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哈兽研研究表明非瘟Ⅰ型病毒具有高效传播性且可引起慢性感染

非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒引起的高度传染性猪病,给全国养猪业带来巨大的威胁,基因Ⅱ型非瘟在2018进入国内,随后基因Ⅰ型非瘟也在国内有检出的报道。

来自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的孙恩成博士等,在2021年首次报道了非洲猪瘟Ⅰ型病毒在国内的检出情况,同时对基因Ⅰ型毒株毒力、临床症状等进行了一系列有价值的研究。

面对目前弱毒株的持续流行及对防控的新挑战,冠牧精准诊断再次回顾这篇文章,希望能为广大养殖朋友提供帮助。

一、基因Ⅰ型非洲猪瘟病毒基因组分析

研究人员从山东、河南的两个养殖场里分离鉴定了两株基因Ⅰ型的非洲猪瘟病毒(分别命名为SD/DY-I/21、HeN/ZZ-PI/21),通过基于全基因组序列的系统发育树分析表明,这两株毒株与葡萄牙早期分离的基因Ⅰ型非洲猪瘟高度相似(NH/P68分离于1968年,OURT88/3分离于1988年),但国内的HeN/ZZ-P1/21和SD/DY-I/21与葡萄牙的NH/P68和0URT88/3在全基因组的核苷酸突变、缺失、插入和短片段替换方面表现出很大的遗传差异,且HeN/ZZ-PI/21和SD/DY-I/21基因组间也有较大的差异,暗示可能是两个独立的事件导致了这些基因Ⅰ型ASFV在中国出现。

图1 SD/DY-I/21和HeN/ZZ-P1/21系统发育树分析及与欧洲、非洲早期基因I型分离株的比较分析

二、非瘟基因Ⅰ型毒株SD/DY-I/21的临床症状

为了确定中国分离的基因Ⅰ型ASFV的毒力,通过肌肉注射方式分别用10³TCID50和106TCID50剂量接种SPF猪,观察接种猪的发病症状。结果表明,SD/DY-I/21主要引起猪慢性病症状。

表1 基因I型分离株SD/DY-I/21人工感染猪及其同居猪临床症状

注:a 无疾病征兆;b 感染后存活下来

接种10³TCID50剂量组中,只有1只接种猪死亡,其他的从第13天开始出现了皮肤丘疹、关节炎等不同慢性病症状。所有猪均在第28天被安乐死。

接种106TCID50剂量组中,所有猪均存活,其他的从第11天开始出现了皮肤丘疹、关节炎、跛行和局部性皮肤坏死等不同慢性病症状。

图2 基因I型分离株SD/DY-I/21人工感染SPF猪皮肤丘疹(A和B)、皮肤坏死(B和C)及关节炎(B和D)

三、非瘟基因Ⅰ型毒株SD/DY-I/21在猪体内的复制与排毒

每隔一天收集猪的口腔和直肠拭子以及血液样本,通过qPCR检测病毒DNA。

图3 103TCID50和106TCID50接种猪以及同居猪不同天数血液、直肠拭子、口腔拭子中p72病毒DNA量

一般来说,口腔拭子比直肠拭子检测到的病毒会更早、更多。

在本次的研究中,非洲猪瘟基因Ⅰ型SD/DY-I/21同居猪的血液样本的检出时间较口腔、直肠拭子明显偏晚。

表2 最早检出病毒DNA天数汇总

冠牧观点

1、经过长期的临床实践,大家对于非瘟强毒株的防控已经有了一套行之有效的方案。但对于新出现的变异弱毒株,之前的方案受到了挑战,亟需新的措施来应对变化。

2、非洲猪瘟基因Ⅰ型毒株致死率低、病程缓慢、临床表现多样且隐蔽,可引起慢性感染发病,同时也具有较强的水平传播能力。

3、早期诊断与预警是避免损失或避免扩大损失的有效方式。

4、筛查出非瘟阳性后,需及时进行非瘟Ⅰ型、Ⅱ型荧光定量PCR分型鉴定,一旦确定为Ⅰ型毒株,需加大排查范围,了解栋舍感染面,并按照非瘟弱毒株处置办法,评估是否进行定点拔除或整栋清除。

5、荧光定量PCR检测作为一项系统性工作,需要从样本采集处理、核酸提取纯化、PCR扩增检测各个环节把控质量,避免因“短板”效应而使检测结果可信度大打折扣。

公司简介:

冠牧精准诊断(湖南冠牧生物科技有限公司)聚焦于动物体外诊断试剂和设备领域,提供精准的动物疫病诊断试剂和设备,公司开发了猪病、禽病、反刍动物、水生动物荧光PCR试剂和抗体检测试剂,搭配配套的荧光定量PCR仪、核酸自动提取仪、酶标仪等设备,能够精准的诊断动物传染病,指导疫病防控。

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