丰花月季组培快繁技术研究
丰花月季属蔷薇科蔷薇属多年生草本植物,每年多次开花,花色绚丽多彩,在观赏植物中地位很高,是古今中外文人墨客咏叹的佳作,赢"花中皇后"之美誉。它分布极广,适应性强,栽培容易。目前丰花月季多采用扦插繁殖,但有些名贵品种扦插不易生根,繁殖速度受到很大的限制。采用组织培养技术,成功培育了大量优质丰花月季组培苗,为迅速普及名优新品种起到了重要作用。
材料与方法
材料选取生长健壮的丰花月季当年生枝条,用饱满而未萌发的腋芽茎段作为外植体。
方法将外植体去刺和叶,用洗衣粉溶液浸泡1min,冲洗20min,放到洁净工作台上用70%酒精表面灭菌10s,用无菌水冲洗1遍,再用1%次氯酸钠溶液浸泡5～8min,然后用0.1%升汞溶液浸泡5min左右,无菌蒸馏水冲洗6～8遍。用解剖刀切去茎段两端毒害的部分,然后接种在诱导培养基中。基本培养基为:MS,琼脂0.7%,蔗糖3%,每瓶接种茎段3～4个。
培养条件在光照培养箱内培养,培养温度22～26℃,光照12～14h/d,光照强度1500～2000lx,pH值5.8～6.0。
结果与分析
影响丰花月季诱导丛生芽的因素
腋芽在茎段上的位置对诱导丛生芽的影响。用丰花月季的枝条,均等分为几段带腋芽茎段培养在无激素的MS基本培养基上,20d左右可见接近枝条最顶端和紧挨着枝条基部的芽发育最慢,而枝条中部的芽发育比较快,可见采用中间的茎段诱导芽是最好的。
茎段长度对形成多芽苗的影响。将茎段切成不同的长度接入诱导培养基中,结果表明:茎段长度1～10mm时对形成多芽苗最有效,不但百分率高且每个茎段的侧枝数也较多,切割过短或过长都对芽的诱导不利,芽苗形成较少。
赤霉素的影响。在月季诱导培养中加入0.05mg/L的赤霉素诱导芽较快。
影响丰花月季继代增殖的因素
细胞分裂素6-BA用量。采用不同浓度6-BA芽的数量都增加,从芽的基部可增殖2～6个2～3cm高的芽;丰花月季最适宜的增殖培养基是MS+6-BA2.00mg/L+IBA0.30mg/L,当细胞分裂素6-BA浓度为2.00mg/L时增殖苗最多。
继代培养时间对苗增殖的影响。在MS+BA2.00mg/L+IBA0.30mg/L的培养基上进行继代增殖培养发现:培养0d,增殖苗1个;培养13d,增殖苗2个;培养28和36d,增殖苗均5个,表明丰花月季以28d继代1次最好,28d以上继代1次的苗数不再增加。
影响丰花月季生根的因素
不同浓度MS无机盐对丰花月季生根培养的影响。试验中采用MS、1/2MS、1/4MS3种无机盐,不加生长素或加入低浓度的生长素均可促进苗生根。其中MS无机盐的生根率为35%,1/2MS无机盐的生根率为90%,1/4MS无机盐的生根率为99%,以1/4MS无机盐生根最好。
生长素种类及浓度对丰花月季生根的影响。用NAA、IAA和IBA3种生长素的不同浓度进行生根试验,结果表明:在生长素NAA0.03和0.10mg/L培养4～7d,长出数条白根,根壮且苗长势好;在生长素IAA3.00mg/L时先产生愈伤组织然后才生根,生根率不高。采用生长素NAA生根效果最好。
活性炭对丰花月季生根的影响。由于木本植物丰花月季在生根培养时易产生褐变问题,因此在生根培养中加入适量的活性炭生根效果会较好,0.1%～0.5%的活性炭对酚类物质有吸附作用,可以减少褐变的产生。
生根移栽
将准备移栽的组培取出苗并洗去根部残留的培养基,然后将苗移栽到准备好的基质中,及时浇水,基质为锯末和泥沙(1∶2)。在合理的管理条件下,组培苗可直接移植到田间土壤中。
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