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黄虾花的繁殖方法

花匠小妙招
2025-07-28 00:40

专利名称：黄虾花的繁殖方法
技术领域：
本发明涉及一种植物组织培养方法，具体地讲，是指一种采用组织培养技术对黄虾花离体培养进行快速繁殖的方法。
背景技术：
植物组织培养是指用植物的任何器官、组织或细胞，在人工控制条件下进行无菌培养生长发育的过程。该技术取材少，培养植物材料成本低，生长周期短，管理方便。利用植物组织培养这种快速繁殖技术，能在短时间内繁衍出大量保持母本生物特性和遗传性状的植株。据了解，我国快速繁殖的植物已有近千种。通常使用的基本培养基有数种，如MS、B5、White、N6等。在组织培养中，植物外植体要在植物生长物质的作用下，经过诱导脱分化、恢复细胞分裂的能力、影响再分化、促进器官形成等过程。植物外植体繁殖系数的大小，直接影响着生产后代植株的数量和质量。
黄虾花(Pachystachys lutea/Calliaspidia guttata)，别名金苞花、虾衣花，是爵床科厚穗爵床属多年生小灌木。原产地热带美洲、墨西哥和秘鲁，花期长，花型美，适合花坛、盆栽、庭院观赏，具有很高的观赏价值。
黄虾花的繁殖主要靠扦插繁殖，但自然繁殖易受季节、环境条件等限制。通过组织培养可以达到短时间内快速繁殖的目的，提高产量，并且可以克服季节、环境对繁殖的影响。用组织培养技术进行规模化微繁殖，是获得大量优质种苗的有效途径。针对这样的情况我们旨在利用组织培养方法，通过无性繁殖手段来提高黄虾花的繁殖率，为其周年生产提供技术方案。
目前，有关黄虾花无性繁殖幼苗的组织培养方法在国际上尚未有人报道，国内仅三例报道(1.李文安，张映璜，傅婉华，金苞花茎尖、腋尖的离体培养及快速繁殖，植物生理学通讯，1988(2)55；2.毕可华，金苞花组织培养成苗初报，烟台师范学院学报，1988，4(1)；3.蒋泽平，朱鹿鸣，金苞花茎段的离体培养，江苏林业科技，1991(4)17-19。)但这三例黄是花的培养方法存在一定的缺点第一例的分化率低，繁殖系数不高；第二例只采用MS+3mg/L6-苄基氨基嘌呤(简称6-BA)+0.1mg/L萘乙酸(简称NAA)一种方法来诱导分化芽；第三例所使用激素种类繁多，操作不方便，且分化率、繁殖系数也不高。
(三)发明的内容本发明的目的在于提供一种黄虾花的繁殖方法，它能够明显提高黄虾花的无性繁殖系数，繁殖速度快而且操作简便。
具体地讲，本发明方法包括如下步骤(1)外植体消毒将黄虾花顶芽或侧芽置于体积百分比浓度为65-75％的乙醇中浸泡30-90s(表示“秒”，下同)，质量百分比浓度为0.1％的升汞中灭菌4-12min(表示“分钟”，下同)，再用无菌水冲洗3-6次；(2)无菌苗的获得将消毒后的黄虾花顶芽或侧芽接种到MS培养基中培养15～30天获得无菌苗，培养条件为温度25±2℃，光照强度1500Lux，光照时间12h·d-1(表示“小时/天”，下同)；(3)诱导丛生芽发生将无菌苗的茎尖置于配方为MS+1-3.0mg/L 6-BA+0-0.3mg/L NAA的培养基上培养10～25天获得丛生芽(高度一般为1～2cm)，培养条件同步骤(2)；(4)诱导生根将步骤(3)所得到的丛生芽分切成单株，在1/2MS+0-1mg/L吲哚丁酸(简称IBA)或NAA培养基上培养5～20天得到再生植株，培养条件同步骤(2)。
(5)再生植株移栽将步骤(4)获得的再生植株经炼苗后，移栽入蛭石土或者花卉土中，用自来水或者1/4MS培养液浇灌。
上述方法中，在步骤(3)中，培养基的优选方案是MS+1-3.0mg/L6-BA+0.1-0.3mg/LNAA，最好是MS+2.0mg/L6BA+0.2mg/LNAA。步骤(4)中培养基的优选配方是采用1/2MS+0.5-1mg/LIBA或NAA配方，其中IBA或NAA的浓度最好是0.5mg/L。
本发明具有如下的优点和效果
1.经实验证明，本发明方法步骤(3)中不定芽的诱导率100％，每个外植体都可以分化出多个不定芽，其中以2.0mg/L 6BA+0.2mg/LNAA的培养基中的不定芽最多，每个外植体有7～12个芽，在步骤(4)中，采用IBA、NAA进行诱导，生根率100％，而且长势良好，保证了试管苗不定根质量。与原有的繁殖技术相比，该方法繁殖效率高，周年可以大量生产，克服了常规方法受季节、环境对繁殖的影响。
2.本发明方法无需专有设备，操作简便。
