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分子标记在植物遗传育种中的应用

分子标记及其在植物遗传育种中的应用遗传标记(geneticmarker)具有多型性易于鉴别与目标基因紧密连锁

性状标记

色泽,形态…

细胞学标记

倒位,易位,G/N/C带…

生化标记

同功酶…

分子标记RFLP、RAPD、SSR、AFLP、SNP……基础-基因表达结果表现型DNA碱基序列变异形态标记遗传学上稳定、可见的外部特征---遗传与环境、结构基因与调控基因综合作用的结果。如穗形、芒长、穗长、粒色、穗形、矮秆、卷叶等。特点:直观简单从基因型到表现型存在基因表达、调控、个体发育等环节,表型差异有时难以反映基因型差异。细搅胞那学志标健记染奇色创体劫数芒目掠变仆异精及角结掌构云变帽异企,岔表涌现惨在刷染油色柄体你核衫型晕(秤数旨目肃、思大告小庄、绒随还体宇、狠着梢丝谎点转位令置公等妙)粱和温带烧型鸭(C带兵、N带凶、G带袜等稻)衰。随投着馋分毙带遭、作细码胞菊原壁位定杂价交捉等巨研佣究西技储术裹的甚发伴展斗,桶可皱在遍染销色盈体败水旋平悄揭酒示击更环多阀遗罚传姓变殃异伪。特镰点戚:繁直砌观驻、败快惑速筑而马经笔济恶,罩但盆变缘瑞异惑十棵分碗有搏限拍,额当本染售色币体闭数巾目茂形获态慎相番似井时悦难姿以纪分林辨倦。生跌化束标症记—乡丰—芽贮考藏开蛋货白弓和辰同溪工浊酶贮涌藏雷蛋同白同斥工总酶特再点龟:纺经赚济涂、孕方籍便夫、蚂成诞本迈较塑低结先构灵基左因洗表史达娇产服物绑,坊对剑非汽结划构研基行因贴无坊能缴为庆力霜;累所结检垒测纪位堤点舌只颠是联基旁因液组乐一通部自分妨;床数拨量托有世限钓,港有蹈时占受殊发久育齿时孩期翁和配环宇境劣影欧响强。分膛子肯标坟记本跪质影是赚以狠核斥苷礼酸述序朋列桨作倡为殖标陈记汗,读一杯般雁特猜点磨:(铺1烈)愧不庄受仓季贝节斧、塞环补境亚、液基撤因疮表她达搞与穿否菠的举限均制详;(石2捎)各多刚态元性毯高渠,册存腊在腰着头丰仙富抛的油等曾位志变衔异灰;(起3各)京数际量画丰昂富烛,令多倾态桐性渗遍爸及拉整杂个扣基杰因往组售;(闻4婚)洁表模现馒为亦“她中耽性鸡”身,逼不营影阿响捎目魂标厘性兆状急的悼表狭达漏,滩与牛不和良岭性絮状态无害必刺然顺的辞连胶锁挣;(鹊5流)或许蓄多毯分无子符标赛记剥表倾现竭共士显专性释,滩能宏鉴奇别夹纯燥合两杂乡丰合密基搅因莫型记,腹提布供赛完龟整拴的皮信拼息斑。分汉子煌标享记严的跌分雹类纲(S挤t里a钩u拖b等韵1耻9喉9央6恭)分子标记以Southern为基础如RFLP以PCR为基础单引物PCR标记有RAPD、

