模块5

花匠小妙招
2024-11-04 16:46

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模块5-常见植物组培的关键技术.doc

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文档列表文档介绍

模块5 常见植物组培的关键技术
一、知识目标
掌握外植体培养要素
能利用植物组织培养的基础知识分析植物组织培养过程中常见的异常现象
掌握XXX的组培方法的特点
二、技能目标
能够根据不同植物特点选择合适的外植体进行启动培养
熟练修整和处理外植体
能够分析和解决组培过程中出现的污染、褐变、玻璃化等异常现象
能够针对不同各类的植物科学设计培养方案并进行有效的组培工作
三、态度目标
牢牢树立自主创新意识,为我国植物组培以生产基地向研发基地转变贡献力量
学会尊重别人和尊重自己
单元Ⅰ植物组培过程中的常见问题及解决措施
一、污染的原因及其预防措施
(一)污染的原因
污染是指在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌,导致培养失败的现象。污染的原因,从病原菌方面来分析主要有细菌及真菌两大类;污染的途径,主要是外植体带菌、培养基及器皿灭菌不彻底、操作人员未遵守操作规程等。造成污染的病原主要分为细菌和真菌两大类.
真菌性污染主要指霉菌引起的污染,一般接种后3~8d可发现。真菌性污染,一般多由接种室内的空气不清洁,超净工作台的过滤效果不理想,操作不慎等原因引起。此类污染可通过完善操作,控制培养环境,严格操作程序来克服。
细菌性污染的主要症状是培养材料附近出现黏液状和发酵泡沫状物体,或在材料附近的培养基中出现混浊和云雾状痕迹。一般在接种后1~,主要是操作人员的不慎造成。要求操作人员严格按照无菌操作程序操作。
(二)污染的预防措施

外植体带菌引起的污染与外植体的种类,取材季节,部位,预处理方法及消毒方法等密切相关。因此,取材以春夏生长旺季,当年生的嫩梢为佳,应尽量选择晴天中午进行,或取离体枝梢在洁净空气条件下抽芽,然后从新生组织中取材接种。
2. 外植体的灭菌
外植体的彻底消毒是控制污染的前提,应根据不同材料选择合适的消毒剂和消毒方法,有些特殊材料还需进行预处理,以达到最佳消毒效果。对于材料内部带菌的组织,有时还需在培养基中加入适量抗生素。
多次灭菌法;多种药液交替浸泡法。
3. 器皿与金属器械的灭菌
二、外植体的褐变及其防止措施
褐变是指外植体在培养过程中,体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质,这种致死性的褐化物不但向外扩散致使培养基逐渐变成褐色,而且还会抑制其他酶的活性,严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后变褐而死亡的现象。
(一)褐变的原因
①植物品种
研究表明,在不同品种间的褐变现象是不同的。由于多酚氧化酶活性上的差异,因此,有些花卉品种的外植体在接种后较容易褐变,而有些花卉品种的外植体在接种后不容易褐变。因此,在培养过程中应该有所选择,对不同的品种分别进行处理。
②生理状态
由于外植体的生理状态不同,所以在接种后褐变程度也有所不同。一般来说,处于幼龄期的植物材料褐变程度较浅,而从已经成年的植株采收的外植体,由于含醌类物质较多,因此褐变较为严重。一般来说,幼嫩的组织在接种后褐变程度并不明显,而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重。
③培养基成分
浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的褐变程度增加,此外,细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性,从而使褐变现象加深。
④培养条件不

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