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广东道地药材广藿香的GCMS化学指纹图谱和DNA指纹图谱的研究.pdf文档全文免费阅读、在线看

花匠小妙招
2025-02-22 19:36

广东道地药材广藿香的G-C-MS化学指纹图谱和DNA指纹图谱研究广东道地药材广藿香的GC．MS化学指纹图谱和DNA指纹图谱研究中文摘要目的：广麓香Pogostemon 广藿香的干燥地上部分是其药用部位，味辛，微温，归脾、胃、肺三经，具有芳香化浊、开胃止呕、发表解暑的功能，用于湿浊中阻，脘痞呕吐，暑湿倦怠，胸闷不舒，寒湿闭暑，腹痛吐泻，鼻渊头痛，是治疗暑湿感冒的良药，并且是30多种中成药的组分之一。广藿香原产东南亚菲律宾、马来西亚、印度等国家，自宋代传入我国岭南地区，目前在广东省的广州郊区、肇庆地区、湛江地区、广西以及海南岛、福建、台湾等地均有栽培。根据产地的划分，广藿香药材的商品分为牌香(石牌藿香，广州产)、肇香(肇庆产)、湛香(湛江产)和南香(海南产)。不同产地的广藿香在形态和其它性状上都具有显著的差别，此外，传统认为前两者是道地药材，质量优，供药用，后两者质量较次，不供药用，仅用作提取广藿香油。广藿香自引入我国以来，形态上发生了很大的变异，随着广州城市化的不断扩建，“石牌藿香”已经出现濒危的局面，为了拯救优良品种，使其得到可持续性发展，本研究以不同产地的23个广藿香样本作为研究对象，采用分子标记技术和化学分析手段相结合的方法，明确广藿香的分子特征和化学特征，从而为鉴别广藿香的真伪以及道地性判定提供可靠的依据，并为广藿香的种质评价体系提供合理的技术平台和科学依据。方法：研究内容分为四个部分：(1)首次采用加压溶剂提取技术 (pressurizedliquid 学成分，并运用GC．MS方法对其进行分析和测定。(2)基于18个样品的特征峰，进行分级聚类分析，将18个样品分为不同的化学型并通过计算机辅助相似性评价系统对三个类型进行了相似性的评价，建立了不同产地广藿香的指纹图谱。(3)选取30条随机引物对不同产地的23个广藿香样本进行RAPD指纹 etY．C．图谱分析，并将同属另外两种植物长苞刺蕊草【PchinensisC．Y．Wu Huang，PCH】和水珍珠菜[Pogostemon 作为外类群参与比较。优化RAPD条件后，从30条随机引物中选出5条多态性 n 中文摘要并根据条带的差异进行聚类分析，构建不同产地广藿香的RAPD指纹图谱。(4) rRNA、matK 对不同产地的广藿香进行DNA序列分析研究，选取广藿香的18S 基因、ITS和5S非转录间隔区共四段序列进行检测，并通过对各样品迸行聚类分析，考察其基因型和地理型相关性。结果：(1)从广藿香中提取分离两个化合物广藿香醇和广藿香酮，并运用GC．MS方法对不同产地的广藿香样品进行分析和鉴定，确定包括广藿香醇和广藿香酮在内的10个特征性成分：B．广藿香萜烯、反．丁香烯、a．愈创木烯、刺蕊草烯、D一愈仓0木烯、6．愈刨木烯、广藿香烯醇、广蓉香醇、环赛车烯和广藿香酮。结果表明不同产地的广藿香中各化学成分的种类和含量具有明显的差异。PLE和GC．MS的联合运用具有简单、快速、灵敏度高的优点。(2)基于 18个样品的10个特征峰的聚类分析，可将18个样品分为三个类型：广藿香醇型、广藿香酮性以及基于两者之间的过渡型。通过计算机辅助相似性评价系统对三个类型进行了相似性的评价，建立了不同产她广藿香的(3C-MS指纹图谱。指纹图谱的建立有助于区分广藿香的替代品和伪品，也有助于对国内不同地区的广藿香进行评价。(3)不同产地广藿香的RAPD指纹图谱研究表明，长苞刺蕊草和水珍珠菜的RAPD条带与广藿香相比具有明显的差异，不同产地的广藿香的RAPD标记也具有较明显的差异。将不同产地的广藿香进行聚类分析，同属种间的PCH和PAU与广藿香各样品的相似系数较低，多数情况下聚为 G12、G13和G16聚在一起。(4)对广藿香的18SrRNA、matK基因、ITS和5S 非转录间隔区共四段序列进行检测，结果表明，不同产地的广藿香各段序列具有位点的变异。其中18S rRNA、5．8S 位；ITS区序列(包含部分18S rR