AP-PCR、DAF、ISSR等双引物选择性扩增PCR主要指AFLP需克隆、测序构建特殊双引物PCR标记如SSR、STS等植萝物佩遗飞传厌研扰究层中页常公用笑的荷分淘子瓣标岗记R椅F锹L序P艘—核R兔e名s开t捧r绳i浊c守t盾i曾o型n批F井r把a蛙g榨m喊e敢n痕t指L踩e坡n扫g查t煤h艇P低o置l驴y很m箭o可r薪p吹h绵i签s丛mR锻A芹P竭D遣—死R吴a律n倡d迫o阻m赶A纱m剖p谊l诱i设f雾i幕e掠d军P茫o骄l塞y救m谷o掏r柴p品h麦i顺c垃D秒N腥A轨s(渴D熄A烟F亦,鼓A邮P杰-吗P肢C剩R是)S秤S遵R并—姜S守i群m兵p钞l张e稼S迎e裂q董u归e凑n顿c妥e缩慧R织e成p顶e骆a叙tA私F捆L稠P贞—乌A面m田p告l签i脏f第i粘e今d饶F立r影a警g贤m姥e饲n辩t容L佛e锐n果g杀t翅h售P刘o屿l哄y辅m别o富r尽p晃h撤i瓶s通mR片F穗L开P原舍理较:D挪N粪A限酷制手性惧内划切鸭酶雨酶晶切电冤泳转坦移歌到饭硝跃酸瓣纤好维斜素乔滤窗膜同悠位还素饭或肠非育放株射作标机记哲(解如狸地艺高遣辛垫等泉)贞的牢探华针窗杂被交胶侄片眨放愿射右自摆显切影猎,铃显润示驻酶马切而片扇段言大叮小酶疏切牌:3浓-或5尺u浮g足D彩N学A恶,以涝1欣0U内萝切岭酶野酶唇切5小越时电戚泳伴:0虏.轧6德-妨0暂.滩8皆%琼羞脂背糖猜胶彩7睁0V电想泳帖1螺6测小址时染址色健:E凭t胃B密r染灿色2顶0分解钟变伤性场:任0章.督2奖5M闭H塔C架l亦2道0分夕钟萝,场抽畅真升空联,运水挖冼印轨迹辉:大加傲入0服.巴4融N拥N缸a饰O凭H杀,进滥行S窜o恼u河t块h忍e森r农n印叉迹冲码洗钢:轧以趁2×君S葛S必C冼蓄胶悠,霞风葡干酶千切暮—良电纪泳缠—痛印南迹—杂霸交—洗需脱预永杂晃交捧:题将趋杂燃交逐膜茅放市人谱预联杂兔交咱液始(江水步、远5拦×H恰S耀B展、赖D尼e荒n航h盗a械r液d四t挂Ⅲ侨)中必,薄封推好防后假置遭6周5多℃耍温辜箱药中亩振进荡思5晴-滥6虫小滚时涌。杂紫交撞:失预漏杂滥交悼液抄中歌加极入墓标区记备好兽的m搏a捐r默k胖e有r和辰探辉针生,认放晴入牵杂慰交拆膜武浸俊匀铲。格封习好单杂肃交寸盒缘瑞后躁,补置各6堡5搭℃向温哑箱裹中德振辰荡侮过废夜圆。洗渡脱尊:蹈将划膜锦转跪入慨洗怠脱访盒快,蚕加穴入伐洗计脱驾液轧6困5到℃倾振蹈荡趋洗剩脱交两瞎次掌(障1怨5m默i制n樱/次朵),吸迅干摸包微好没。—放抓射疏自生显演影将摔洗觉脱怖好蛋的印杂组交夏膜折置蔽于敞增慕感庸屏灵上毁,裂于充暗乳室附中肿将X订-光协片枕放辆于这杂沿交辆膜槽上袄,剑再装放过上转另森一迅张唉增挖感蚁屏久,评装什人心暗表袋疲,伴并诸用托夹摧板洽夹梯好风。衡置晕-翼7无0逐℃魂超趋低雕温错冰腹箱跑中莫曝统光游1瓣0眨天卵左讯右茧。使票用氏磷严屏朱仪巾,嘴操遣作示更意方负便刷。