本发明专利技术公开一种珍稀濒危植物四药门花组织培养快繁方法,属于珍稀濒危植物组织培养快繁方法。该方法包括外植体灭菌处理、外植体启动培养、继代培养、生根培养以及移栽等过程。本发明专利技术显著的优势在于运用1/4MS,添加KT或KT和6‑BA组合,诱导率达到100%。生根培养基通过添加活性炭后生根率达到了100%,添加IBA的培养基平均生根条数达到5.78条,植株生长健壮。运用本发明专利技术能够在短期内快速大量繁殖健壮四药门花,达到对珍稀濒危四药门花种群繁殖保育和工厂化生产的目的。本发明专利技术外植体灭菌以及初代培养的萌发率可达为51.06%,诱导率与生根率、移栽成活率均可达100%,且培养周期短,繁殖率高,可实现工厂化生产。
The present invention discloses a kind of rare and endangered plants tetrathyrium subcordatum tissue culture propagation method, which belongs to the method of rapid propagation of rare and endangered plant tissue culture. The method includes explant sterilization, explant initiation culture, subculture, rooting and transplanting. The present invention is the significant advantages of using 1/4MS, adding KT or a combination of KT and 6 BA, induction rate reached 100%. The rooting rate of the rooting medium was 100% by adding activated carbon. The average number of roots reached 5.78, and the growth of the plant was robust by adding IBA. The use of the invention can in a short period of rapid propagation of robust tetrathyrium subcordatum, achieve the purpose of rare and endangered species conservation and breeding group siyao door factory. The invention of explant sterilization and initial culture the germination rate could reach 51.06%, the induction rate and rooting rate, the survival rate was up to 100%, and the training cycle is short, high reproduction rate, can realize the industrialized production.
【技术实现步骤摘要】
一种珍稀濒危植物四药门花组织培养快繁方法
本专利技术属于珍稀濒危植物组织培养快繁方法,具体涉及一种珍稀濒危植物四药门花组织培养快繁方法。
技术介绍
四药门花(Loropetalumsubcordatum)是金缕梅科(Hamamelidaceae)檵木属常绿灌木或小乔木,是中国特有的残遗植物,是我国二级保护植物(于永福.中国野生植物保护工作的里程碑——《国家重点保护野生植物名录(第一批)》出台[J].植物杂志,1999(05):3.)。四花门花株形优美,花期长,也是一种极具应用价值的景观植物,仅我国分布于广西木论、贵州茂兰、广东中山以及香港几个地区,因其分布区域狭窄,且数量极少,被列为IUCN(InternationalUnionForConservationOfNature)稀有植物和中国国家重点保护野生植物(张宏达.中国植物志:金缕梅科[M].北京:科学出版社,1979.)。对四药门花的生殖生态学研究发现,种群存在自交衰退现象,其自然结实率仅有4.79%,即使辅以人工异株授粉,其结实率也仅有6.67%(顾垒,张奠湘.濒危植物四药门花的自花授粉[J].植物分类学报,2008,46(5):651–657.)。为保护现有的种质资源,减轻资源压力,扩大种群数量,并能实现推广利用,组织培养快速繁殖成为重要的手段,能够为迁地保护和扩大种群提供新技术支撑。组织培养是一种能快速无性繁殖的方法,繁殖周期短,繁殖系数大,遗传稳定,能够保存亲本优良的性状,被广泛的用于有性繁殖困难或缓慢的植物种类以及自然种群稀少的濒危植物的保护中。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺点与不足,本专...
【技术保护点】
一种珍稀濒危植物四药门花组织培养快繁方法,包括外植体灭菌处理、外植体启动培养、继代培养、生根培养以及移栽,其特征在于:所述的外植体灭菌处理为使用0.1%HgCl
【技术特征摘要】
1.一种珍稀濒危植物四药门花组织培养快繁方法,包括外植体灭菌处理、外植体启动培养、继代培养、生根培养以及移栽,其特征在于:所述的外植体灭菌处理为使用0.1%HgCl2灭菌处理5~12min;所述的外植体启动培养所用的外植体启动培养基为:MS+6-BA0.5~2.0mg·L-1+IBA0.1~0.2mg·L-1+卡拉胶9g·L-1+蔗糖30g·L-1,pH调至5.8~6.0;所述的继代培养所用的增殖培养基为:1/4MS+KT2.0~10.0mg·L-1+6-BA0~2.0mg·L-1+IBA0~0.3mg·L-1+AC0.3~0.5g·L-1+卡拉胶9g·L-1+蔗糖30g·L-1,pH调至5.8~6.0;所述的生根培养所用的生根培养基为:1/2WPM+KT0~1.0mg·L-1+IBA0.5~1.0mg·L-1+AC0.3~0.5g·L-1+卡拉胶9g·L-1+蔗糖20g·L-1,pH调至5.8~6.0;所述的移栽的基质为腐殖土、黄心土:腐殖土=2:1或黄心土:腐殖土:沙=2:1:1。2.根据权利要求1所述的珍稀濒危植物四药门花组织培养快繁方法,其特征在于具体包括如下步骤:(1)外植体灭菌与外植体启动培养:以四药门花植株新梢茎段为外植体,选取树姿优美,生长健壮,无病虫害的植株采摘当年生枝条,将枝条剪去叶片,保留叶柄,用软毛刷蘸洗洁精水轻轻刷洗枝条,用自来水冲洗干净后置于超净工作台上,剪成含1~2个叶腋芽的茎段,用0.1%升汞溶液灭菌处理5~12min,期间不断摇动,用无菌水冲洗5~6次,接种到外植体启动培养基进行叶腋芽诱导;(2)继代培养:将步骤(1)诱导得到的叶腋芽分别接种于增殖培养基上进行继代培养,将伸长的叶腋芽剪切成茎段接入新的增殖培养基,如此反复,得到大量丛生芽;(3)生根培养:将步骤(2)继代培养得到的丛生芽切割成带顶芽茎段接种于生根培养基中进行诱导生根;(4)炼苗移栽:将步骤(3)获得的生根苗移至温室,将高3cm以上且根系发达、茎叶健壮的无菌生根苗取出,洗净在根系上附着的培养基,移栽到适宜湿度的装入穴盘的基质中,盖上透明塑料...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄久香,孙朝辉,周玉洁,申长青,李妍琳,李威慧,
申请(专利权)人:华南农业大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
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