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盐巴戟天的炮制工艺研究中药学专业

1、盐巴戟天的炮制工艺研究盐巴戟天的炮制工艺研究目目 录录盐巴戟天的炮制工艺研究盐巴戟天的炮制工艺研究 摘要:摘要:目的目的 本论文盐巴戟天的炮制工艺研究是在保证巴戟天符合 2015年版药典要求的前提下,在满足中药饮片企业生产的工艺参数的条件下,通过对巴戟天的炮制工艺进行验证,从而生产出安全、保障、可控的优质中药饮片。在确保了巴戟天从原料、半成品、成品的整个工艺流程和工艺参数,对巴戟天成分耐斯糖的含量进行研究。方法方法 对盐巴戟天炮制工艺条件和生产操作过程进行验证,并且通过对巴戟天饮片进行含量测定、水分、灰分、二氧化硫等项目的检查,对巴戟天所含重要成分耐斯糖进行高效液相检测。结果结果 盐巴戟天在每

2、道工序都符合 2015 年版药典的前提下,得出其最佳炮制工艺为每 100 千克巴戟天用食盐 2 千克,蒸制温度 90-100,蒸制 3-4 小时。结论结论 盐巴戟天的炮制工艺是安全有效的,符合 2015 年版药典的要求,并且巴戟天经过盐制后其耐斯糖成分含量明显增加。关键词关键词:巴戟天;炮制;盐制;工艺研究 Salt Morinda officinalis radix processing technology research Abstract: objective Salt Morinda officinalis radix of processing technology of this

3、 paper research is medicinal indianmulberry root in accordance with the requirements of the 2015 edition pharmacopeia, under the premise of to meet Chinese medicine yinpian enterprise production process parameters conditions, through the processing of medicinal indianmulberry root process validation

4、, so as to produce safety, security, controlled high quality Chinese medicine yinpian. To ensure the whole process and technological parameters of the raw material, semi-finished product and finished product, the content of the sugar content of the medicinal powder was studied. Methods For Salt Mori

5、nda officinalis radix processing technological conditions and production operation process is studied, and through the study of the content determination of medicinal indianmulberry root yinpian, moisture, ash content, sulfur dioxide, such as inspection of the project, the medicinal indianmulberry r

6、oot contains important component of high performance liquid detection, sugar. Results According to the pharmacopoeic of 2015, the best processing technology was obtained for every 100 kilograms of medicinal powder. The temperature was 2 kg, and the evaporation temperature was 90 to 100, and the stea

7、ming was 3 to 4 hours. Conclusion The processing technology of halberd is safe and effective, which is in line with the requirements of the 2015 pharmacopoeia, and the content of its resistance to sugar is obviously increased after the salt system. Key words: Morinda officinalis radix, Processing,Sa

8、lt is made, Technology research 1 1 前言前言巴戟天为茜草科植物巴戟天的干燥根,始载于神农本草经,列为上品1-3。巴戟天味甘、略辛温,临床上具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效4。中药炮制学记载:“生巴戟天具有补肝肾、强筋骨、祛风除湿的效果。而盐巴戟天则主要增强了巴戟天入肾经的效果,加上巴戟天性温和而不燥热,不仅有增强补肾助阳作用,而且久服也没有其他副作用。甘草制巴戟天则大大增强其补益功效,对患者起到补肾壮阳、滋补气血的作用。酒制巴戟天则有温肾助阳、祛风湿、强筋骨的作用。历代中,巴戟天的炮制方法有净制、盐制、药汁制、酒制、炒制等 6-7 ;而在现代,巴戟天运用了先

9、进的科学技术和试验条件,其炮制工艺、炮制前后的化学成分发生变化以及炮制对药效学的影响被深入、系统地研究 9。这可为科学地制订巴戟天的炮制工艺和质量标准提供参考,进而为临床合理用药提供科学的依据 10。无论是巴戟天的炮制还是其他中药的炮制技术,它们都是经过了多年的演变而来。我们当代学者在尊重前人的成果的同时也不忘在继承的基础上创新,因为这样我们才能更好的挖掘并发扬中药炮制的精髓。观察巴戟天的炮制历史,我们发现它经历了一个从简单到复杂的发展过程4。从唐朝到清朝大约四五十部书籍记录了巴戟天的不同炮制方法,目前关于巴戟肉的炮制大多数是药汁制巴戟天、盐制巴戟天和酒制巴戟天这几种5。在巴戟天净制这一点,真

10、正使用较多的方法是去心。而目前巴戟天的炮制研究主要是集中在盐制巴戟天和巴戟肉上,而对甘草制的方法研究比较少。如今,各巴戟天炮制品之间的药效成分因各自不同的炮制工艺而使得含量不同。巴戟天的炮制优化自然成为大家的首要问题。我觉得,我们应该科学地继承和发扬古人对巴戟天经长期实践经验总结出的炮制方法,并运用现代科学技术进行深入的研究和探讨,发现并找到巴戟天最合适的炮制方法,从而发挥巴戟天最大的疗效。另外,对炮制工艺应进行实验研究,取得可靠的数据,使其炮制结果稳定。为了比较不同炮制方法或炮制工艺对巴戟天的化学成分含量的影响,我们今后更应进一步找出最适合对巴戟天炮制的工艺参数,从而为巴戟天最佳炮制工艺提供

