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一 目录 摘要……………….……………………………………………I 英文摘要…………………..……………………………………Ill 前言……………………..……………………………………..1 l研究的目的意义…………………………………………………..1 2生物遗传多样性研究进展………………………….…………………2 2.1遗传多样性的概念及意义…………………………………………..2 2.2遗传多样性的研究方法…………………….………………………2 2.2.1形态学标记…………………………………………………..2 2.2.2细胞学标记…………………………………………………..3 2.2.3生化标记………………….…………………………………3 2.2.4分子标记…………………..………………………………..4 3牡丹研究进展…………………..………………………………..7 3.1牡丹种质资源研究…………………..…………………………..7 3.i.1野生牡丹种质资源……….……………………………………..7 3.1.2当代牡丹园艺品种种质资源…………..…………………………..8 3.2牡丹遗传多样性及亲缘关系研究…………………………………….10 3.2.1牡丹野生种之间亲缘关系的研究….……………………………….10 3.2.2部分野生种与栽培品种间亲缘关系的研究………….………………..1l 3.2.3牡丹栽培品种问亲缘关系的研究……….………………………….12 3.3牡丹的育种历史、现状和发展……………….……………-.……...12 3.3.1传统育种………………………………….………………..12 3.3.2现代育种………………………………….………………..13 材辩与方法…………………………………..。…………………。16 l材料及处理.…………..….…………………………………….16 1.1材料…………………..………………..…………………..16 1.2材料处理.………………….…………...….………………..16 2实验方法………………...…………..….…………………….16 2.1牡丹基因组DNA的提取及检测………………,.…………………….16 2.1-1主要试剂及其配制….………………………………………….17 2.1.2实验仪器……………………………………………………17 2.1.3 CTAB提取法………………………….…..…………………18 2.1.4牡丹基因组DNA检测…………..………..…...….…………….18 2.2SSR分析………………………………………………….…..18 2.2.1 PCR扩增……………………………………………………18 2.2.2变性聚丙烯酰胺凝胶电泳………………………………………..19 2.2.3田问农艺性状调查……………………………………………..2l 3实验数据处理……………………………………………………23 3.1田间农艺性状…………….…………………………………….23 3.1-l连续性状分级…….………………………………………….23 3.1.2离散型性状分级………………………………………….…..23 3.2SSR数据处理………………………………………………….24 结果与分析……………………………………………………….25 1牡丹F,代农艺性状变异分析………………………………………….25 1.1连续性状频率分布……………………………………………….25 1.2连续性状相关性及主成分分析………………………………………28 1.3离散型性状遗传差异分析………………………………………….29 1.4离散型性状的相关性分析………………………………………….30 I.5表型性状聚类分析………………………………………………35 2SSR分析……….…..…………………………………………..37 2.1牡丹总DNA的提取…...………………………………………….37 2.2PCR检测…………………...……………...…………………38 2.3紫外分光光度计法…..…..…………….……………………….38 2.4SSR引物的筛选…………..….……………….………………..38 2.5聚类分析…………………………….....……………….…..4
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