梅花鹿保护遗传学研究.pdf 全文
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是华： 梅花鹿保护遗传学研究 内容提要 梅花鹿(如，Ⅲs门』印伽)是我国极度濒危的鹿科动物，仅分布于黑龙江、吉 林、四川、甘肃、江西、浙江和安徽7省狭窄的区域内。为了制定有效的保护策 略，本文利用线粒体DNA、微卫星和MHC基因作为分子标记，对我国梅花鹿的保 护遗传学进行了系统的研究，得到以下研究结果： 1．线粒体DNA控制区序列变异分析表明，在我国梅花鹿现存的4个种群中，浙江 梅花鹿具有最高的遗传多样性，表现在碱基差异数(卜2i个)、核苷酸歧异度 (0．卜1．6％)和核苷酸多样性(Ⅱ=O．004)，而东北梅花鹿次之，江西梅花 鹿位居第三，四川梅花鹿最低。 2．从22对牛、羊和白尾鹿的微卫星引物中，本文筛选出了16对能稳定扩增我国 梅花鹿所有样品的多态性引物。用这16对引物的分析结果表明，浙江梅花鹿 具有最高的期望杂合度(‰=O．589)，也即浙江梅花鹿的遗传多样性最丰富， 而江西梅花鹿和东北梅花鹿次之，四川梅花鹿最低。同时，还发现东北梅花鹿 和浙江梅花鹿分别具有6个和5个特有等位基因。 3．利用文献上和重新设计的引物，本文成功扩增到了MHCI类基因的外显子2 和外显子3区域，并成功确定了A、B和c 3个基因座位。在A、B和C基因 座位的外显子2区域，分别发现并命名了62个、36个和39个新的等位基因。 在A、B和C基因座位的外显子3区域，分别发现并命名了25个、18个和28 个新的等位基因。在这些新命名的等位基因中，浙江梅花鹿在B基因座位的外 显子2和外显子3，具有最多的等位基因数量(15个、9个)，而东北梅花鹿 次之，四川梅花鹿居第三，江西梅花鹿最少。而在A和c两个基因座位的外显 子2和外显子3区域，东北梅花鹿具有最多的等位基因数量(24个、19个： 12个、14个)，而浙江梅花鹿次之，四川梅花鹿居第三，江西梅梅花鹿最少。 4．利用文献上的引物，本文成功扩增到了MHC II类基因DRB座位的外显子2区 域，并发现和命名了29个新的等位基因。在这些新的等位基因中，浙江梅花 鹿具有最多的等位基因数量(17个)，而东北梅花鹿次之，四川梅花鹿居第三， 江西梅花鹿最少。 j．利用文献上的引物，本文成功扩增到了MHCII类基因DQB座位的外显子2区 域，并发现和命名了23个新的等位基因。在这些新的等位基因中，浙江梅花 吴华： 梅花鹿保护遗传学研究 鹿具有最多的等位基因数量(14个)，而东北梅花鹿次之，四川梅花鹿居第三， 江西梅花鹿最少。 6．利用文献上的引物，本文成功扩增到了|ⅥHC II类基因DQAl座位的外显子2 区域，并发现和命名了12个新的等位基因。在这些新的等位基因中，浙江梅 花鹿和东北梅花鹿具有最多的等位基因数量(4个)，而四川梅花鹿和江西梅 花鹿次之。 7．利用文献上的引物，本文成功扩增到了MHc II类基因DQA2座位的外显子2 区域，并发现和命名了16个新的等位基因。在这些新的等位基因中，浙江梅 花鹿具有最多的等位基因数量(7个)，而东北梅花鹿次之，四川梅花鹿居第 三，江西梅花鹿最少。 8．在MHC I类基因的A、B、C座位和MHCII类基因的DRB、DQB座位，抗原结合 位点的异义突变要明显多于同义突变。这表明，平衡选择在维持梅花鹿MHC 基因多态性中起着重要的作用。 9．线粒体DNA控制区序列变异分析表明，我国梅花鹿现有两个单系，即单系I： 浙江梅花鹿和单系II：东北一四川一江西梅花鹿。浙江梅花鹿与东北、四川和 江西梅花鹿3个种群之间的遗传分化显著，没有基因流存在。而在单系II中， 东北、四川和江西梅花鹿3个种群之间，存在着丰富的基因流。 10．微卫星和MHc基因多态性分析表明，浙江、东北、四川和江西梅花赓4个种群 之间的遗传分化都达到极显著水平。传统分类上属于同一亚种的浙江和江西梅 花鹿之间，已发
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