11、理论依据。进一步使其发挥最佳药物疗效,从而更好地为大家所用8。巴戟天临床用药前一般都需要经过炮制,而目前巴戟天的炮制研究以盐制巴戟天为多。我们知道巴戟天的主要功效之一是补肾助阳,而食盐性味寒,有补肾、软坚、凉血降毒的作用,用盐制巴戟天可引药入肾,增强壮阳补肾的效果。盐制巴戟天的方法主要是用食盐水拌匀,浸渍一定时间,置于适宜蒸制容器内加热蒸透,趁热抽去木心,切片,干燥。传统用法是将木心作为非药用部位去除, 而现代科学研究证明巴戟天肉与木心中所含化学成分不同12,而且去除巴戟天的木心也利于中药饮片的加工。然而巴戟天含有环烯醚萜苷类、多糖类以及蒽醌类等多种化学成分13。其中丰富的多糖作为补肾壮的主要

12、有效成分,能够对人类精子中的脱氧核糖核酸(DNA)起到保护作用14-15。我的论文主要是根据公司的实验设备条件对巴戟天盐制前后糖类成分的相关研究并进行讨论。2 2 材料与仪器材料与仪器2.12.1 试剂与材料试剂与材料试剂:试剂:甲醇(广州化学试剂厂);甲苯(广州化学试剂厂) 乙醇(分析纯 AR,广州化学试剂厂) 乙酸乙酯(分析纯 AR,苏州永迈物资有限公司);甲酸(分析纯AR,广州化学试剂厂);甲醇(色谱纯)材料:材料:普通硅胶 G 预制板、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(C18)2.22.2 仪器仪器超纯水机(青海奥勒姆科技有限公司),硅胶板(GF254),多功能紫外透射仪(上海光豪分析仪器有

13、限公司),薄层色谱扫描影像系统,电热恒温水浴锅(齐欣科技仪器有限公司,HWS-26)、生物显微镜(广州市明美光电技术有限公司),十万分之一天平、万分之一天平,高效液相色谱(岛津国际贸易有限公司,LC-20A),三频数控超声波清洗器(KQ-700VDB)。 周转箱;直线式往复式切药机 ,RQXL-2000 真空气相置换式润药机,蒸药箱、不锈钢润药框,热风循环烘箱、目筛、烘干托盘、滑轮托盘架等。2.32.3 药品药品鉴定药材鉴定药材:巴戟天鉴定药材(中检院)。供试品供试品: 盐巴戟天 批号:20171006021(供试品 1);20171006022(供试品 2)。3 3 方法方法3.13.1 饮

14、片生产工艺流程饮片生产工艺流程 巴戟天炮制工艺包括净制、洗润、切制、炮制、干燥、筛选、内包、外包、入库等工序,具体流程如下。 药材干燥内 包 洗润入 库外 包检查检测内包材外包材检测检查杂质的比例杂质的比例炮制检查切制检查筛选检查 净制检查3.23.2 饮片生产过程及工艺条件饮片生产过程及工艺条件3.2.13.2.1 净制工序净制工序 按照批生产指令到原料仓库领料。将物料移至粗选间置于洁净工作台上,手选挑出杂质后装入洁净塑料筐。目的:为了除去巴戟天药材中的杂质、异物等。操作程序:挑去药屑、杂质及虫蛀品即可。最后达到泥土、杂质含量不得超过 2.0%。表 1 粗选检查结果批号项目指标要求17060

15、2401170602402170602403药屑、杂质含量不得超过 2%0.8%1.2%1.0%收率95%以上100.00%100.00%100.00%物料平衡率95%-105%100.00%100.00%100.00%结论合格合格合格合格注:物料平衡率(%)=合格品量 + 不合格品量 + 取样量领料量 100%3.2.23.2.2 洗润工序洗润工序 将净制后的巴戟天放入润药池中采用抢水洗法,把挑选整理过的中药材投入盛有清水的洗药池中,快速洗去泥土、灰尘、霉斑或其它杂质。迅速捞起药材,放入盛器内,沥干水。使巴戟天药材变得清洁、润湿,利于蒸制。工艺参数:洗药时间:2-3 小时。经过上述操作,本品

16、润湿,药透水尽。 表 2 洗润检查结果批号项目指标要求170602401170602402170602403洗润用水标准水符合符合符合水温40-45454545浸泡时间2-3 小时333洗润程度洁净润透,断面无硬心符合符合符合结论合格合格合格合格3.2.33.2.3 切制工序切制工序目的:将巴戟天药材加工成一定规格的饮片,从而方便使用、调配、储存以及运输等。操作程序:按平置刀板刨片机操作规程对巴戟天药材进行切制。将本品切成一段段,挑选出过 长及连刀片重新进行切制合格后,装入洁 净周转箱内即可。条形参数: 长度 2035mm。经过切制后要求 巴戟天饮片呈规则的长条,长度不在 2035mm 的异形

