生长素响应因子ARF4通过与IAA12互作调控拟南芥芽再生

• 花匠小妙招
• 2024-10-31 06:07

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1 前言

1.1 植物干细胞与茎端分生组织

1.1.1 植物茎端分生组织

1.2 生长素

1.2.1 生长素的生物合成

1.2.2 生长素的运输

1.2.3 生长素的信号转导

1.3 Aux/IAA蛋白家族的研究进展

1.3.1 Aux/IAA蛋白家族的结构及功能

1.3.2 Aux/IAA的基因表达调控

1.4 生长素响应因子ARF蛋白家族的研究进展

1.4.1 ARF蛋白家族的结构及功能

1.4.2 ARF的基因表达调控

1.4.3 转录激活因子ARF蛋白响应生长素的模式

1.4.4 转录抑制因子ARF蛋白响应生长素的模式

1.5 植物离体器官发生

1.5.1 植物细胞的多能性

1.5.2 植物的芽再生的分子机制

1.6 研究的目的及意义

2 实验材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 植物材料

2.1.2菌株及载体

2.1.3 酶与各种生化试剂、耗材

2.1.4 实验中培养基及常用缓冲液的配制

2.1.5 实验中的仪器设备

2.1.6 实验中DNA引物和用途

2.2 实验方法

2.2.1拟南芥种子杀菌及无菌培养

2.2.2 拟南芥组织培养

2.2.3 拟南芥基因组DNA的提取

2.2.4 拟南芥幼苗总RNA的提取及反转录

2.2.5 构建基因工程载体

2.2.6 农杆菌侵染拟南芥构建转基因植株

2.2.7 利用qRT-PCR检测基因相对表达量

2.2.8 酵母双杂交实验

2.2.9 烟草瞬时转化实验

2.2.10 免疫印迹试验（Western-Blot）实验

2.2.11 大肠杆菌原核表达蛋白—以GST标签蛋白为例

2.2.12 Pull-down实验

2.2.13 Co-IP（蛋白质免疫共沉淀）实验

3 结果与分析

3.1芽再生过程中ARF4的表达模式及功能分析

3.2 IAA12与ARF4互作且在茎端分生组织中高表达

3.3 IAA12与ARF4相互作用

3.4 芽再生过程中IAA12与ARF5、ARF4具有相似的表达模式

3.5 IAA12在茎端分生组织重塑中的功能

3.6 IAA12与ARF5在芽再生过程中的相互作用

3.7 ARF4通过直接竞争ARF5结合IAA12

3.8 ARF4通过竞争ARF5与IAA12互作调控芽再生

4 讨论

4.1 ARF3、ARF4和ARF5可能共同参与了茎端分生组织的重塑

4.2 IAA12调控芽再生

4.3 ARF4通过竞争ARF5与IAA12结合调控芽再生

4.4 ARF4调控芽再生的工作模型

5 结论

参 考 文 献

致谢

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