(四)具体的实施方式实施例1(1)外植体的消毒取黄虾花顶芽或侧芽置于65％乙醇中浸泡90s，0.1％升汞中灭菌12min，再用无菌水冲洗6次；(2)无菌苗的获得将已消毒的黄虾花外植体接种到MS培养基上培养30天，获取无菌苗，培养条件为温度25±2℃，光照强度1500Lux，光照时间12h·d-1(表示“小时/天”，下同)；(3)芽的分化一个月后接种到附加有1mg/L6-BA的MS培养基上，培养10天，不定芽分化率为100％，能分化的每个外植体有1～3个不定芽，培养25天，能分化的每个外植体有4个不定芽。
(4)根的形成形成的小苗，转接入附加1.0mg/LIBA的1/2MS培养基上，培养5天时，生根率为75％；培养10天后，生根率为100％，根放射状生出，较粗短，呈浅黄色，培养20天后，诱导根生长变长，苗的生长状况良好。
(5)试管苗移栽在诱导根实验培养20天后，将试管苗炼苗后转入蛭石土，以1/4MS培养液浇灌，15天后苗生长良好，成活率100％。
实施例2其它操作同实施例1，所不同的是步骤(1)中，取黄虾花顶芽或侧芽置于70％乙醇中浸泡60s，0.1％升汞中灭菌8min，再用无菌水冲洗5次；步骤(2)中，培养时间为25天；步骤(3)中，培养基配方为MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA，培养时间为10天，不定芽分化率为100％，每个外植体有2～4个分化芽，培养25天时，每个外植体平均有6个分化芽；步骤(4)中，培养基改为1/2MS+1.0mg/LNAA，培养5天时，生根率为75％；培养10天后，生根率为100％，根放射状生出，较粗短，呈浅黄色，培养20天后，诱导根生长变长，苗的生长状况良好；步骤(5)中，蛭石土改为花卉土，以自来水浇灌，15天后，苗生长良好，成活率为100％。
实施例3其它操作同实施例1，所不同的是步骤(1)中，取黄虾花顶芽或侧芽置于75％乙醇中浸泡30s，0.1％升汞中灭菌4min，再用无菌水冲洗3次；步骤(2)中，培养时间为20天；步骤(3)中，培养基配方为MS+1mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA，培养时间为10天时，不定芽分化率为100％，能分化的每个外植体有3～4个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体有5～7个分化芽；步骤(4)中，培养基改为1/2MS+0.5mg/L NAA，培养5天时，诱导根成放射状生出，生根率为50％，培养10天后，生根率为100％，根放射状生出，较粗短，呈浅黄色；培养20天后，诱导根生长变长，苗的生长状况良好。
实施例4其它操作同实施例1，所不同的是步骤(2)中，培养时间为15天；步骤(3)中，培养基配方为MS+1mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA，培养时间为10天时，不定芽分化率为100％，能分化的每个外植体有3～5个分化芽，培养时间为25天，每个外植体有5～7个分化芽，且部分外植体会有根生成；步骤(4)中，培养基改为1/2MS+0.5mg/LIBA，培养5天时，根成放射状生出，生根率为100％，根较长，且增长状况较好，培养10天后，根长得更长，侧根也较多，培养20天后，根布满瓶底。苗的生长状况良好。
实施例5其它操作同实施例2，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+2mg/L6-BA，培养时间为10天，不定芽分化率为100％，每个外植体有3～5个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的分化芽增至5～7个；步骤(4)中，培养基改为1/2MS，5天时，生根率为50％，10天后生根率为75％，培养20天后，生根率为100％，诱导根较少。苗的生长状况良好。
实施例6其它操作同实施例2，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA，培养时间为10天时，不定芽分化率为100％，每个外植体有4～5个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的分化芽增至6～8个。苗的长势良好。
实施例7其它操作同实施例2，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+2mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA，培养时间为10天时，不定芽分化率为100％，每个外植体有3～5个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的分化芽增至7～12个。苗的长势良好。