17、片的总量不能高于 10%。表 3 切制检查结果批号项目指标要求170602401170602402170602403饮片长度20-35mm符合符合符合异型片不得超过 10.0%3.5%4.0%3.9%收率95%以上98.48%98.52%98.40%物料平衡率95%-105%98.48%98.52%98.40%结论合格合格合格合格3.2.43.2.4 炮制工序炮制工序取切制好的巴戟天,加食盐水拌匀(每 100kg 巴戟天用食盐 2kg),浸润 1 到 2 小时。将切制好的巴戟天药材投入 RQXL-2000 真空气相置换式润药机中操作,然后再将润好的巴戟天倒入蒸药机内蒸至药物表面呈黄褐色至褐色,

18、要求经过蒸制后整批巴戟天药材未蒸透率低于 3%,蒸药温度 90-100,蒸制时间 34 小时,每次投料量约 30kg。 表 4 蒸制检查结果批号项目指标要求170602401170602402170602403闷润时间2-3 小时333蒸制温度90-100100100100蒸制时间3-4 小时333性状药物表面呈黄褐色至褐色,部分具焦斑。符合符合符合结论合格合格合格合格3.2.53.2.5 干燥工序干燥工序采用设备干燥法,用热风循环烘箱对炮制后的巴戟天药材进行干燥,烘干。经干燥后要摊凉,装入周转箱,再转入下一工序。其中工艺参数,干燥温度:5565。干燥的时间:35 小时。平铺厚度 3-4cm。

19、摊凉至室温。质量要求:本品最后含水量要低于13.0%。 表 5 干燥检查结果批号项目指标要求170602401170602402170602403干燥温度55-65606560干燥时间3-5h544水分不超过 13.0%7.52%8.72%8.04%结论合格合格合格合格3.2.63.2.6 筛选工序筛选工序将盐制后的巴戟天饮片置洁净的工作台上用 10 目筛筛选,挑去生片、糊片及杂质等。质量要求:药材经过筛选后其药屑、杂质总量不得高于 2%。表 6 筛选检查结果批号项目指标要求170602401170602402170602403药屑、杂质含量不得过 2.0%1.1%0.8%0.7%结论合格合格

20、合格合格3.2.73.2.7 包装工序包装工序为了把盐巴戟天分成一定规格的包装,从而方便调配、使用和储存。将筛选好的盐巴戟天饮片倒在工作台上,按指定的重量规格进行称量并装袋,然后按封口机操作规程进行封口。然后对不同规格的盐巴戟天药材内包装进行检查,观察其封口有无漏气,标签合格证是否贴上、有没有与实物相符等,若符合要求并且复核无误后,就对其进行缝口,贴上标签,包装完成。表 7 包装检查结果批号项目指标要求170602401170602402170602403内包装装量差异0.2%0.3%0.2%外包装1.0%0.4%0.5%0.8%结论合格合格合格合格3.33.3 盐巴戟天药材检测盐巴戟天药材检

21、测3.3.13.3.1 来源及性状鉴别来源及性状鉴别来源:药材为茜草科植物巴戟天 Morinda officinalis How 的干燥根。叶片略厚,手感摸起来像纸一样,枯萎的叶片呈棕色,成片长椭圆形,嫩叶椭圆形或倒卵形,长度 6 至13 厘米,3 到 6 厘米宽,上端尖锐而稍短,基部纯圆形,边缘全缘状,依稀可见有疏短毛。性状:巴戟天生品呈扁圆柱形短段或不规则块。表面灰白色,一条条清晰的纵纹,仔细观察还可以看见横裂纹。中空。气微,味甘。盐巴戟天则长短一致,呈扁圆柱形不规则短段。表面黄褐色至褐色,能看见纵纹以及横裂纹。切面黑色或黑褐色,中空。闻起来稍微咸而带微涩。 图 1 巴戟天植物图 图 2

22、巴戟天饮片 图 3 巴戟天炮制图 图 4 盐巴戟天成品图 3.3.23.3.2 盐盐巴戟天显微鉴别巴戟天显微鉴别 对巴戟天样品 3 批进行实验,用巴戟天对照药材进行对比实验。并且对 3 批样品的粉末的显微鉴别特征进行描述。首先拿粉碎后的巴戟天粉末通过 3 号筛。拿些许过虑好的粉末置载玻片上,滴加大概 1-2 滴水合氯醛试液,利用酒精灯上外焰加热使其透化,滴加甘油乙醇试液,然后盖上盖玻片。冷却后拿到显微镜下仔细观察。 3.3.33.3.3 盐盐巴戟天薄层鉴别巴戟天薄层鉴别称取巴戟天粉末 2.5g 置锥形瓶中,加乙醇溶液 25ml,加热水浴回流 1 小时把。取出过滤,滤液倒入蒸发皿于水浴锅上滤液浓

