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一种七叶莲总三萜提取纯化工艺的制作方法

花匠小妙招
2025-04-17 08:59

一种七叶莲总三萜提取纯化工艺的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种七叶莲总三萜提取纯化工艺。
【背景技术】
[0002] 七叶莲为五加科鶴掌柴属植物Schefflera arboricola Hayata，产于福建、台湾、广东、云南等地，是我国传统的民间中草药，含有多种化学成分，包括：挥发油类；有机酸类；三萜类；生物碱类；酚类；蛋白质类；人参炔醇等，具有广泛的药理活性如抗炎、镇痛、镇静催眠和松弛支气管平滑肌等和临床疗效，临床上用于跌打损伤、风湿关节痛等治疗。
[0003] 市售的七叶莲片具有祛风除湿，活血止痛功能。目前临床上常见抗炎镇痛药均为化学合成药物，副作用大，有些还有严重的成瘾性。而七叶莲制剂相对来说，抗炎镇痛疗效显著，对治疗三叉神经痛见效快，毒性小。然而目前七叶莲制剂多以粗提物入药，七叶莲片的生产工艺系以七叶莲生药直接打粉入药，使得药片规格偏大，患者服用量多，药品的质量和药效有较大提升空间。
[0004] 目前文献中还没有关于七叶莲总三萜的提取和纯化的相关方法。在一些专利文献中有关于其他中药材中总三萜的提取和纯化方法，如授权公告号CN 101785799 B，名称为 "香青兰总三萜提取物及其制备方法和用途"的中国发明专利，其公开了香青兰总三萜化合物提取方法，包括如下步骤：
[0005] (1)将香青兰乙醇提取液浓缩，回收乙醇后得浸膏，浸膏加水煮沸洗绦，过滤；
[0006] (2)浸膏以碱水液溶解，过滤，取滤液；
[0007] (3)滤液加浓盐酸，搅拌均匀，过滤，得不溶物；
[0008] (4)不容物以蒸馏水洗脱至水洗液呈中性；
[0009] (5)不溶物以乙醇溶解，脱色剂脱色；
[0010] (6)脱色后的乙醇液上聚酰胺吸附树脂柱，以不高于30%的乙醇冲洗色谱柱，收集
[0011] 30%乙醇洗脱部分，浓缩，干燥，即得，所得提取物中总三萜的重量百分含量不低于 50%。
[0012] 该方法虽然可以用来提取香青兰的总三萜，然而用以七叶莲中总三萜的提取时，效果不佳。
[0013] 再如，申请公布号CN 104189021 A，名称为"一种牛樟菌牛樟芝总三萜提取方法" 中国发明专利申请，其公开了一种牛樟芝总三萜提取方法，包括以下步骤：
[0014] (1)样品预处理：称取牛樟芝10_20g，烘干至恒重，粉碎过筛，加入10-20倍水溶解，制得待测样品溶液；
[0015] (2)在步骤⑴中的制得的待测样品溶液溶于溶剂中，并加入活性炭，微孔滤膜过滤，取滤液备用；
[0016] (3)在步骤⑵中制得的样品滤液中加入乙醚10-20ml超声混匀中，提取，提取操作重复2次，加入正丁醇25-40ml，超声混匀，提取操作重复3-5次，得样品粗提液；
[0017] (4)将步骤⑶中制得的样品粗提液浓缩、离心、静置10_20min，将沉淀采用水淋洗2-4次，过滤得沉淀；
[0018] (5)将步骤（4)中制得的沉淀加入50ml量瓶中，加入溶剂定容，加入碳酸氢钠溶液 5-10ml萃取3_4次，尚心取沉淀，干燥得样品总二猫类物质提取物。
[0019] 该方法用以七叶莲总三萜的提取，提取效果也难以令人满意。在现有技术中还记载其他中药材中总三萜的提取方法，然而由于不同的中药材中含有各种不同化学成分，在提取过程中添加的不同试剂以及采用不同的工艺参数均可能使这些化学成分相互作用，从而影响提取的纯度以及提取效果。总三萜在不同中药材的提取受到药材本身性质的影响。
[0020] 目前，还未有关于七叶莲中总三萜的提取和纯化方法，鉴于此，本案发明人对七叶莲中总三萜的提取和纯化工艺深入研宄，遂有本案产生。

