四照花组织培养技术研究
四照花组织培养技术研究
【摘要】： 四照花为重要的园林观赏树种,迄今为止,根据苞片大小和颜色、花型、叶色及其抗病性选育出了大量的栽培品种。为研究四照花组织培养技术,本试验以落叶树种大花四照花(Cornus florida)、日本四照花(Dendrobenthamia japonica)和常绿树种东京四照花(D.tonkinensis)展开了如下研究:1.大花四照花、日本四照花和东京四照花的防污染比较研究;2.东京四照花组织培养再生体系的研究;3.东京四照花组培材料的遗传稳定性检测。结果表明:(1)大花四照花最适宜消毒方式为70%酒精20 s+0.1%升汞7 min,4~5月份为外植体最适宜取材时间,其污染率和诱导率分别为20.95%、82.32%;培养基pH值为5.0时可有效抑制内生菌污染,最低仅18.33%,诱导率最高为83.50%。(2)日本四照花最适宜的消毒组合是70%酒精20 s+0.05%升汞11 min;不定芽继代培养时间为10 d时污染控制较好;培养基pH值为5.0时的外植体污染率降低至20.95%,诱导率最高为58.84%。(3)东京四照花外植体的最佳取样时间为4~5月;最佳消毒方式为70%酒精30s+0.1%升汞7 min,其污染率和死亡率分别为12.96%和7.41%。(4)东京四照花茎段不定芽诱导的适宜基本培养基为WPM培养基;TDZ和NAA以及6-BA和NAA这两种激素组合在合适的浓度下诱导率均较高,且新芽长势好。综合来看诱导不定芽的最佳激素组合为1.5 mg·L-1 6-BA和0.05 mg·L-1 NAA,诱导率可达77.78%;东京四照花的继代周期为24d时可一定程度遏制其褐化;在培养基中添加200mg·L-1的防褐化剂PVP可将褐化率降至17.78%;WPM+0.02 mg·L-1 TDZ+0.1 mg·L-1 NAA为适宜的增殖培养基,增殖系数为3.65;组培苗适宜的生根培养基为WPM+0.6 mg·L-1 IBA,生根率为56.25%。(5)用2个RAPD引物对东京四照花组培材料进行初步的遗传稳定性检测,发现增殖培养的3个处理中有1个处理出现一定程度的变异,而生根培养的2个处理扩增出稳定一致的条带,说明组培材料稳定一致。组培材料的稳定性评价还需更多材料的进一步验证。
【学位授予单位】：南京林业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
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