23、缩至 1ml 作为供试品溶液。同样另取巴戟天对照药材 2.5g,同法制成对照药材溶液。根据中国药典2015 年版薄层色谱法,吸取巴戟天供试品溶液、对照品溶液各 10l,分别点于同一硅胶 GF254薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(8:2:0.1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视即得。3.3.43.3.4 盐盐巴戟天含量测定巴戟天含量测定色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(3:97)为流动相;采用蒸发光散射检测器检测。对照品溶液的制备对照品溶液的制备 取耐斯糖对照品适量,精密称定,加流动相制成每 1ml 含0.2

24、mg 的溶液,即得。供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取粉碎好的盐巴戟天粉末,通过三号目筛,精密称定 0.5g,于具塞锥形瓶中。精密加入流动相 50ml,称定重量,沸水浴中加热 30 分钟,放冷,过滤,装入进样瓶。测定法测定法 分别精密吸取对照品溶液 10l、30l,供试品溶液 10l,注入液相色谱仪,测定,用外标两点法对数方程计算,即得。3.3.53.3.5 盐巴戟天药材检查盐巴戟天药材检查水分水分 依据水分测定法(根据中国药典2015 年版四部通则)测定。结果:实测巴戟天样品 3 批,结果为 10.45%12.12%,平均值 11.26%。根据中国药典2015 年版四部通则 0212 要求

25、饮片水分规定不得过 13.0%,故要求巴戟天水分不得超过 13.0%。表 8 巴戟天水分测定数据比较序号批号来源取样(g)水分平均5.12811.50%1170602401 仙逸堂5.12212.12%11.81%5.13010.45%2170602402 仙逸堂5.12510.65%10.55%5.11811.24%3170602403 仙逸堂5.12511.62%11.43%平均值(%)11.26%总灰分总灰分 依据灰分测定法(根据中国药典2015 年版四部通则)测定。供试品经打粉机粉碎,混合均匀后,称取供试品大概 3g,置至恒重坩埚中,称定重量(坩埚和供试品总的重量),放在电热套上加热。

26、使巴戟天粉末完全炭化的一个判断标准就是加热直到没有白烟冒起。然后把坩埚拿出移至 600的超高温马弗炉中,把温度调至 500600,灰化 3 个小时以上,直到恒重两次直接低于 5mg 根据残渣重量,计算出巴戟天中总灰分的含量(%)。结果:实际测得样品 3 批,结果为 3.984.62%,平均值 4.26%。根据中国药典2015 年版四部通则规定本品总灰分不得超过 6.0%。表 9 巴戟天总灰分测定数据比较序号批号来源取样(g)总灰分平均3.1084.00%1170602401 仙逸堂3.1784.02%4.01%3.0604.99%2170602402 仙逸堂3.1064.01%4.50%3.9

27、823.98%3170602403 仙逸堂3.1454.62%4.30%平均值(%)4.26%二氧化硫残留量二氧化硫残留量 依据二氧化硫残留量测定法(根据中国药典2015 年版四部通则)测定。结果:实测样品 3 批。结果为 12 mg/kg38mg/kg,根据中国药典2015 年版第四部通则 0212 要求,药典要求巴戟天干品二氧化硫残留量要低于 150mg/kg。根据药材的来源及长期采集、加工、使用的习惯,并不需要进行硫磺熏蒸处理,而且 3 批样品检测结果平均值均低于标准规定的百分之十。 表 10 巴戟天二氧化硫残留量数据比较序号批号来源取样(g)二氧化硫残留量(mg/kg)平均(mg/kg

28、)10.0198121170602401 仙逸堂10.0177282010.0211302170602402 仙逸堂10.0237343210.0246203170602403 仙逸堂10.02163829 平均值 (mg/kg)27浸出物浸出物 依据生产工艺需要,照水溶性浸出物项下的冷浸法(根据中国药典2015年版四部通则)测定。结果:实测样品 3 批,结果为 73.30%75.70%。平均值为 74.45%。根据 2015 版药典四部通则要求最小值下浮 20%,本品水溶性浸出物要求高于 50.0%。表 11 巴戟天水溶性浸出物数据比较序号批号来源取样(g)浸出物平均值6.0873.80%1

29、170602401仙逸堂6.0774.20%74.00%6.0374.50%2170602402仙逸堂6.0675.70%75.10%6.0175.20%3170602403仙逸堂6.0773.30%74.25%平均值74.45%4 4 结果结果4.14.1 盐盐巴戟天检测结果巴戟天检测结果性状鉴别:符合 2015 年版中国药典标准。显微鉴别:草酸钙针晶束、石细胞、木纤维束等皆能找到。 图 8 草酸钙针晶束 图 9 石细胞 图 10 木纤维束1 2 3 41、2 巴戟天对照药品 3、4 巴戟天供试品薄层鉴别:将薄层板与紫外光下能清晰地观察到巴戟天药材跑出的点,然后将供试品药材与巴戟天对照药材对