R渐F料L筛P探守针探传针扛标丹记鼓—随倾机晚引丝式物夸法2罢5n异g变请性D鼻N哗A5u糟l寡坚聚前核驳苷旷酸2锋u行l泳B晒S坡A3袋u礼l勒[震α爬-3贺2P层]境d惹C恩T估P2u枪l毯K南l昏e谷n剩o缓w酶加赶水秘至潜5坝0u血l探,3洽7遮℃代温著箱侦中尾标尺记增2幻玉小稿时R架F肯L答P标芒记特依点共山显揪性剃,赌可解以渔区便别斧纯系合牌和鞋杂呈合查基俩因勤型稳柜定觉、渠重娃复纽奉性急强某是些夸植暮物代中汪开终发胃探扛针帽已娃遍否及焰整端个首基秩因弓组缺往点乌:D韵N糠A需哈要别量坊较述大浮,辞技独术旬复节杂胡;用痕于怠做唐图惨较告费地时纠,寻难揉以径分赖析煌大仇量府样报品;在狼基躁因爬组暗较坊大吨、难严仇格话自粘花委授社粉杨作程物荡上军多视态饱性值很久低往,恼使录遗更传畏图意饱躲和裕度舰低庄。R岂A须P索D原蜓理尊:用汉一领个室随练机充引赠物估(扁8祥-伙1岩0b踏p视)辨、碱略基驴随宰机睡排稼列音的帮寡隐核溪苷鱼酸巴序跪列竭,伪非帅定枪点准地疲扩焰增讽基遣因涨组D加N织A睬,然折后民电幼泳术分树开宾扩偶增搭片青段承。P喇o辉l悉y睬m克e优r赔a娘s险e通C连h街a床i斧n洲R楼e怪a章c压t段i访o也n客-德P件C脏R3双'5痛'5'3'TargetDNAsequenceGCTCGCAGTACTT酸C描A由T闭G挑AC乖G董A弃G膝C制Gdenature@95˚C5'3'3'5'GCTCGCAGTACTTCATGACGAGCGTCATGAGCTCGCannealprimers@60˚CTaqpolymerasebinds3’andextendsGCTCGC5'3'3'5'AGTACTTCATGACGAGCGTCATGAGCTCGCD抱N板A刘i吸s伞d纤o设u欢b反l报e再d送w恶i割t疯h归e造a栏c豪h济c厅y奴c灵l及eRepeat25-40timesR税A馒P批D的僵操剖作P浑C鸣R反借应络:D泪N记A晋(优2损0跃n博g董/较µ障l膛)吐1练µ邻lP钱r冬i歼m鸽e径r棚1着5穴n联g1宣0蒸×万B逗u券f倡f债e共r高2幻玉.附0释µ朵lM判g2画+(贩2地5馅m抛M镰)务1旅.抱2悼µ践lT不a尝q酶帮(腰5U汽/爪µ道l恶)注0飘.氧1予5乞µ模ld国N便T献P喉(僵2偏5陶m书M删)蛙0遮.痕2挣µ示l加咐水忆至柱2深0估µl棍,再乘加站入啊石伏腊屡油赛,长进娱行P拌C债R扩延增S市t防e我p载1锤9厕5只℃孕2分驾钟S侦t艰e躁p蚕2衣9吹5再℃墙1冒5秒S撕t前e斧p仰3粘3失6粗℃结3挠0秒S台t朝e波p胁4免7柏2膝℃趣4全5秒S柏t我e肾p巩5雹G洲O指T悦O获S声t闻e群p追2淡4趴6循摧环S失t芳e紧p甜67熟2赌℃土5分乞钟P茶C瓜R扩增或:主乎要违特这点无华需旋杂共交起,溉设睬计遗引谜物悔也吧无阿须此知挤道惯序艇列苍信调息撕;D澡N袜A需多要煌量遮少跃,黄引伞物钩便堪宜培,道成买本余较曲低陕;技纪术双简友便司,零操框作鸡方坛便挖、只快其速浑,衣不滋涉时及秋分洁子胆杂宴交京和阁放饲射岛性召自筝显宇影羞等裕技火术防。不祥同枪物蛛种数间跳引如物所通策用左;缺之点臣:恐大径多鹊显夕性涂遗盆传隆,顶不贿能雅鉴邮别宫杂纺合违和淋纯害合段子挠;污实弹验繁重茎复伴性巴较渡差泉,眯结乏果仪可递靠迹性淹较逼低趋。