以虎眼万年青的鳞片为外植体。研究不同接种方式、NAA和6-BA不同配比对诱导小鳞茎、芽苗增殖及生根的影响。结果表明,虎眼万年青鳞片以内表面向上接种的方式最易诱导出小鳞茎,且以接种于培养基MS0+NAA1.0+BA1.5上的诱导率为最高。达84.0%;增殖效果最佳的培养基为MS0+NAA0.5+6-BA1.0。增殖率为150%;促进生根和根系素质较好的培养基为1/2MS0+NAA0.5+IBA0.2,生
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第 8卷第 3期 20 0 6年 9月
辽宁农业职业技术学院学报 J u n l fLio ig Ag iut rl l g o r a a n n rc lu a l e o Co e
Vo1 .8. NO .3 Se . 06 pt 20
虎眼万年青的组织培养与快速繁殖 彭世勇,关丽霞,佟岩,孙营 (宁农业职业技术学院。辽宁营口 l 50 )辽 l0 9
摘要:以虎眼万年青的鳞片为外植体。研究不同接种方式、N AA和 6 A不同配比对诱导小鳞茎、芽苗增一B 殖及生根的影响。结果表明,虎眼万年青鳞片以内表面向上接种的方式最易诱导出小鳞茎,且以接种于培养基 M+ NA .+B . A1 O A1 5上的诱导率为最高。达 8 . ;增殖效果最佳的培养基为 MS+ NAA .+6 40 0 0 5一B .。 A1 0
增殖率为 1O;促进生根和根系素质较好的培养基为 1 2 0 N 5/ MS+ AAO 5 B O 2 .+I A .,生根率达 7.。 61
关键词:虎眼万年青;鳞片;外植体;小鳞茎;增殖
中图分类号:S623 8.6
文献标识码:A
文章编号:17—01 20)o—00 - 2 61 57(06 3 06 0以上各种培养基均附加蔗糖 3 0g L。 _,琼脂 8g L。 H调整到 5 8 6 o之间。 _,p .~ . 1 2 2材料处理 ..
虎眼万年青[ o d a j p nc ( h n ) R h e a o i a T u& Rol,为百合科虎眼万年青属多年生球根草本花 t ̄]卉,原产非洲南部,我国华北常见栽培。虎眼万年青为观叶、观茎植物,主要欣赏大型叶片和灰绿色鳞茎,多做盆花栽培。此外,虎眼万年青还是一种民间中草药,其叶和鳞茎均可人药,对跌打损伤和肝硬化、肝炎等顽固病症有很好的治疗效果。 栽培中,虎眼万年青多用鳞茎繁殖,但繁殖速度慢,增殖倍数低,不能满足规模化生产对其种苗的大量需求。本文以其鳞片为外植体,进行组织培养快速繁殖的研究。旨在探讨虎眼万年青鳞片最佳接种方式、小鳞茎诱导、增殖和试管苗生根的适宜激素配比等因素,以期解决虎眼万年青分球繁殖受材料限制,繁殖速度慢,增殖系数低等问题
,为缩短其繁育周期和适应工厂化育苗提供技术支持。
选择生长健壮、无病虫害、开花性状良好的虎
眼万年青母株,取其饱满鳞茎作为外植体。将采集来的外植体鳞片剥下,先用 o 3的洗衣粉水浸泡 . l n Omi,再用流水冲洗 3 n 0mi,然后在超净工作台内用 7酒精消毒 3,0 1,升汞灭菌 1 n 5 0S . 6 9 5mi, 最后用无菌水冲洗 4。次 将灭菌后的外植体剪切成 0 5 1c .~ m见方的小块,迅速接种于诱导培养基上。其中,每一种诱导培养基内,鳞片切块内表面向上、向下和垂直接种的外植体数量各占 1 3/。诱导出小鳞茎,当苗高 3 m时,将芽苗切~5c割转入增殖培养基中进行增殖培养。当苗高 3~
1材料与方法 1 1材料 .
5c m时,再将部分芽苗切割转入生根培养基中诱导生根。当根长 0 5 m时,可对其进行移栽驯 .~1c 化。
供试材料为虎眼万年青[ h e a o ia Ro d aj p nc ( h n. T u b )R t.,取自辽宁农业职业技术学院生 oh]物技术系无土栽培日光温室内。 1 2方法 .
1 2 1培养基配方 .. ( )诱导培养基 1① MS 0+ NAA1 0+ 6一 B .;② MS+ . A0 5。 NNA1 0+ 6一 BA1 0③ M S . .; o+ NAA1 0+ 6一 . BA 1 5。 .
1 2 3培养条件 ..初代培养时,温度控制在 2~2 3 7℃,光照为 1~ 1 d。 2 4h _,光强 15 0 18 0l。继代培养、 0~ 0 x 生根培养与初代培养条件相同。 124调查项目 . .
接种2 后,调查不同诱导培养基中不同接种 0d方式虎眼万年青小鳞茎的诱导率;而后将由鳞片诱导出的小鳞茎切割下来转入增殖培养基中,增殖培养 1后,调查增殖倍数;生根培养 1后,调查 5d 5d生根率。以上测定均设三次重复。
( )增殖培养基 2① MS。+ NAA0 5+ 6一 B .;② MS+ . A1 0 o NAA0 5+ 6一 B .;③ MS+ NAA1 0+ 6一 . A2 0 o . BA 2 0。 .
2结果与分析 2 1不同接种方式对虎眼万年青鳞片诱导小鳞
茎 . 的影响
( )生根培养基 3① 1 2 0+ NAA0 5+ 6一 I A0 2② 1/ MS . B .;/ 2 S+ NAAO 5 I M 0 .+ BAO 4 .
将虎眼万年青鳞片切块以三种不同方式接种于①号、②号和③号培养基中, 0d调查结果表明 2后 (见表 1表 2和表 3,上述任一培养基内,片内、 )在鳞表面向上和向下接种的均可诱导出小鳞茎,导率诱依次为 6 .、 2 6、 4 0和 7 3、 1 6、 20 7 . 8 . . 1 . 1 . ,鳞片垂直接种的则不能诱导出小鳞茎。 60而
收稿日期:2 0 -0— 1 06 7 8
作者简介:彭世勇 ( 99 )男,副教授,研究方面:植 16一,物组织培养和无土栽培。
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