30、比,通过比较双方 RF 值判断巴戟天供试品中含有巴戟天药材对照品的成分。含量测定:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(3:97)为流动相;蒸发光散射检测器检测(ELSD)。理论板数按耐斯糖峰计算要求高于 2000。结果可见图 10-13。由图中可见供试品中盐巴戟天供试品与盐巴戟天对照品的峰保留时间一致,可以判定这个峰为耐斯糖成分。加上理论塔板数皆大于 2000,证明数据准确有效。经计算得出盐巴戟天成品中耐斯糖含量为 3.71%、巴戟天成品中耐斯糖含量为 3.07%皆符合药典标准的 2.0%。由表 12、13 可知,以巴戟天生品为对照,经盐制方法处理后,耐斯糖含量明显提高。表 12 含量

31、测定结果批号项目指标要求170602401170602402170602403出峰时间4 分钟444峰面积8226564655565257138含量耐斯糖不得少于2.0%3.4%3.2%3.8%结论合格合格合格合格表 13 盐巴戟天含量测定数据比较序号批号来源取样(g)耐斯糖平均0.5103.60%1170602401 仙逸堂0.5063.72%3.66%0.5103.71%2170602402 仙逸堂0.5083.83%3.77%0.5113.68%3170602403 仙逸堂0.5123.72%3.70%平均值(%)3.71%表 14 巴戟天含量测定数据比较序号批号来源取样(g)耐斯糖平均

32、0.5103.10%1170602401 仙逸堂0.5063.12%3.11%0.5103.01%2170602402 仙逸堂0.5083.13%3.07%0.5113.08%3170602403 仙逸堂0.5123.02%3.05%平均值(%)3.07%图 12 巴戟天对照品图 13 巴戟天供试品盐巴戟天检查:水分:3 组平均数值 11.26%,总灰分 3 组平均数值 4.26%,浸出物 3 组平均数值 74.45%二氧化硫残留量的检测:过氧化氢吸收液颜色微微紫红色,滴定得出二氧化硫含量为 27mg/kg,。以上各项指标可以得出盐巴戟天皆符合 2015 年版中国药典标准,药材合格。4.2 盐

33、盐巴戟天炮制工艺结果巴戟天炮制工艺结果在每道工序都符合 2015 年版中国药典的情况下,生产中盐巴戟天最佳炮制工艺为每 100KG巴戟天用盐水 50KG(其中含食盐 2KG),浸润 1 到 2 小时,蒸制温度90-100,蒸制 3-4 小时。并且按照炮制工艺流程炮制出来的巴戟天在经过性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别和含量测定等检测后,证实达到相应的工艺标准。5 5 讨论讨论 5.1 关于关于盐盐巴戟天含量检测的讨论巴戟天含量检测的讨论含量测定方面:我的实验盐巴戟天的含量测定是采用蒸发光散射检测器(HPLC ELSD)对其成分耐斯糖进行检测。而巴戟天药材要用到外标两点法对数方程进行分析从而计算出含量

34、的。根据蒸发光散射检测器的工作原理,药材进样后跑出来的峰面积和进样体积大多数不会呈现出线性关系。所以巴戟天含量测定使用外标两点法,分别进样 10ul 与 30ul 的供试品,将进样体积以及对应的峰面积取对数,然后通过作出的两点确定一条直线方程,再根据对数方程:lgA=KlgC+b,从而求出盐巴戟天中耐斯糖的含量。经计算得出盐巴戟天成品中耐斯糖含量为 3.71%、巴戟天成品中耐斯糖含量为3.07%。由表 12、表 13、表 14,的几组数据测定结果可以看出巴戟天经过盐制后其耐斯糖成分含量明显增加。通过查看的有关巴戟天糖分的文献我认为很大的原因是炒制加热或辅料的作用,使部分多糖水解成醇溶性糖、单糖

35、或低聚糖。5.25.2 关于关于盐盐巴戟天炮制工艺的讨论巴戟天炮制工艺的讨论我的实验论文是在中药饮片公司中完成的,所以盐巴戟天的生产工艺是依据 2015年版中国药典的操作规程和检测方法,过程中改变的是巴戟天生产工艺的洗润和蒸制的工艺参数,从而达到最大限度的利用巴戟天药材,发挥巴戟天的药效。其中巴戟天的润洗是采用抢水洗法,将挑选好的巴戟天投入盛有清水的洗药池中,迅速洗干净泥土、灰尘、霉斑或其它杂质。然后快速捞起药材,放入盛器内,沥干水。而洗药这阶段大概是 2-3 小时,为了确保巴戟天药材能尽量润湿,达到药透水尽的效果。到了蒸制阶段是按 RQXL-2000 真空气相置换式润药机操作规程进行操作,使

