得插穗内源iaa水平升高，高含量的iaa能促进根的生长。两处理ppo活性值在整个扦插期内始终极显著低于对照水平。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12当前第1页12