【发明内容】

[0021] 本发明的目的在于提供一种七叶莲总三萜提取纯化工艺。
[0022] 为了达到上述目的，本发明采用这样的技术方案：
[0023] -种七叶莲总三萜提取纯化工艺，其包括以下步骤：
[0024] A、取七叶莲药材，粉碎制成七叶莲粉末，放入容器中；
[0025] B、再往此容器中加入体积浓度为95 %的乙醇，七叶莲粉末与乙醇的料液比为 10g/mL，进行水浴加热，水浴加热温度为90°C ;
[0026] C、然后进行回流提取，回流提取时间为60分钟，再将提取液进行过滤得到滤液；
[0027] D、将滤液进行减压浓缩得到浓缩物，将浓缩物进行干燥得到粗提取物。
[0028] E、称取上述步骤D中的粗提取物，配置成浓度为0. 884mg/mL的上样液；
[0029] F、将相当于干树脂5g的AB-8大孔吸附树脂，通过湿法装柱装入直径为20mm、高度为300mm的柱体形成树脂柱，用蒸馏水洗脱树脂柱进行除杂；
[0030] G、将步骤E中的上样液上树脂柱，先用蒸馏水洗脱除杂，而后加入体积浓度为 80%的乙醇进行洗脱，乙醇洗脱流速为lBV/h，其中IBV = 30mL，乙醇洗脱用量为8BV，其中 IBV = 30mL，收集乙醇洗脱液，将该洗脱液蒸干得到成品。
[0031] 采用本发明中七叶莲总三萜提取工艺，通过多次试验得到了最佳工艺操作条件，在此条件下，七叶莲粗提取物中总三萜的质量分数可以达到22.09%。；通过选择最佳工艺操作条件对粗提物进行纯化，使得七叶莲中最终提取物（即成品）中总三萜的含量达到 45. 98 % 〇
【附图说明】：
[0032] 图1为本发明中总三萜静态吸附动力学曲线；
[0033] 图2为本发明中AB-8大孔吸附树脂的吸附等温线；
[0034] 图3为本发明中上样液浓度对总三萜吸附量的影响；
[0035] 图4为本发明中不同pH对总三萜吸附量的影响；
[0036] 图5为本发明中AB-8大孔吸附树脂对总三萜的吸附曲线；
[0037] 图6为本发明中AB-8大孔吸附树脂洗脱曲线；
【具体实施方式】
[0038] 为了进一步解释本发明的技术方案，下面结合实施例进行详细阐述。
[0039] 实施例一
[0040] A、取七叶莲药材，粉碎制成七叶莲粉末，准确称取9份七叶莲粉末，每份20g，分别置圆底烧瓶中；
[0041] B、再往此圆底烧瓶中加入一定浓度和体积的乙醇，进行水浴加热，水浴加热温度为 90°C ;
[0042] C、然后进行回流提取，将提取液进行过滤得到滤液；
[0043] D、将滤液进行减压浓缩得到浓缩物，将浓缩物进行干燥得到粗提取物。
[0044] 其中，七叶莲由福建省泉州中侨集团股份有限公司药业公司提供，经鉴定为 S. arboricola Hayata的干燥根莖叶。减压浓缩采用RE 52-86A型旋转蒸发仪进行。
[0045] 采用上述步骤，进行正交试验：选取乙醇浓度、料液比、提取时间3个影响提取物总三萜量的主要因素，每个因素设3个水平（见因素水平表），进行L 9(33)正交试验。
[0046] 其中乙醇浓度为体积浓度；
[0047] 料液比为加入Ig的七叶莲粉末，加入的相应乙醇的体积，单位为g/mL ;
[0048] 总三萜的含量采用UV-2450型紫外-可见分光光度计（日本岛津公司）进行测量，选用香草醛-冰醋酸-高氯酸作为比色法测定七叶莲总三萜量的显色剂。
[0049] 因素水平表
[0050] Tab. Factors and levels
[0051]
【主权项】
1. 一种七叶莲总三萜提取纯化工艺，其特征在于：其包括以下步骤： A、取七叶莲药材，粉碎制成七叶莲粉末，放入容器中； B、再往上述容器中加入体积浓度为95%的乙醇，七叶莲粉末与乙醇的料液比为IOg/ mL，进行水浴加热，水浴加热温度为90°C ; C、然后进行回流提取，回流提取时间为60分钟，再将提取液进行过滤得到滤液； D、将滤液进行减压浓缩得到浓缩物，将浓缩物进行干燥得到粗提取物。 E、称取上述步骤D中的粗提取物，配置成浓度为0. 884mg/mL的上样液； F、将相当于干树脂5g的AB-8大孔吸附树脂，通过湿法装柱装入直径为20mm、高度为 300mm的柱体形成树脂柱，用蒸馏水洗脱树脂柱进行除杂； G、将步骤E中的上样液上树脂柱，先用蒸馏水洗脱除杂，而后加入体积浓度为80 %的乙醇进行洗脱，乙醇洗脱流速为lBV/h，其中IBV = 30mL，乙醇洗脱用量为8BV，其中IBV = 30mL，收集乙醇洗脱液，将该洗脱液蒸干得到成品。
【专利摘要】本发明涉及一种七叶莲总三萜提取纯化工艺，其包括以下步骤：A、取七叶莲药材，粉碎制成七叶莲粉末，放入容器中；B、往容器中加入体积浓度为95％的乙醇，七叶莲粉末与乙醇的料液比为10g/mL，进行水浴加热，水浴加热温度为90℃；C、进行回流提取，回流提取时间为60分钟，将提取液进行过滤形成滤液；D、将滤液进行减压浓缩得到浓缩物，将浓缩物进行干燥得到粗提取物。采用该工艺进行七叶莲中总三萜的提取，七叶莲粗提取物中总三萜的质量分数可以达到22.09％。同时本发明还进一步提出了七叶莲中总三萜的纯化工艺，通过选择最佳工艺操作条件对粗提物的纯化，使得七叶莲中最终提取物中总三萜的含量达到45.98％。
【IPC分类】A61K36-25
【公开号】CN104666377
【申请号】CN201510050501
【发明人】何定峰, 洪佳妮, 徐先祥, 刁勇
【申请人】泉州市中医院
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年2月2日