
2011年 5月
M ay. 2011
华南师范大学学报 (自然科学版 )
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(NA TURAL SC IEN CE ED IT ION )
2011年第 2期
N o. 2, 2011
收稿日期: 2010- 11- 09
基金项目: 国家自然科学基金 - 广东省联合基金项目 ( u0731006) , 广东省博士启动基金项目 ( 10451063101005250), 广东省植物发育重点实验
室开放基金项目
* 通讯作者, hql@i scnu. edu. cn
文章编号: 1000- 5463( 2011) 02- 0113- 06
基于金钗石斛 EST 的短串联重复序列的挖掘
梁 山, 陈莉莉, 李洪清
*
(广东省植物发育工程重点实验室, 华南师范大学生命科学学院, 广东广州 510631 )
摘要: 利用计算机程序搜索了金钗石斛 EST 上的短串 联重复位点, 共获得 2 122个基序 长度 2~ 7 bp, STR 长 度不小
于 12 bp且重复次 数不小于 3的 STR 位点. 其中, 3 bp- STR 最为丰富, 而 2 bp和 6 bp基 序的 STR 位点在 可表达基
因中富集. 金钗石斛基因组 存在 439 个 基因 特异 分 布的 STR 位 点, 暗 示这 些 STR 位 点可 能与 特 定的 功能 基 因共
进化.
关键词: 金钗石斛; 短串 联重复; 表达序列标签
中图分类号: Q 785 文献标志码: A
短串联重复序列 ( STR ), 也称微卫星 ( m icrosatl
lite) , 或 S im ple Sequence R epeat( SSR ), 是由长度为
1~ 6bp的基序头尾相接形成的串联重复序列, 多数
重复 10~ 100次. STR 广泛分布于基因组中, 多见于
非编码区域, 也有分布于具有编码意义的外显子区
域. EST - STR 就是在编码序列中的 STR 分子标记.
与基因组 STR相比, EST - STR 与功能基因连锁, 其
多态性可能反应基因功能的变异和进化. H FTE 等
提出, 通过 EST 发掘拟南芥的分子标记有助于候选
基因的突变体构建和图位克隆
[ 1]
. 然而大多数的非
模式物种与拟南芥不同, 其研究由于基因组数据的
缺失和遗传操作的困难而面临 困境. 近几年, 利用
EST 数据快速发掘分子标记成为了基因组研究的重
要手段之一. EST - STR 作为有效的分子标记已被
用于非模式物种的基因组
[ 2- 3]
、遗传多样性
[ 4- 5 ]
和
基因功能的研究
[ 6- 7]
.
金钗石斛 (D endrobium nobile)属兰科石斛属, 是
多年生单子叶植物, 常用于药用, 也是深受喜爱的观
赏花卉. 目前, 对金钗石斛的研究主要集中在药用成
分的分离和药效药理研究
[ 8 ]
、与近缘种属的遗传多
样性等
[ 9]
, 也有调查石斛属物种的染色体数目和类
型的报道
[ 10- 11]
. 鲜有对金钗石斛基因和基因组的研
究. 本研究利用生物信息学手段, 对前期工作获得的
金钗石斛 EST 数据进行挖掘, 搜索 STR /STR 位点,
为进一步为研究金钗石斛和近缘种属的基因组提供
基础.
1 材料和方法
1. 1 EST数据源
EST 序列数据为本室通过前期研究收集获得,
一共包括 13 098条 EST 序列 (未发表数据 ).
1. 2 STR的搜索
将 EST序列以 FA STA 格式保存于同一个文件
中, 利用 STR F inder
[ 12]
搜索序列长度大于或等于
12bp的短串联 重复序 列 ( S im ple Sequence Repea,t
STR). 设置参数为: Percentage cuto ff= 100, M in. base
length= 12, M ax. m otif size= 7, 即搜索重复基序长度
小于或等于 7 bp, 且 STR 长度不小于 12 bp的完全
匹配的 STR位点.
2 结果与分析
2. 1 金钗石斛中 EST- STR的主要类型和特征
利用 STR F inder
[ 12]
, 依据 2 个标准, 本研究对
13 098个金钗石斛 EST C luster的一致 ( consensus)
序列上基序长 度为 2 ~ 7bp的 STR 位点进行了搜
索. 根据筛选标准 1( STR长度 12 bp, 重复次数
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