长筒花叶片离体培养研究
长筒花叶片离体培养研究
影响因素[J].分子植物育种,2018,16(12):4016-4022.
[12]赵天榜,陈占宽.石斛组织培养与栽培技术的研究[J].河南农业大学学报,1994,28(02):128-133.
[13]秦廷豪.铁皮石斛的组织培养与快速繁殖[J].热带农业科学,2008,28(01):25-29.
[14]詹忠根,徐程,张铭,等.铁皮石斛离体根尖经体细胞胚再生植株研究[J].浙江大学学报:农业与生命科学版,2005,31(05):579-580.
[15]付传明,冼康华,苏江,等.植物激素和接种方式对广西金线莲壮苗生根的影响[J].广西植物,2019,39(12):1628-1635.
[16]黎建玲,黄肇宇,詹源庆,等.金钗石斛试管苗生根研究[J].广西科学院学报,2006(02):87-89.
长筒花叶片离体培养研究
邓彦
（贵州省林业调查规划院，
贵州贵阳550001）
摘要：为建立长筒花的叶片离体培养体系，以苦苣苔科长筒花属长筒花品种‘kim blue ’的叶片作为外植体，
探索培养过程中各个可能影响培养结果的因素，包括灭菌时长的不同组合、灭菌方法，各培养阶段的激素种类及其配比，进而筛选出影响因素的最佳值。结果显示，叶片外植体最适的灭菌组合和方法为75%酒精消毒15s+2%次氯酸钠7min ；最佳的启动培养基配方为：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L ；最佳的增殖培养基配方为：MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L ；最佳的壮苗培养基配方为：1/2MS+I-BA 0.1mg/L+NAA0.1mg/L+CCC 0.5mg/L 。关键词：长筒花；组织培养；诱导培养；壮苗培养
灭菌完毕的叶片在无菌条件下切成约1cm ×1cm 方块，接种于培养基中。每个组合接种6瓶，每瓶放置5块叶片，重复3次。1个月后统计叶片的污染率和死亡率。
1.2.2启动培养。将长筒花‘kim blue ’叶片切成1cm ×1cm 的方块，叶背朝下接入MS 培养基，每瓶接种1块
叶片。设置不同激素水平（见表1），将6-BA 、NAA 添加到培养基中[11-12]，采取二因素三水平完全随机试验设计，每个处理接30瓶，重复3次。接种45d 后统计诱导率，取3次重复平均值记录结果，并记录生长情况，分析不同激素浓度对叶片的启动诱导培养的影响。
长筒花（是苦苣苔科长筒花属的多年生草本植物，花腋出，花冠筒状，花径3~8cm ，花色有白、粉红、紫、深红、蓝、橘、黄色等[1-2]。目前苦苣苔科植物非洲紫罗兰[3-5]、大岩桐[6-10]等组织培养技术领域的研究已经逐渐趋于完善，而关于长筒花的报道则鲜少见到。本试验通过长筒花叶片离体培养，探究各因素在长筒花的组织培养不同阶段中所产生的作用，并得出各因素的最适水平，进而建立起长筒花的叶片离体培养体系，以利于实现长筒花高品质国产化，以及组培
苗的大规模工厂化生产，也为长筒花的分子生物学、细
胞学特性研究和基因工程中遗传受体系统的建立奠定理论基础。
1材料与方法
1.1材料
试验所用材料为苦苣苔科长筒花属长筒花，品种名为‘kim blue ’。1.2方法
1.2.1筛选最适灭菌组合。取‘kim blue ’叶片，清洗干净后用流水冲洗1h ，然后在超净工作台内用不同灭菌组合进行灭菌试验。共设置4个灭菌组合，A 1：75%酒精消毒30s ，无菌水冲洗2遍，2%次氯酸钠消毒5min ，无菌水冲洗4遍；A 2：75%酒精消毒30s ，无菌水冲洗2遍，2%次氯酸钠消毒7min ，无菌水冲洗4遍；A 3：75%酒精消毒30s ，无菌水冲洗2遍，2%次氯酸钠消毒10min ，无菌水冲洗4遍；A 4：75%酒精消毒15s ，无菌水冲洗2遍，2%次氯酸钠消毒7min ，无菌水冲洗4遍。将
10.50.12 1.00.33
1.5
0.5
表1长筒花‘kim blue ’启动培养基激素配方
水平6-BA （mg/L ）
NAA （mg/L ）
10.50.12 1.300.33
1.5
0.5
表2长筒花‘kim blue ’增殖培养基激素配方
水平6-BA （mg/L ）
NAA （mg/L ）
1.2.3增殖培养。将启动诱导培养得到的无菌幼苗用高
温灭菌的接种工具（剪刀、
镊子、解剖刀）分割成独立单株，或将长高的植株分切成至少带有1个腋芽的节段，接入MS 培养基进行增殖扩繁培养，每瓶接入2~3个独立单芽。设置不同6-BA 、NAA [13-14]激素水平（表2），
采取二因素三水平完全随机试验设计，
每个处理接20瓶，重复3次。接种后观察并记录生长状况及增殖情况，30d 后统计增殖系数，取3次重复平均值记录结果，分析不同水平激素对叶片的增殖培养的情况。
1.2.4壮苗培养。不定芽在进行增殖培养后，需要进行
壮苗培养才能达到更好的效果。
以MS 为基本培养基，将生长较好的芽分成单株培养，一些尚未成形的芽分成几个芽丛培养，分别添加不同浓度的6-BA （0mg/L 、0.2mg/L 、0.5mg/L ）、NAA （0.1mg/L 、0.3mg/L 、
0.5
现代园艺2025年第1期
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