MdWRKY71
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1前言
1.1 植物花青苷及原花青素的研究进展
1.1.1 花青苷及原花青素的结构
1.1.2 花青苷及原花青素的功能
1.1.3 花青苷及原花青素的生物合成途径
1.1.4 花青苷及原花青素合成的结构基因
1.1.5 调控花青苷及原花青素合成的转录因子
1.2 非生物因素对花青苷及原花青素合成的影响
1.2.1 温度影响花青苷的合成
1.2.2 植物激素影响花青苷的合成
1.2.3 光照影响花青苷的合成
1.2.4 糖影响花青苷的合成
1.2.5非生物因素对原花青素合成的影响
1.3 WRKY转录因子研究进展
1.4 MADS-box转录因子研究进展
1.5研究目的及意义
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 植物材料与培养条件
2.1.2 菌株
2.1.3 载体
2.1.4 生化试剂及相关药品
2.1.5 引物及测序
2.1.6 培养基配方
2.1.7 仪器
2.2 实验方法
2.2.2 原花青素提取及含量测定
2.2.3 生物信息学分析
2.2.4 DNA的提取
2.2.5 植物总RNA提取
2.2.6 反转录实验
2.2.7 实时荧光定量PCR反应
2.2.8 基因的克隆
2.2.9 琼脂糖凝胶电泳产物胶回收
2.2.10 零背景载体（pLB-vector）的连接
2.2.11 大肠杆菌感受态（DH5α）的转化
2.2.12 菌落PCR验证及测序
2.2.13 质粒的提取
2.2.14 质粒及表达载体双酶切
2.2.15 构建表达载体
2.2.16 转化农杆菌感受态
2.2.17 王林及红肉苹果愈伤组织的遗传转化
2.2.18 亚细胞定位
2.2.19 苹果果实的瞬时注射
2.2.20 酵母单双杂实验
2.2.22 双荧光素酶活体成像检测
2.2.23 荧光素酶（LUC）报告基因分析
2.2.24 蛋白相关实验
2.2.25 pull-down实验
2.2.26 蛋白凝胶迁移实验（EMSA）
3 结果与分析
3.1 UV-B诱导的MdWRKY71-L转录因子调控苹果花青苷的合成
3.1.1 MdWRKY71-L同源基因及序列分析
3.1.2 MdWRKY71-L的组织表达分析及亚细胞定位
3.1.3 苹果从发育至成熟阶段花青苷含量、MdWRKY71-L 和花青苷合成相关基因的表达变化
3.1.4 转基因MdWRKY71-L对苹果花青苷合成的影响
3.1.5 MdWRKY71-L可以结合MdMYB1和MdUFGT的启动子并促进它们的表达
3.1.6 UV-B处理促进MdWRKY71-L的表达和苹果果实花青苷的积累
3.1.7 UV-B处理过表达愈伤组织进一步促进了花青苷的合成
3.1.8 MdWRKY71-L可以结合MdHY5的启动子并促进它的表达
3.2 MdJa2转录因子整合BR和JA激素信号调控苹果花青苷及原花青素的合成
3.2.1 MdJa2的进化树分析
3.2.2 转基因MdJa2调控苹果花青苷及原花青素的合成
3.2.3 MdJa2可以结合MdANS、MdMYB9和MdMYB12的启动子
3.2.4 BR处理对苹果花青苷及原花青素合成的影响
3.2.5 BR处理影响MdJa2转基因苹果愈伤组织中花青苷及原花青素的合成
3.2.6 MdJa2和MdBZR1蛋白互作
3.2.7 MdBZR1可以调控苹果花青苷及原花青素的合成
3.2.8 MdJa2-MdBZR1复合物影响下游基因的转录
3.2.9 JA处理可以促进苹果花青苷及原花青素的合成
3.2.10 MdJa2参与JA激素信号调控苹果花青苷及原花青素的合成
3.2.11 MdMYC2可以结合MdJa2的启动子并抑制它的表达
4 讨论
4.1 激素和环境信号调控类黄酮的生物合成
4.2 UV-B诱导的MdWRKY71-L转录因子调控苹果花青苷的合成
4.2.1 MdWRKY71-L正调控花青苷的生物合成
4.2.2 MdWRKY71-L通过与MdMYB1和MdUFGT启动子相互作用直接调控花青苷的生物合成
4.2.3 MdWRKY71-L通过MdHY5-MdMYB1转录级联模式调控花青苷的生物合成
4.3 MdJa2转录因子整合BR和JA激素信号调控苹果花青苷及原花青素的合成
4.3.1 MdJa2可以介导BR激素信号调控苹果花青苷及原花青素的合成
4.3.2 MdJa2可以介导JA激素信号调控苹果花青苷及原花青素的合成
5 结论
参考文献
7附录
致谢
9 攻读学位期间发表论文情况
网址: MdWRKY71 https://m.huajiangbk.com/newsview326209.html
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