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野生松乳菇菌丝在不同培养基上的分离试验的论文.doc

花匠小妙招
2025-10-13 07:39

　　野生松乳菇菌丝在不同培养基上的分离试验的论文摘要以野生松乳菇的子实体作为分离材料,取子实体的柄基进行组织分离,分别接入不同配方的培养基上进行培养试验,结果表明,葡萄糖20g、酵母1g、mgso4·7h2o 0.5g、琼脂20g、松根液100ml(100g松根+500ml水煮沸过滤)、腐殖土水100ml(100g腐殖土+500ml水煮沸过滤),加水至1 000ml的培养基上菌丝生长最好。　　关键词松乳菇;培养基;菌丝生长　　松乳菇(lactarius deliciosus),别名松菇,其质脆味美,营养丰富,深受人们喜爱,每年5~6月和10~11月有松乳菇上市,商品价值较高。近年来,野生松乳菇产量逐年下降,人工开发已成发展趋势[1-6]。通过对野生松乳菇子实体进行分离,筛选出适合菌丝生长的培养基,以期为开发利用松乳菇奠定基础。　　　　1材料与方法　　　　1.1试验材料　　野生菌株采自江西省吉安县凤凰镇松树林中,采摘朵形正常、生长健壮、内菌幕刚破、无虫害、成熟的新鲜子实体。　　1.2试验方法　　1.2.1母种培养基的配制。配方:①葡萄糖20g,酵母1g,mgso4·7h2o 0.5g,琼脂20g,松根液100ml(100g松根+500 ml水煮沸过滤),腐殖土水100ml(100g腐殖土+500ml水煮沸过滤),水加至1 000ml。②腐殖土液200ml(200g腐殖土+1 000ml水煮沸过滤);青松针液200ml(300g青松针+1 000ml水煮沸过滤),松根液200ml(300g松根+1 000ml水者沸过滤);啤酒糟200ml(200g干啤酒糟+1 000ml水煮沸过滤);叶酸0.01g;琼脂20g;水加至1 000ml。.③除未加入叶酸0.01g,其他配方同②。④去皮马铃薯200g(切薄片加水1 000ml煮沸过滤),葡萄糖20g,琼脂20g,水加至1 000ml。将以上4种配方分别装入15mm试管,每支10ml,每组100支,于121℃下灭菌30min,冷却做成斜面培养基。　　1.2.2组织分离。将子实体反复冲洗干净,取柄基用酒精处理表面,在无菌条件下取中间部分切成小薄片,用接种针接入不同的培养基斜面上,每个处理接种30支试管。将接好种的试管置入人工气候箱内,在恒温25℃下进行培养,3d后观察菌丝萌发生长情况,每天检查1次,将污染的试管拣出。　　1.2.3孢子分离。将一菌盖厚实、菌柄粗壮、外观光洁、无病虫危害的野生松乳菇切除柄基,反复冲洗,用干纱布吸去表面水分后,喷洒75%酒精进行消毒,再用自来水反复冲洗,用纱布擦干,放在消好毒的玻???钟罩内进行孢子收集。获得孢子后,用蒸馏水稀释,用滴管接入不同的培养基斜面上,每个处理接种30支试管。将接好种的试管置入人工气候箱内,在恒温25℃下进行培养,3d后观察菌丝萌发生长情况,每天检查1次。　　1.2.4原母种扩大再生母种。将分离获得的纯菌丝体分别接入上述培养基斜面上,每种培养基各接10支试管,置于25℃下培养,3d后每天观察1次。　　2结果与分析　　　　2.1不同培养基的分离效果　　组织分离除培养基③、④外,培养基①、②均获得了菌丝纯培养物,但在不同的培养基上组织分离的成功率不一致。菌丝长势因培养基不同而异,培养基①菌丝浅灰色,浓密,绒毛状生长;培养基②菌丝浅灰色,较疏,匍匐生长。孢子分离因污染未获成功。培养①比较适合用于松乳菇组织分离,分离的菌丝较粗而浓密,成功率为40%;培养基②上菌丝分离成功率高达60%,但菌丝体纤细而稀疏(见表1)。　　2.2母种转接培养观察　　接入培养基①、②、③、④上的菌丝体均能生长。以培养基①、④上的菌丝生长较好,菌丝体呈浅灰白色,较粗而浓密,放射型绒毛生长;培养基③上的菌丝体长到第4天全部停止生长,未长满斜面;培养基②上的菌丝体生长速度快,比①、④培养基提早1.5d长满斜面,但菌丝体稀而细。　　　　3结论　　　　试验结果表明,葡萄糖20g、酵母1g、mgso4·7h2o 0.5g、琼脂20g、松根液100ml(100g松根+500ml水煮沸过滤)、腐殖土水100ml(100g腐殖土+500ml水煮沸过滤),水加至1 000ml的培养基上松乳菇菌丝生长最好。　　　　4