D骨A哪F郑(古D洞N依A迁a球m夏p株l锁i述f浊i颂c尺a雀t悠i胶o近n矛f列i删n触g逗e卸r陡p桂r旅i拴n岸t迫i探n至g顷)流:与R演A拢P管D不邪同喇的泼是:引本物萌浓兵度海更亚高做,也引完物腥长访度找更秧短浇(扫一电般道5若-泉8苗个妨碱抖基昌)搅,固且究往鸽往医用避聚剑丙呀烯浴酰阿胺滤凝鹊胶汉电贡泳数,山通墓常详会朝产执生饭非伟常谋复孤杂泽的贯带休型唤,兽谱裁带昆信物息帜比R描A弄P锤D团s大餐得斯多绳。(C弹a土e堂t岁a版n兵o客-标A咬n稻o筹l派l耗e椒s等寨,睛1顽9束9洁0毯)A雨P跌-见P徒C麻R荷(啄a后r锅b蓝i僵t盟r铸a建r忆i织l乏y射p撇r休i侮m找e贞d惯p渴o寻l形y针m祥e偶r鬼a著s搏e屿c偏h讯a详i楼n违r证e鹊a可c假t蔬i窑o固n盾)引仍物艰较店长蹄(平1岩0逝~唐5削0b让p深);引划物蜘浓温度起较横高膨;引梁物冠长姥度忧不芳定侦,点并袋且棉常睬常越来危自小为愿其遵它盼目那的记而尚设糠计谱的传引亲物支(枣如M殊1扎3通躬用荣测窃序秒引雾物快)芹。I偏S被S亡R共描同莲优探点袄:在铁不哥需欢要庄知烤道旺所拾扩震增D豪N纸A序怜列形情蛮况填下欠,压产玩生D屋N威A片依段道的愚指抬纹忆;需D田N粥A量腐少菠,侨产摸生铸多巧态观性旺丰模富恒。缺妹点炸:对市反且应愁条牵件呆非拢常童敏鸭感票,终重受复房诚性尾差啄。S尽C扁A时R嘱s(及S颤e旗q柄u赶e炎n蚂c草e忘d您C宪h梳a羡r衰a咱c欲t般e防r候i锐z毁e写d自A樱m球p族l累i底f镜i豆e涉d城R绕e茄g紧i慨o合n疤s疑)为望提模高R贼A酬P祸D标希记礼稳钻定圈性秋,凑把咏目游标R贷A堂P红D片埋段蒜克梯隆皱测纵序糕,将根草据念片佛段盟两筛末匀端调的锐序柏列脸设请计胃特医定扩引蔽物务(堤通炎常泄2肿4缝个帅碱本基丘)链,充再邪进般行P孙C端R扩盆增士,串可放把富相潮应苦的哀单济一乖位搭点饶鉴姨定读出领来院。具否有左更东高饱的促可驾重木复顷性共毫显盖性微队卫搞星眉标猛记飞(S句S汗R)真续核铃生纳物革基统因桐组学普榨遍榆存呀在富,捏呈询随巾机痕分桨布,大者约技每跑隔1不0踏-坏5县0更k纱b就角存勾在壮一沫个S挖S京R掉.哺既乳热动滴物合中蚂约喊为苹植配物笼的5雅-颈6倍;植清物暂中响平芝均2堵3塞.帆3油k细b有碧一摘个S桨S元R节;双灶子河叶悟植吵物S明S堂R数慌量援大注于庭单妹子翅叶得植染物,核D互N倡A但S匪S愁R数顽量奸多盏于袖细立胞霸质D捏N狐A跌;根击据权核遍心奔序瘦列澡碱答基悲数连的托不充同,可揭分婆为随单宴碱垄基帜、2碱追基纹、3碱化基锈、4碱醒基辅等山多弯种旱重活复男型挪。不乱同叛物侄种混其腥重星复黄序励列见及骑重乘复境单啦位锁频尊率午不身同丑。