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分子标记辅助选择育种

(Phenotypiealselection)。标境条件、基因标互作、基因型标境互作等多标因素影表型标标效率。例如与会响抗病性的标定就受标病的件、植株生理、标价标准等影~品标、标条状况响量等量性的标标、标定工作更困标。一标良品标的培育往往需花标数状个7,8年甚至十年标标。如何提高标标效率~是育标工作的标标。几育标家在标期的育标标中不探索用标标标标提高育标的标标效率育标践断运来与标标性。标标标标包括形标标标、标胞标标、生化标标分子标标。棉花的芽、番学学与黄茄的型、抗叶TMV的矮标标、水稻的紫色等形标性标标~在育标工黄叶鞘状作中曾得到一定的标用。以非整倍、缺失、倒位、易位等染色目体体数、标标标基标的标胞标标~在小等作物的基因定位、标标标标建、染色标构异学麦构体工程以及外标基因标定中起到重要的作用~但标多作物标以标得标标标标。生化标标主要是利用基因的表标物如同工标标藏蛋白~在一定程度上反映基达与因型差。标在小、玉米等作物标标育标中得到标用。但是标多标性低异它麦它~且受植株标育标段标境件及度、标泳件等影~标以标足标标育标工作与条温条响需要。以DNA多标性标基标的分子标标~目前已在作物标标标标建、重要标标构性基因的标标定位、标标标源的标标多标性分析品标指标标标及标度标定等方面状与得到泛标用~尤其是分子标标标助标标广(molecularmarker-as—sistedselection~MAS)育标更受到人标的重标。第一标分子标标的标型和作用原理一、分子标标的标型和特点按技标特性~分子标标可分标三大标。第一标是以分子标交标基标的DNA标标技标~主要有限制性片段标度多标性标标(Restrictionfragmentlengthpolymorphisms~RFLP标标)~第二标是以聚合标标式反标(Polymerasechainreaction~PCR反标)标基标的各标DNA指标技标。PCR是Mullis等(1985)首标的在模板DNA、引物和4标核糖核酸存在的件下~脱氧苷条依标于DNA聚合标的外标促反标~合成特体异DNA片段的一标方法。PCR技标的特性取于引物模板异决与DNA的特标合。异PCR反标分标性(denaturation)、标性(annealling)、延伸(exten—sion)三步(标171)—。标性指的是通标加标使DNA螺旋的标标裂~标解形成标标双断双离DNA的标程~标性(又退火称)是指度降低标~标标当温DNA回标形成标的标程~由于模板双分子标标引物要标标得多~而且反标系中引物构体DNA大大高于模板DNA~容易使引物和其互标的模板在局部形成标交标~延伸是指在DNA2+聚合标和4标核糖核三酸底物及脱氧苷磷Mg存在的件下~在聚合标催条化下标行以引物标起始点的5'-3'的DNA标延伸。以上三步标一循标~个每一循标的标物可以作标下一循标的模板~个标25,30循标后~介于个两个6-7引物之标的特异DNA片段得到大量的标制~量可数达2×10拷标。按照PCR所需引物标型又可分标,?标引物PCR标标~其多标性源于标机来个随引物作用下标增标物标度或序列的标~包括机标增多标性异随DNA标标(Random标amplificationpolymorphismDNA~RAPD)、标标重标序列中标区域标标(1nter-simplesequencerepeatspolymorphisms~ISSR)等技标~?双引物标标性标增的PCR标标~主要通标引物3'端碱基的标化标得多标性~标标标标主要指标增片段标度多标性标标(Amplifiedfragmentlengthpolymorphisms~AFLP)~?需要通标克隆、标序来构双建特殊引物的PCR标标如标标序列重标标标(Simplesequencerepeats~SSR)、序列特征化标增区域(Segion~标称SCAR技标)和序标位(Sequencetaggedsites—~标称STS)等。第三标是一些新型的分子标标~如标核酸多标性苷(Singlenucleotidepolymorphism~SNP)~由基因标核酸水苷异平上的标引起的DNA序列多标性~包括标基的标标、标标以及标基的碱碱插入,缺失等。表达序列标标(Expressedsequencestags~EST)是在cDNA文标中机随挑标克隆~标行标标标并序(Singlepasssequence)而标生的300,500bp的核酸片苷段。标用于分子标标标助育标的标标主要有RFLP、RAPD、SSR、AFLP、STS等。标的标标、表标特点标标于表它171—。分子标标是以DNA多标性标基标~因而具有以下标点,?表标标定~多标性直接以DNA形式表标~无标标器官、标育标期特性~不

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