36、药材蒸透方可取出放凉,再放入周转箱即可。这其中蒸药的温度、时间起到关键作用,温度要控制在90-100之间,蒸制 3 到 4 小时,一个很明显的判断依据是巴戟天表面蒸至呈黄色或黄褐色,并且最后要求未蒸透率要低于 3%。盐巴戟天经过检测的结果可知炮制能提高其有效成分耐斯糖的溶出率。 参考文献参考文献1国家药典委员会.中华人民共和国药典一部(M).北京:中国医药科技出版 社,2015.1(1).132叶定江,张世臣,吴皓.中药炮制学M.2 版.北京:人民卫生出版社,2011.3.3许冬瑾,伍小妹,黄云,等.鲜巴戟天盐制工艺J.中国实验方剂学杂志,2011,17(12):50.4邹兵,马雪松,姜永粮,

37、等.盐巴戟天炮制工艺的优化J.中国医药指南,2010,8(34),223.5景海漪,史 辑,贾天柱.巴戟天的炮制历史沿革R.辽宁中医药大学药学院,辽宁大连. 116600. 2010.12(6).216景海漪,史辑,贾天柱. 巴戟天的炮制历史沿革J. 中国药房,2013,24(27):2575-2577.7李赛.巴戟天炮炙前后的化学研究J.中成药,1987,9(6).14.8陈地灵,帅欧,林励,等.炮制方法对巴戟天糖类成分影响的研究J.中国药房,2012,Pharm Bull,1963,11( 3) : 372 378.23(3):217.9 景海漪,崔妮,史辑,等.巴戟天及不同炮制品蒽醌含量

38、比较研究J. 亚太传统医药,2014,10(1):21-23.10 CHEN D L, LI N, LIN L, etal. Confocal mirco-Raman spectroscopicanalysis of the antioxidant protection mechanism of the oligosaccharidesextracted fromMorinda officinalis on human sperm DNAJ. J Ethnopharmacol,2014, 153(1): 119-124.11 CHEN Y G, LIU X H, LI L, etal. Pro

39、tection effect of an oligosaccharideextracted from radix Morindae officinalis on senile dementia in ratsJ.Lat Am J Pharm, 2013, 32(8): 1152-1157.12 刘晓涵,陈永刚,林励,等.巴戟天蒸制前后糖类成分 HPLC 指纹图谱的研究J.中成药,2009,31(9):1 313.13 CHEN D L, LI N, LIN L, etal. Confocal mirco-Raman spectroscopicanalysis of the antioxidan

40、t protection mechanism of the oligosaccharidesextracted fromMorinda officinalis on human sperm DNAJ. J Ethnopharmacol,2014, 153(1): 119-124.14陈忠,刘琳玲,何猛熊,等.南药巴戟天多糖提取方法的比较研究J.科技通报,2004,20(6):546-548.15 李赛, 欧阳强, 谈宣中,等.巴戟天的化学成分研究 J .中国中药杂志, 1991, 16(11):675. 综综 述述盐巴戟天炮制工艺的相关研究盐巴戟天炮制工艺的相关研究巴戟天为茜草科植物巴戟天的干

41、燥根,味甘辛,性微温,有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效1。巴戟天寡糖具有明显的补肾壮阳作用,属于巴戟天补肾壮阳作用的有效成分之一7。临床上一般用盐巴戟天,炮制后寡糖变化如何尚无人考察,因此我测定了巴戟天中补肾壮阳的主要成分耐斯糖和多糖的含量,并以此为指标确定了盐巴戟天的炮制工艺。1 1 巴戟天炮制工艺的研究巴戟天炮制工艺的研究巴戟天为茜草科植物巴戟天(Morinda officinalis How.)的干燥根,味甘辛,性微温,有补肾阳、强筋骨、祛风湿之功效1。巴戟天始载于神农本草经,列为上品,历代本草均有记载。是我国著名的“四大南药”之一,用于阳痿遗精,宫冷不孕,月经不调,少腹冷痛,风湿痹痛,筋

42、骨痿软等症。巴戟天中含有蒽醌、多糖、寡糖、脂类、有机酸等 11 类化合物及 24 种无机元素2。巴戟天的化学成分及其药理作用已有部分研究3-4,陈小娟等5探讨了巴戟多糖的免疫作用,认为其能增加幼年小鼠的胸腺的重量,提高小鼠巨噬细胞吞噬百分率和小鼠脾脏免疫特异玫瑰花结形成细胞的形成;巴戟天多糖可以提高果蝇性活力,并显著提高果蝇新生幼虫的羽化率,认为巴戟天多糖具有明显的补肾壮阳作用6。巴戟天寡糖具有明显的补肾壮阳作用,属于巴戟天补肾壮阳作用的有效成分之一7。临床上一般用盐巴戟天,炮制后寡糖变化如何?尚无人考察,因此我们测定了巴戟天中补肾壮阳的主要成分耐斯糖和多糖的含量,并以此为指标确定了盐巴戟天的