通扰过勤对5配4个嫌植鸦物甜种价核D炊N重A和2穷8个彩植陈物桨种煌细沫胞怖器D挡N州A汪S障S池R目(浅1钥-丑4稿b槐p张)的纯搜疲索,发茶现慨:(誉A利T循)n最斗丰舅富,然渐后卵依芬次幼是:顿(反A监)n、(微T犯)n、(丢A传G铃)n、(别C户T诸)n、(日A漂A惯T蛇)n、(衫A家T猜T娘)n、(辟A叨A岩C或)n、(缴G瓦T州T睬)n、(支A签G肺C吼)n、(泪G惕C毛T锈)n、(葬A贵A橡G光)n、(冶C较T菜T托)n、(廉A镰A遭T雁T取)n、(形T住T叹A拨A详)n、(叔A喷A总A年T肌)n、(邀A餐T酬T似T温)n及(须A蜓C仅)n、(挺G饰T祝)n。同想一改类王内炉碱耐基华种膏类鉴不醉同捡的S喉S赔R键,丰前度筐差圈别斩很跃大丽。S馋S侮R的卵分膊布示特袜点S椒S但R的脆功懂能长手期家以设来仓一着直椅认臂为S界S鼠R是很转唤录览哑盛区造,遮没岗有急明缠确竟的疮生寄理桐功贞能顾。纺但轨随犯着历研烦究南深食入全,烤证危明问并卡非珠如惭此树。S暴S炭R的耻主麻要相功薯能:编踏码眠氨陈基貌酸桐;染鸦色队体限末尖端派的S昨S脆R,倡有赞保尖护D科N尖A完待整徐性营、气避饭免叮降茂解歼、乐融调合教及喊丢芽失誉的施功柔能蒜;提苏高故或肺降夫低扔临亮近骄基肝因否转摇录笛速首率块;基饮因密重辟组丹的暮热洲点凳,呆是熔基夏因般变犯异享的统来间源运;部授分S谎S递R可油产谦生材转恒录石启盏动穿复民合技物学或住活驴化灰染淘色击体两动端拉序街列贫多涌是片保擦守倍的慎单臭拷言贝复序夹列际,预可液以亲根辰据钩两值端鞭序康列填设甲计虽一笔对环特耽异挡引喘物耽,缠通言过P刃C汪R将橡其袖间帝微竿卫所星茂序江列烫扩废增舞出占来拜,党利叠用篮电剃泳辛技然术扎获狐得习长壮度涂多锻态细性泪。不毙同巧材醒料钓重足复您次绢数虎的饱不厉同,导峡致挎了S窜S怪R长烫度跨的枯高斜度趁变菠异降性欲。S透S剥R分毯析S释S辟R分迁子排标帝记便的带创舌制基装因鲁组愁文吨库确的子构逐建探防针潜制纸备疮-桌预丙杂凶交淹-这带馋有S贺S部R克惰隆仆的度选纯择测霞序引歪物肚设蓄计检努测其遣它恩方俯法:唉E笑S瞎T形-揪S程S起R、滥相萌关狮种侮间S喜S碗R土.检.穴.主.撑.悠.C扎r知o狸s深s模-碍s变p则e饥c邀i松e诸s鸡S剂S令RT痒a拢x薪o晒n外o始m削i浊c路T号r扒a驱n涉s折f树e妻r佳a利b沾i坚l售i金t嫌y怕P跪o哨l像y抹m累o箱r巷p弹h脱i规s鸣mD蕉i删v役e吓r曲g糟e晕n滴c读e拣%傲(兵N鱼)题%口(去N锯)S逃a歉m赤e优s晒u筛b六g许e爸n编u模s马8疮9缸.居8耽(下5申2钉1并)翼7银8肌.垦3差(秀2锈9漠9错)S渴a稳m警e昼g比e蒜n高u宣s批7贴6尺.卵4友(焦1配8灭0闹0崭)怀8躺6橡.至0弊(少7辰7溜3慌)S臣a王m倚e爷a认l两l酬i将a侨n婚c瘦e逐4然5如.途4朗(耕4熊0法3奸)状5态0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A=4PIC=1–SUM(0.47)2+(0.30)2+(0.17)2+(0.04)2=0.64SSR资料:遗柏传持相吩似禾系召数G拨o熟w匙e微r遥(类1纸9旷8歪5挡)管:

a+da+b+c+d简单匹配系数(SM)(Simplematchingcoefficient)

aa+b+cJaccard相似系数(Jaccard1908).

2a2a+b+cDice(1945)相似系数,即Nei&Li(1979)相似系数.其中:abcd+

-+-kj遗蓝传聋距诞离拥的罗计捡算锈:R帮o泡g禁e奇r剃s(1浇9疏7酒2)R躁o明g傻e投r较s埋-卫W(R拌o偶g扶e舞r森s支d含i掘s胆t迫a药n宅c迁e溪a薪s镇m尊o石d忆i寻f掘i袜e糖d包b扮y逢W躬r脉i毛g肥h台t(1系9示7斤8)两铁个两随成机我群舍体j屋、镜k间针的暴遗奶传炎距煎离兴(N涝e寸i捉1蓝9酬7塘2票):Xi级j为X群岛体矿第i个鼓位膛点呈第j个走等亮位傻基常因拔频灾率Yi听j为Y群筹体谊第i个闪位犁点喇第j个奴位跑点舍基泥因富频察率在恩种漏质炎资凤源顿研胜究捎中扶,甘大足多析数辈采猫用盘罗延杰茧斯刮距吴离鹅(R拌D)剑和牧改由良畅的沃罗墨杰朝斯轧距目离注(M真R左D)呢(R厨o张g阶e姿r荷s,1缩慧9肢7辩2;G挠o误o盈d耽m爽a钉n昨&葛S或t抓u谅b鞠e裤r,1请9芝8军3)妇。根乖据工遗吨传室特禽性肌确冻定蓄的存罗比杰脏斯趁距霜离卫在矛相码关籍种狗质羽的档亲种缘寺关马系尾分考析香中洒非董常腔有恋用街;揪而时改晌良歪的宋罗劫杰扫斯陆距井离视还匀适可用鱼于侄杂权种况优懒势兄研挥究尸。聚旺类乡丰分艰析聚萝类奔指疯标愧:遗拉传老相项似丹系哈数遗扣传畅距萍离聚遥类皱方课法冈:S揪A赞H皮N要(S弹e鸭q伟u地e牛n戚t绕i亮a腊l斥A桐g防g宋l六o涂m辰e示r顶a敢t液i译v愿e渡H耳i粒e宿r冲a璃r正c颂h扬i窃c镇a歉l团a巾n锦d冤N膏e诸s匀t嗓e撑d稠)剃c伴l币u怨s锹t朗e观r安i秆n抬g常文用U河P皇G训M庸A分距析仪软倘件页:N商T欣S澡Y辞S徒-详p棚c千2鉴.鹅0辆2扔(拦R杯h只o唐l葬f茂,革1诱9喘9暴8稿)Q仗T辣L分傲析‘A疏’怕H驳o惊m考o排z更y湖g变o膏t杆e斩f拘o颤r逼t执h导e联a收l沸l舟e猴l投e邀f阶r漆o孩m漆A流p裳a酱r鲁e沾n支t‘砍B税’弓H统o板m撒o勒z凯y集g淡o购t耐e意f孩o房诚r绝t坑h取e触a旬l哗l哨e阿l颠e紫f裕r爹o素m疗B磨p算a夜r糠e键n剩t‘容H完’窑H伐e棕t聋e搂r化o窃z垫y燥g备o菠t吹e鞋c被a油r基r刮y功i粒n痒g冒b象o裙t洗h有a边l沟e射l搁l战e俩s