花叶熊掌木快速繁殖体系研究
江苏农业科学2011年第39卷第2期
邓玉营,周士景.花叶熊掌木快速繁殖体系研究[J].江苏农业科学。20ll,39(2):105一10r7
一105一
花叶熊掌木快速繁殖体系研究
邓玉营1,周士景2
(1.常州工程职业技术学院,江苏常州213164;2.苏州三润景观工程有限公司,江苏苏州215123)
摘要:取花叶熊掌木顶芽或腋芽为外植体材料,经过75%乙醇30s,0.1%HgcI:8rIlin,无菌水冲洗8次消毒;初代培养基:Ms+6一BA
O.3
1.5
mg/L+NAA0.1mg/L;优化的增殖培养基:Ms+6一BA
1.0
1.0
mg/L+KT
0.5
mg/L+I从
mg/L,20d;生根培养基:l/2Ms+NAA
mg/L,pH值6.O~6.5条件下培养,增值系数最高,达到4.1,生根率达
到loo%。将花叶熊掌木试管苗移栽于泥炭与珍珠岩体积比为3:l的基质中,炼苗20d,成活率达80%以上。
关键词:花叶熊掌木;无菌体系;方差分析;快速繁殖中图分类号:S725.704
文献标志码:A
文章编号:1002一1302【2011)02一O105一03
1.2试验方法
1.2.1无菌苗的建立将剥离的芽经流水冲洗,稀释10倍的次氯酸钠溶液浸泡,在超净工作台上用75%乙醇表面消毒
30
花叶熊掌木为五加科熊掌木属常绿性藤蔓植物,由八角金盘(,0£s缸托印,,庇o)与常春藤(胁如mk触)杂交『斫J戎,有一定的耐寒力、极强的耐阴能力,用传统繁殖方式如扦插法只能在春秋季进行繁殖,受季节影响较大。组织培养方法作为一种先进的快繁技术,近几十年在名贵植物中得到了广泛应用,有利于解决花叶熊掌木的繁殖问题“,同时花叶熊掌木性喜温暖,通过组织培养的方式会大大降低繁育成本。本研究通过建立花叶熊掌木组织培养体系,进行花叶熊掌木苗的规模
‘
s,0.1%Hgcl:浸泡消毒8min,无菌水冲洗8次备用。
1.2.2初代培养将芽放在滤纸上切去创伤面,接种于附加
O.5
mg/L6一BA的MS启动培养基上,每瓶接1个芽,建立无
菌培养材料。13d后待新芽长至1.0cm左右,切取并分别接种于MS、wPM和取基本培养基中(表1),建立无菌培养材料。培养基为:基本培养基+6一BA
1.5
化化生产。l材料与方法1.1材料
’
mg/L+NAA
O.1,,∥L+蔗糖30n∥L,琼脂8g/L,调节pH值为6.O~6.5。
每处理接种20个芽,重复2次。培养室温度(25±1)℃,光照强度2
000~2500
l】【,光照时间14
h/d,25
d时观察不同培
挑选健壮、无病害的花叶熊掌木优良单株,取顶芽或腋芽为外植体。
养基上的萌芽率、芽数和芽伸长情况。
1.2.3增殖培养根据资料和初步试验,25d后,切去无菌苗基部褐化面,接种于增殖培养基中,增殖培养基以Ms为基
收稿日期:2010—06一09
基金项目:2008年江苏省大学生实践创新训练计划项目(编号:cx2008一09)。
作者简介:邓玉营(19r78一),男,河南洛阳人,硕士,讲师,主要从事生物工程方面的研究,E—mm:yydeng@email.czie.net。
本培养基,附加6一BA、KT和uA,采用3因素3水平正交设计¨1,共设置9个处理,每个处理重复2次,每重复lO瓶,每瓶接种1个芽,进行增殖培养基激素的优化筛选(表2)。
20
d左右统计增殖系数。
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(上接第104页)
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