43、炮制工艺。2 2 巴戟天化学成分的研究巴戟天化学成分的研究巴戟天作为重要的中药材,其主要化学成分有:糖类、蒽醌类、环烯醚萜苷类、有机酸类、微量元素、氨基酸和甾醇类等8。1.糖类糖类是巴戟天的主要成分,具有重要的生物活性,包括单糖、低聚糖和多糖。其中,单糖主要是葡萄糖和甘露糖;低聚糖主要是耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖及菊淀粉型的六聚糖和七聚糖;多糖有 MOHP-、MOHP-、MOHP- 和 MOHP-,其中 MOHP- 主要由葡萄糖和果糖组成,分子质量约为2 000 U,MOHP- 是一种由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、果糖以及半乳糖组成的均一糖蛋白物质9-10。研究还表明巴戟天多糖可以提高成骨细胞

44、(OB)的活性。另外,巴戟素是从巴戟天药材中提取的一种糖甙类单体成分,是巴戟天抗氧化抗衰老作用的主要功能因子。2.蒽醌类巴戟天属植物几乎都含有蒽醌类化合物,巴戟天中已经分离并鉴定出的蒽醌类化合物有 18 种,包括大黄素甲醚(physcion)、甲基异茜(rubiadin)、甲基异茜草素-1-甲醚(ruhiadin-l-methylether)3.环烯醚萜苷类目前已从巴戟天中分离得到的环烯醚萜类化合物有水晶兰苷、四乙酰车叶草苷。还从巴戟天中分离得到3 个已知的环烯醚萜苷类化合物:车叶草苷、车叶草苷酸、去乙酰车叶草苷酸和2 个新化合物:环烯醚萜內酯及环烯醚萜苷。4.有机酸类已有学者从巴戟天中分离得

45、到棕(palmiticacid)和琥珀酸(succinic acid),后者是一种抗抑郁功能因子。5.氨基酸从巴戟天根的水溶性成分中分离得到的氨基酸包括11种游离氨基酸和17种水解氨基酸,有7种为人体必需氨基酸。6.微量元素巴戟天含有丰富的微量元素,其中包括 Fe、Mn、Cu、Zn、Cr、Sn、Ni、Mo、Co、V、Sr 等11种人体必需微量元素。巴戟天具有多种药理活性,可能是其有机成分与微量元素共同作用的结果。7.其他成分此外,从巴戟天根分离鉴定到-谷甾醇、24-乙基胆甾醇。林励11等采用 GS-MS 法从巴戟天根中分析出50余种挥发性组分,从中鉴定出龙脑、十六酸、十六酸乙酯、顺-9-十八烯

46、酸等15个组分。另外还从巴戟天根分离鉴定了十九烷等。林励等分析出5年生巴戟天总糖含量约60%,总蒽醌含量为3%左右,水解氨基酸总量为1.2%3.4%。值得注意的是,不同产地、施用不同生物有机肥料及不同栽培时间等都会对巴戟天化学成分含量产生较大影响。3 3 巴戟天药理作用的研究巴戟天药理作用的研究巴戟天含有多糖类、环烯醚萜苷类和蒽醌类等多种化学成分,其中丰富的多糖作为补肾壮阳的主要有效成分,能够对人类精子中的脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)起到保护作用12,同时其还具有治疗老年痴呆症13、抗疲劳等生理作用14。水晶兰苷作为巴戟天环烯醚萜类物质的一种重要成分,具有抗

47、炎镇痛作用15,能够抑制软骨细胞凋亡16,是巴戟天发挥祛风湿作用的主要物质基础。巴戟天中含有多种蒽醌类化合物,研究表明,巴戟天中提取出的蒽醌对于糖尿病的治疗具有帮助作用17。目前已经从巴戟天中分离并鉴定的蒽醌类成分共有 34 种,蒽醌类物质能够增加成骨细胞抗骨质疏松的能力18,并且具有抗菌、抗癌、抗病毒、凝血等生物活性,但是近几年的研究表明蒽醌类化合物在体内蓄积会导致肝肾损伤19,而蒽醌类化合物的药效毒效双向作用与其含量有较大的关系,因此研究巴戟天中的蒽醌含量具有重要意义。4 4 巴戟天质量标准的研究巴戟天质量标准的研究现代药理研究表明巴戟天提取物具有调节及改善内分泌系统, 增强机体的免疫功能

48、, 提高机体在缺氧刺激时的应激、代偿能力、促进造血干细胞的增殖和分化、增加细胞内碱性磷酸酶的活性、骨钙素的含量, 对神经系统有抗抑郁、增强学习记忆与抗衰老作用20 。同时还具有抗诱变、抗肿瘤、抗炎、抗疟、抗风湿及降血压的作用21 。由于全国各地用药习惯的不同, 巴戟天药材的入药基源较为混乱, 据笔者统计文献报道的伪品共有 2 科 8 种22-25, 其中以川虎刺和羊角藤比较常见。随着中药材市场的进一步规范及加工工艺26 、种植工艺的改进27 , 对于巴戟天药材质量控制的要求越来越高, 现行的 2015 版中国药典所规定的巴戟天项下检查项目(性状、鉴别、炮制、性味归经、功能主治及用法量等)己不能