燥A薄a埋n逮d矮B‘乖C势’犁E暮i辅t垂h订e限r介B谜B猫o盐r猫A报B辞g苹e臭n盒o鸡t推y且p钟e‘其D赶’果E逐i真t娘h错e静r忆A凑A柜o寒r匠A疮B鸡g习e罢n闻o杜t云y祝p牢e‘罢-挽’细M渠i茂s白s气i槽n党g拴d率a盟t脂a考f捐o鬼r察t祥h隙e漂i此n饿d左i户v法i常d刑u努a顷l托a湿t夺t币h招i池s塞l蜓o烤c裙u异sd攻a闸t妹a纱t抛y扭p鹅e特F纲2哪i扫n幼t服e佩r淹c右r放o腔s形s2顺0驰5述1*陪l他o鄙c往u届s唉1队B薄B莲B伸H书H悲-律A臭A润A胃B喇B治B抗H握H愤H屋-校A牙A裕B退A*裤l洽o睬c笔u苦s闷2方A来B亏-洁A接B洁H历A号B滥H强A均B炒-却A筑B妨-轿A织B犁H霜A蔬H*件l胸o爬c坐u李s滑3史A骆B痛B耗A塞H烂H恨H乒B粪H典A腾B厌H皂A任B屋H捞B饶B妇H孟H己-#产L窗o均c驰u代s罚3眼m嫌a缴y严b序e躬m轧i菌s馋-理s引c链o克r吩e啊d尚i岸n深i子n源d穿i冶v趴i壁d批u眼a赛l凉1钢2声!*姜l颈o专c置u爽s希4蹄A半B箩H金H晓A过B宽A粗A绵A税H帅A痰B讲-振A蒸B街H怕A玩B哥H疼H*患l证o双c塌u酸s系5汗A挪B腾H抢A拘B植H斗A粉A超-酒A互B奶H稼A凑B投H材A判H印H诵H使B*熟t驱r屋a勒i福t广1胶6或.积3炸7萝.军7寄8省.脚0损6构.就2盼4币.孙1鉴8皆.粒8赢6桂.辱5强5影.介4闷7求.篮3口8折.躁7繁9竭.籍0鹿-绒6情.特8院7漂.泪2谱7迫.掘1到7茂.吐6悟8垮.筛3乐8割.锅1雪7垃.届5椒6受.载8E拆S兔T挑(斥E戏x谣p棉r猴e海s框s循e怀d杠S壮e丝式q翼u写e岂n殊c江e妈T眠a疯g疲s辫)S假N督P(s鱼i惕n繁g斜l读e矛n酿u佳c妹l慎e吓o仍t再i银d瓣e州p萌o黑l捡y璃m僵o搞p毒h弓i牺s拴m)c评S袍S雪R赠、氧c昏S忆N桐PD议N丝式A微偷阵晒列摄(M们i发c棕r剪o革a耻r聚r托a葡y酷)蛋蛛白吴质娃组留学.坦.春.拴.厘.阁.新烟型易分兼子杰标帜记E爷S甘T是壤长掠约势1舌5吩0乳-描4彼0额0b酷p的墙基掩因叨表田达摄序酸列桶片梦段希,智携恢带辽着抵完销整歉基育因补的响某搞些哈片啊段耳。m蔬R款N惠A反薪转税录后成c躬D们N有A遭,克滑隆傍到换质清粒速或甩噬井菌

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