实施例8其它操作同实施例3，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+2mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA，培养时间为10天，不定芽分化率为100％，每个外植体有3～4个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的不定芽增至6～8个。苗的长势良好。
实施例9其它操作同实施例3，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+3mg/L 6-BA，培养时间为10天，不定芽分化率为100％，每个外植体有3～4个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的不定芽增至5～7个。苗的长势良好。
实施例10其它操作同实施例1，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA，培养时间为10天，不定芽分化率为100％，每个外植体有3～4个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的不定芽增至4～5个。苗的长势良好。
实施例11其它操作同实施例2，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+3mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA，培养时间为10天，不定芽分化率为100％，每个外植体有4～5个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的不定芽增至5～9个。苗的长势良好。
实施例12其它操作同实施例3，所不同的是步骤(3)中，培养基配方为MS+3mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA，培养时间为10天，不定芽分化率为100％，每个外植体有4～5个分化芽，培养时间为25天时，每个外植体的不定芽增至5～9个。苗的长势良好。
权利要求
1.一种黄虾花的繁殖方法，其特征在于包括如下步骤(1)外植体消毒将黄虾花顶芽或侧芽置于体积百分比浓度为65-75％的乙醇中浸泡30-90s，质量百分比浓度为0.1％的升汞中灭菌4-12min，再用无菌水冲洗3-6次；(2)无菌苗的获得将消毒后的黄虾花顶芽或侧芽接种到MS培养基中培养15～30天获得无菌苗，培养条件为温度25±2℃，光照强度1500Lux，光照时间12h·d-1；(3)诱导丛生芽发生将无菌苗的茎尖置于配方为MS+1-3.0mg/L 6-BA+0-0.3mg/L NAA的培养基上培养10～25天获得丛生芽，培养条件同步骤(2)；(4)诱导生根将步骤(3)所得到的丛生芽分切成单株，在1/2MS+0-1mg/L IBA或NAA的培养基上培养5～20天得到再生植株，培养条件同步骤(2)；(5)再生植株移栽将步骤(4)得到的再生植株炼苗后，移栽入蛭石土或者花卉土中，用自来水或者1/4MS培养液浇灌。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤(3)中，培养基配方为MS+1-3.0mg/L6-BA+0.1-0.3mg/L NAA。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于步骤(3)中培养基的配方为MS+2.0mg/L 6BA+0.2mg/L NAA。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(4)中，培养基的配方为1/2MS+0.5-1mg/L IBA或NAA。
5.如权利要求1或4所述的方法，其特征在于步骤(4)中培养基的配方为1/2MS+0.5mg/L IBA或NAA。
全文摘要
黄虾花的繁殖方法，包括五步骤(1)外植体消毒采用65－75％乙醇和0.1％升汞消毒；(2)无菌苗的获得采用MS培养基，培养15～30天，温度25±2℃，光照强度1500Lux，光照时间12h·d
文档编号A01H4/00GK1748480SQ200510037068
公开日2006年3月22日申请日期2005年9月7日优先权日2005年9月7日
发明者刘吉升, 谭武贤, 陈刚, 李玲申请人:华南师范大学