49、完全适应目前的用药研究, 特别是缺乏量化指标, 就难以对巴戟天药材及其炮制品的质量稳定性进行控制, 为建立其较为完整的质量标准。5 5 巴戟天繁殖方式的研究巴戟天繁殖方式的研究巴戟天长期以来主要是无性繁殖,繁殖方式有扦插繁殖、种子繁殖和组培苗繁殖,其中扦插繁殖较为经济,为药农所接受;种子繁殖容易染病,成活率低;组培苗繁殖成本高,生长后期木质心容易腐烂,影响产量28。目前,国内学者关于组织培养方面有较多研究29,但大多采用大田里生长的巴戟天带节茎段或茎芽直接做为外植体进行快速繁殖。由于茎段容易被细菌和真菌菌丝寄生,难以做到彻底消毒,故影响到再生的成活率。若采用巴戟天幼胚的下胚轴为外植体,诱导愈伤

50、组织,并进一步诱导分化成幼苗,这不仅解决了快速繁殖体系容易染菌的问题,且可以为巴戟天的遗传转化、多倍体诱导、细胞悬浮培养提取次生代谢物等基因工程和细胞工程方面的研究奠定基础,具有重要的科学价值和经济价值。巴戟天有性生殖方面的研究较少,詹若挺等30对巴戟天 6 种不同农家类型的花进行解剖观察比较,发现这 6 种农家栽培类型花的形态一致,其间形态差异主要表现在根、茎、叶 等营养器官上,因此,这 6 个农家类型的形态差异属于种内变异。郑松等31采用植物组织化学方法,对巴戟天花药发育中营养物质的分布和转化特征进行超薄切片显微观察,揭示了巴戟天花药发育中多糖和脂滴的分布特征,为巴戟天生殖生物学特性的研究

51、做出有益尝试,也为高等植物有性生殖过程机理提供新的研究基础。结语结语目前关于巴戟天的研究报道不多,而且使用的是带节茎段作为外植体的快速繁殖体系,在操作中细菌污染率不容易控制;有关巴戟天愈伤组织的分化及植株再生的报道迄今尚未见到。因此,希望建立巴戟天愈伤组织再生体系,利用现代生物技术进一步开展巴戟天品种改良、遗传转化、体细胞融合、种质资源保存、优良种质和突变体筛选等研究,从而促进巴戟天细胞工程、基因工程的研究。其次,通过诱导愈伤组织,再用秋水仙素处理愈伤组织从而诱导分化出巴戟天多倍体,有望提高巴戟天产量和有效成分提取率;同时,应加强巴戟天的规范化种植和生产质量管理以及临床药效研究。 参考文献参考

52、文献1 陈忠,刘琳玲,何猛熊,等. 南药巴戟天多糖提取方法的比较研究J.科技通报,2004,20(6):546-548.2王卫平.巴戟天化学成分和药理作用研究概况J.时珍国医国药,2000,11(7):665-666.3 陈忠,方代南.南药巴戟天化学成分和药理作用的研究进展J.中草药,2001,32(S):217-218.4 陈忠,方代南.南药巴戟天汤液对大鼠免疫功能影响的研究J.科技通报.2003,19(3):244-246.5 陈小娟,李爱华,陈再智.巴戟多糖免疫药理J.实用医学杂志,1995,11(5):348-349.6 林励,徐鸿华,邓沛峰.巴戟天多糖对果蝇性活力及羽化率的影响A.广

53、州中医药大学中药资源研究室.中药资源开发利用研究论文集C.广州:广东科技出版社,1996:65.7 肖凤霞,林励.巴戟天补肾壮阳作用的初步研究J.食品与药品,2006,8(5):45-46.8张有志,等. 巴戟天寡糖对获得性无助抑郁模型大鼠行为的影响J. 中国行为医学科学, 2005,14(4): 309-311.9 何传波,等. 巴戟天水溶性多糖分离纯化的研究J. 云南农业大学报,2006,21(3): 32010 赵诣,等. 巴戟天化学成分研究概况J. 海峡药学, 2007,19(2): 59-60.11 林励,等. 巴戟天挥发性成分的 GC-MS 分析J. 广州中医学院学报, 1992,

54、9(4): 20812 CHEN D L, LI N, LIN L, etal. Confocal mirco-Raman spectroscopic analysis of the antioxidant protectionme chanism of the oligosaccharidesextracted fromMorinda officinalis on human sperm DNAJ. J Ethnopharmacol,2014, 153(1): 119-124.13 CHEN Y G, LIU X H, LI L, etal. Protection effect of an oligosaccharideextracted from radix Morindae officinalis on senile dementia in r

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