专利名称:兰花的培育方法
技术领域:
本发明涉及一种采用生物基因技术产业化培育名贵兰花的方法。
背景技术:
近年来,国家产业政策和行业发展规划花卉良种繁育及储藏列为重点鼓励和扶持发展的高效农业和创汇农业,花卉业进入了快速发展的快车道,但以生物技术为核心的产业化开发还是停留在组织培养这项最下游的应用技术阶段,而以基因工程为主要标志的生物工程开发基本还处于花卉生产中的空白。以蝴蝶兰等高档兰花系列的商业化生产为例,除项目举办单位联系有关科研单位进行了前期的基本研究外,国内只有北京、云南两地蝴蝶兰专业生产公司,但其生物技术的应用仍是空白。
发明内容
本发明利用生物技术,解决了现有名贵兰花普遍共存的花色、花期、花形方面的缺陷,且实现兰花的产业化生产。
本发明的技术方案如下一种兰花的培育方法,它采用如下步骤1)、网络引种;2)、通过生物学特性观察和形态解剖学筛选出特有花种;3)、对原品种和芽变品种进行分子遗传标记育种或者转基因技术育种;A、分子遗传标记育种的步骤为取幼叶——细胞破碎——双步CTAB提取 目标基因——DNA重组——细胞融合——原生质体培养——表型筛选B、转基因技术育种的步骤为取幼叶——细胞破碎——核酸纯化——核酸 ——导入感受细胞——原生质体培养——表型选择4)、种子苗生产;5)、组培苗生产;6)、成花生产。
采用如上技术方案,选择适合气候条件的花卉品种如蝴蝶兰,卡特利亚兰、文心兰等,通过高新生物技术手段的运用,逐步实现传统大农业的生物技术革命,真正实现农业结构的战略性调整,促进农业结构优化、产业升级。
具体实施例方式
利用国际国内间建立的良种交换网络引种,根据分布情况,有目的地进行引种,广泛收集国内外种质资源;在建立专类收集中心的基础上,对各引种材料播种、发芽、出苗、开花、结实进行系统记载,了解各引种材料在本地的生产发育情况,同时对引种材料中分类上易混淆的种进行形态解剖学研究,筛选出特有种随机采种,分别直播,取幼叶进行分子遗传标记育种或进行转基因技术育种。
A、分子遗传标记育种的步骤为取幼叶——细胞破碎——双步CTAB提取 寻找目标基因——DNA重组——细胞融合——原生质体培养——表型筛选B、转基因技术育种的步骤为取幼叶——细胞破碎——核酸纯化——核酸 ——导入感受细胞——原生质体培养——表型选择细胞破碎用反复冻融法,并加入DFP、PMSF及碘乙酸,电泳缓冲液为0.5TBE,核酸纯化在12000g室温离心15秒,并加入链霉蛋白及蛋白酶K,浓缩采用乙醇沉淀法,DNA定量用紫外分光光度法,原生质体培养采用浅层液体培养,用KM8P培养基。
种子苗生产采用杂交授粉,在植株授粉后,取出胚胎,在培养基内接种后发芽。利用试管培育技术,短时间内获得大量杂交苗,经过几代纯化,每株有些微差异。该工艺的优点是一般品种授粉后,一个果荚含有约几万个种子,播种后可在短时间内获得大量小苗。
组培苗生产确定选育的系列优良品种,采用茎尖和茎节外植体诱芽培养以及叶片愈伤组织诱导培养三种途径。
成花生产对种子苗或组培苗进行炼苗,然后上盆,再进行分盆,经催长后即进行成花期。小苗栽植采用无土栽培,苗在生长过程中通过喷营养液于叶片,供其生产所需养份,苗在培育过程中对光、温、水进行控制。
权利要求
1.一种兰花的培育方法,它采用如下步骤1)、网络引种;2)、通过生物学特性观察和形态解剖学筛选出特有花种;3)、对原品种和芽变品种进行分子遗传标记育种或者转基因技术育种;A、分子遗传标记育种的步骤为取幼叶——细胞破碎——双步CTAB —寻找目标基因——DNA重组——细胞融合——原生质体培养——表型筛选B、转基因技术育种的步骤为取幼叶——细胞破碎——核酸纯化—— 分子克隆——导入感受细胞——原生质体培养——表型选择4)、种子苗生产;5)、组培苗生产;6)、成花生产。
全文摘要
本发明公开了一种采用生物基因技术产业化培育名贵兰花的方法。它采用如下生产步骤1)、网络引种;2)、通过生物学特性观察和形态解剖学筛选出特有花种;3)、对原品种和芽变品种进行分子遗传标记育种或者转基因技术育种;4)、种子苗生产;5)、组培苗生产;6)、成花生产。本发明利用生物技术,解决了现有名贵兰花普遍共存的花色、花期、花形方面的缺陷,且能实现兰花的产业化生产。
文档编号C12N15/05GK1414097SQ0113408
公开日2003年4月30日 申请日期2001年10月26日 优先权日2001年10月26日
发明者蔡汝 申请人:蔡汝
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