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实验五减数分裂

花匠小妙招
2025-10-20 23:29

一、实验目的
1. 了解高等植物小孢子母细胞减数分裂的过程，观察减数分裂中染色体的动态变化；
2. 学习并掌握植物细胞减数分裂染色体标本的制作方法
二、实验原理
在植物的花粉形成过程中，花药内的一些细胞分化为小孢子母细胞（2n），每个小孢子母细胞经减数分裂产生4个小孢子（n）。
在适当的时期采集植物的花药，经固定、染色、压片等操作程序后，就可以在显微镜下看到细胞减数分裂过程中染色体的动态变化。
　三、实验材料
玉米2n=20、水稻2n=24、小麦2n=42等作物的花药，任选一种。
四、用具及药品
　镊子、解剖针、载片、盖片、大培养皿、染缸、酒精灯、吸水纸、显微镜等。
　无水乙醇、冰乙酸、醋酸洋红、改良品红。
五、实验步骤
1. 取材
选取适当时期的花药，是观察花粉母细胞减数分裂的关键步骤。通常可根据植物个体发育时器官的形态特征来判断花粉母细胞的减数分裂期。玉米的雄蕊在花粉成熟前约二星期还未从剑叶中抽出时，隔叶摸上去感到既不太硬，又不太软，此时花药白色，长度约为成熟花粉的一半，是观察减数分裂的最佳时期。
水稻可用孕穗期时叶环间距离为指标，当剑叶从茎顶部叶鞘中抽出时，剑叶的叶环仍在下一叶的叶环之下，为负数，反之为正数，两叶的叶环相平时为零。叶环间距为－10cm至－8cm时，小穗顶部颖花处于减数分裂期；叶环间距为－3cm至0时，全穗处于减数分裂期；叶环间距为9cm~10cm时，则处于减数分裂终期。
花药的颜色也可作为判断花粉母细胞减数分裂的指标，一般以花药呈绿色为好，浅绿或半透明为时过早，黄绿或黄色则为时太晚。
取材一般在上午7时-10时进行。玉米、水稻等取花穗的一部分。
2. 固定
通常取幼小花药压片时，可以直接放在醋酸洋红中，固定，染色同时进行，但先固定后的材料，更易于染色和保存。一般材料可用卡诺氏固定液固定4~24小时，然后用90%乙醇冲洗2~3次，最后在70%乙醇中保存备用，大的花蕾可先剥去花冠，再固定。
3. 染色
取固定好的花药或颖花放在载片的一侧，用吸水纸吸去多余的固定液，用小摄子或解剖针取出雄蕊，放在载片中央的染液中，撕开花药壁，并用解剖针轻压几下，把花粉母细胞从花药中挤压出，除去花药壁和残渣，搅和一下，让花粉母细胞和染液充分混合，静置染色5min~10mim，将载片在酒精灯上过几下稍加热。
4. 压片
加盖片，使染液刚好布满载盖片之间成一薄层，染液不可过多，否则花粉母细胞逸出盖片之外，在盖片上覆盖双层吸水纸，用拇指均匀压下，勿使盖片移动。
5. 镜检
先用低倍镜观察，找到一个好的分裂相时再转用高倍镜观察。要求能够将减数分裂的各个时期分辨清楚，特别是对前期Ⅰ的各时期能够独立辨认。