影响西洋杜鹃离体试管苗开花的几个因素
影响西洋杜鹃离体试管苗开花的几个因素刘燕1,陈训2*(1.贵州省生物研究所,贵州贵阳550009;2.贵州科学院,贵州贵阳550001)摘要[目的]研究影响西洋杜鹃离体试管苗开花的因素。[方法]以西洋杜鹃无菌试管苗为材料,研究培养基、外源激素、外植体生理状态、光照、活性炭对西洋杜鹃离体试管苗开花的影响。[结果]低盐量、低硝酸盐的1/2Read培养基较适合西洋杜鹃花芽的诱导,平均诱导率为34.44%;保持一定湿度的含0.7%琼脂的半固体培养基诱导花芽的效果好。IBA2.0mg/L是诱导花芽产生的最适宜激素用量。茎尖分化的试管苗最适宜作花芽诱导的材料。光强强度3000lx,光照16h/黑暗8h的光照条件适合花芽的诱导培养。培养基中加入0.2%活性炭能显著提高花芽诱导率。[结论]外植体生理状态、培养基成分及状态、光照强度和时间、植物激素等对西洋杜鹃离体培养试管苗开花均有影响。关键词西洋杜鹃;离体培养;影响因素中图分类号S685.21文献标识码A文章编号0517-6611(2008)22-09405-03StudyonSeveralFactorsinfluencingFloweringofTest-tubePlantletsCulturedinvitroofRhododendronhybridumLIUYanetal(GuizhouinstituteofBiology,Guiyang,Guizhou550009)Abstract[Objective]Theobjectiveofthestudywastorevealtheseveralfactorsinfluencingfloweringoftest-tubeplantletsculturedinvitroofRhododen-dronhybridum.[Method]Withtheshootscultureinvitroasexplants,thefactorsinfluencingthefloweringsuchasmedium,phytohormone,physiologicalstateofexplants,illumination,activatedcarbonwereinvestigated.[Result]The1/2Readmediumwith2.0mg/LIBA,0.7%agar,0.2%activatedcar-bonwassuitableforinducingflowerbudsandthemeaninductionratewas34.44%.Theshootsderivedfromstem-tipwasbestmaterialtoinduceflowerbud.Illuminationintensityof3000lx,photoperiodof16h,temperatureof28℃weresuitablefortheinductionofflowerbud.[Conclusion]Thephysio-logicalstateofexplants,mediumcomponentsandstate,phytohormone,illuminationintensityandphotoperiod,activatedcarbonetc.allhadaninfluenceonfloweringoftest-tubeplantletsculturedinvitroofRhododendronhybridum.KeywordsRhododendronhybridum;Cultureinvitro
;Floweringintube;Factorsintissueculture基金项目国家农业成果转化项目(2007GB2F200289)。作者简介刘燕(1981-),女,贵州贵阳人,硕士,实习研究员,从事资源植物学方面的研究工作。*通讯作者,博士生导师,研究员。收稿日期2008-05-19西洋杜鹃花色鲜艳,花形变化多样,株形优美,具有很高的观赏价值,早期就被列为世界十大盆花之一,在国际花卉市场甚为畅销。其花期长达四五十天,比普通杜鹃花更耐观赏。除盆栽外,还可用于庭院装饰和花篱等多种用途,深受人们的喜爱。利用组织、器官的培养进行花芽分化的研究,在国内报道还较少,尤其是木本花卉试管苗开花研究报道更是少见。为此,笔者对诱导西洋杜鹃试管苗开花的组培条件进行了研究,并探索出适合西洋杜鹃试管苗开花组培条件,建立了稳定的试管苗开花试验体系,对以后植物开花机理的研究及鲜花和无土栽培都具有重要意义。1试验与方法1.1试验材料将组培快繁出的西洋杜鹃无菌试管苗(高3cm以上)从芽丛上割下来作为花芽诱导的材料。1.2试验方法1.2.1培养基对花芽分化的影响。1.2.1.1培养基成分对花芽分化的影响。设计了4种培养基:MS、1/2MS、Read、1/2Read,每种培养基中加入IBA2.0mg/L,活性炭(AC)0.2%,琼脂1.0%,蔗糖3.0%;pH值5.4。每个培养瓶接种1～2株幼苗,每个试验号接种30株材料,3次重复。1.2.1.2培养基状态对花芽分化的影响。培养基状态的不同,可造成培养瓶内湿度的不同。将1/2Read培养基分成3类:不放琼脂(即液体培养)、放0.7%的琼脂、放1.1%的琼脂,每种培养基中放入IBA2.0mg/L+0.2%AC+蔗糖3.0%,对西洋杜鹃进行花芽诱导试验,3个月后统计结果。1.2.2外源激素对花芽诱导的影响。以1/2Read+琼脂1.1%+蔗糖3.0%+0.2%AC为基本培养基(pH值5.4),选取不同浓度的6-BA、ZT2种细胞分裂素和NAA、IBA、IAA3种细胞生长素为外源激素对试管苗进行花芽诱导。1.2.3外植体生理状态对花芽分化的影响。选取初代培养时所选用的外植体(茎尖、茎段、叶片)对其进行诱导和增殖后的无菌试管苗,接种到1/2Read+IBA2.0mg/L+0.2%AC培养基上,培养基中含琼脂0.7%,蔗糖3.0%;pH值5.4。1.2.4外植体生根作用对花芽分化的影响。选取继代1次后的无根试管苗和诱导生根的有根试管苗为试验材料。接种到1/2Read+IBA2.0mg/L+0.2%AC培养基上,培养基中含琼脂0.7%,蔗糖3.0%,pH值5.4。1.2.5光照对花芽分化的影响。在对其花芽的诱导中,光照强度从1500～3000lx设置了梯度,以500lx为1个梯度递增;选用3种光照时间,光照10h/黑暗14h、光照12h/黑暗12h、光照16h/黑暗8h。培养基为1/2Read+IBA2.0mg/L+0.2%AC,琼脂1.0%,蔗糖3.0%;pH值5.4。1.2.6活性炭对花芽分化的影响。在Read+IBA2.0mg/L培养基中分别放入0、0.05%、0.1%、0.2%活性炭,其他试验条件不变,进行花芽诱导试验,3个月后统计花芽诱导率。1.2.7培养条件。温度28℃,光强3000lx,光照16h/暗8h。2结果与分析2.1培养基对花芽分化的影响2.1.1培养基成分对花芽分化的影响。基本培养基是植物组织培养重要的基质,这些基质给花芽的分化过程提供所需要的能量和结构物质,选择合适的培养基类型对于离体试管苗开花至关重要。结果表明(表1):基本培养基以1/2Read效果最好,Read培养基次之。在1/2Read培养基上,试管苗不仅生长良好,还能在苗顶端诱导出花芽,平均诱导率34.44%。比较这4种培养基的成分,尽管在许多方面存在差异,但主要的区别在于培养基的总盐量及铵态氮和硝态氮的安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2008,36(22):9405-9407责任编辑罗芸责任校对
李洪
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