蝴蝶兰组织培养快繁技术研究
生物技术 北方园艺２０１０（８）：１２２～１２４
蝴蝶兰组织培养快繁技术研究
张
颖１，郭晓东２，王芳１，张楠１
（１．宿迁学院教育系，江苏宿迁，２２３８００；２．哈尔滨工业大学后勤集团，黑龙江哈尔滨１５０００１）
摘要：以蝴蝶兰花梗为初次诱导外植体，对蝴蝶兰的离体繁殖途径进行研究，建立蝴蝶兰植株再生系统。结果表明：初代培养基：ＭＳ＋６一ＢＡ
６
５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３０
ｇ／Ｌ＋琼ｍｇ／Ｌ＋
脂６ｇ／Ｌ的萌芽数最多；增殖培养基：ＭＳ＋６－ＢＡ７ｎａｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ＋琼脂
ｇ／Ｌ＋椰汁２００ｍＬ／Ｌ叶片数和增殖系数最高；生根诱导培养基：改良１／２ＫＣ＋ＩＢＡ
０．５训Ｌ／Ｌ生根效果最好。
关键词：蝴蝶兰；花梗；外源激素；组织培养
１
ＮＡＡ
中图分类号：Ｓ６８２．３０１．３６文献标识码：Ａ文章编号：１００１－－０００９（２０１０）０８－－０１２２－－０３
蝴蝶兰（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓｈｙｂｒｉｄ．）为兰科（Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ）
纸擦干，带入超净工作台，用７５％酒精从一端到另一端擦拭１遍后切成茎段（茎段长度以能够完全浸入消毒液为宜），采用２次消毒处理方法。首先用７５％酒精浸泡
３０
蝴蝶兰属（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ）植物，原产地为热带和亚热带，天然分布于亚洲和大洋洲。至今，全世界发现的野生蝴蝶兰原种有４０多个，分布于亚洲和大洋洲热带和亚热带地区［１］。现市场上销售的蝴蝶兰多为杂交改良后的新品种。蝴蝶兰色彩丰富、形态优美、花期长，被列为高档名贵花卉，有“兰花皇后”的美誉。蝴蝶兰属于单茎性气生兰，极少发育侧枝，形成种子少且困难，不易进行常规繁殖，因此组织培养成为蝴蝶兰高效繁殖的重要手段［２］。该研究以蝴蝶兰花梗为材料进行组织培养，建立了蝴蝶兰植株再生系统，为工厂化育苗提供有效途径。
ｓ，再用０．１％的升汞消毒７ｍｉｎ，无菌水冲洗３次，用
ｍｉｎ，
ｃｒｎ
无菌滤纸吸干水分后再次放人０．１％的升汞消毒７
无菌水冲洗５次，用无菌滤纸吸干水分，切成１．５～２毒液的切口剪去。
长的茎段，每茎段留侧芽或茎节，并将茎段两端接触消１．２．３外植体接种、芽的诱导把灭过菌的已开花花梗外植体按照花梗自然生长方向插入下面配方的培养基中，配方为ＭＳ基本培养基，蔗糖３０ｇ／Ｌ，琼脂６ｇ／Ｌ，附加３个浓度的６－ＢＡ：３、５、７ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ的浓度为
０．３
１材料与方法
１．１试验材料
供试材料为红花系蝴蝶兰，选用２种花梗，已开花花梗（下端带有休眠芽）和花蕊尚未长出但已完全抽出的花梗。１．２试验方法
１．２．１外植体的选择选用２种花梗，已开花花梗（下端带有休眠芽）和花蕊尚未长出但已完全抽出的花梗，培养基为ＭＳ＋６一ＢＡ
３０
５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．３
ｎ培／Ｌ，以不加入６一ＢＡ为对照。每处理１０株，３次
重复，３０ｄ后统计各处理的萌芽率。
１．２．４继代增殖选取长为１ＣｌＴＩ左右，生长状况一致的单芽作为接种材料进行继代培养。每处理１０株，３次重复。生长素选用ＮＡＡ，浓度分别设为：０，０．５、Ｌ
６０
ｏ、１．５
ｒｎｇ／Ｌ；细胞分裂素选用６一ＢＡ，浓度设为：０、５、７、９ｍｇ／Ｌ。
ｄ后统计各侧芽的增殖系数。
１．２．５椰汁添加试验继代增殖中添加椰汁，分别设５个浓度水平：５０、１００、１５０、２００、２５０
１．０
ｍｇ／Ｌ＋蔗糖
ｇ／Ｌ＋琼脂６ｇ／Ｌ，每处理１０株，３次重复，３０ｄ后统
计各处理的萌芽率及长势。
１．２．２外植体处理选择有花梗无病虫害的健壮蝴蝶兰为母株，于温室之中培养。取材前７～８ｄ停止浇水，选取已开花花梗（下端带有休眠芽）和花蕊尚未长出但已完全抽出的花梗，用剪刀从花梗基部切割，将花梗在流水中冲洗３０ｍｉｎ，并不断搅动。将冲洗后的花梗用滤
第一作者简介：张颖（１９８０－），女，黑龙江人，研究方向为植物组织培养。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｉｎ９８０７８１２＠１６３．ＣＯＩＴＩ。
收祷日期：：２００９—１２一０９１２２
ｒ洲Ｌ，以不附加椰汁
为对照。培养基为ＭＳ附加６－ＢＡ７．０叫Ｌ、ＮＡＡ
ｎ影Ｌ、蔗糖３０ｇ／Ｌ、琼脂６ｇ／Ｌ。６０ｄ后观察统计每
Ｉ．２．６生根与练苗当芽长至２．０ＣＩＴｌ左右，２～３片叶
个处理的叶片数、增殖系数。
时，转入生根培养基中，培养基为ＭＳ＋ＩＢＡ
１ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ＋琼脂６ｇ／Ｌ＋椰汁１００ｍＬ／Ｌ＋活性炭２ｇ／Ｌ，ＮＡＡ设３个浓度水平：０．１、０．５、１．０ｍＬ／Ｌ。
６０
ｄ后统计各处理的株平均根数和根长，以此来选择适
宜的激素浓度。
万方数据
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