首页 > 分享 > 植物病害诊断的技术与防治

植物病害诊断的技术与防治

花匠小妙招
2024-11-09 11:47

植物病害诊断的技术与防治第1页/共55页项目一作物物病害诊断技术第2页/共55页一、植物病害诊断的方法与步骤

（一）、植物病害诊断应具有的知识：病害、病原、观察技能（二）、植物病害的诊断方法与步骤田间观察——症状——镜检——病原分离、培养、接种。第3页/共55页第4页/共55页第5页/共55页第6页/共55页第7页/共55页第8页/共55页第9页/共55页第10页/共55页第11页/共55页第12页/共55页第13页/共55页二、诊断的一般程序1、症状的识别与描述；（植物病害的田间观察）2、调查询问病史与有关档案；3、采样检查(镜俭与剖检等)；4、专项检测；5、逐步排除法得出适当结论。一般性病害确诊必须做到：症状吻合，病原形态吻合。

第14页/共55页三、病害类别识别传染性病害非传染性病害真菌病害细菌病害病毒病害线虫病害寄生性种子植物病害营养条件不适宜水分失调温度不适宜光照不适宜中毒第15页/共55页（一）非传染性病害的识别田间病害观察

解剖检验环境条件调查

病原鉴定第16页/共55页（一）非传染性病害的识别田间病害观察病害田间分布状况：均匀发生、发病程度由轻到重、没有发病中心。病株表现：全株性（除高温日灼和药害外）。症状鉴别：有病状没有病征。可进行保温湿培养，观查病征情况，可按病毒诊断治疗。田间调查：病害发生的普遍性和严重性、发病快慢、田间分布、发病时期、寄主品种等。第17页/共55页（一）非传染性病害的识别解剖检验环境条件调查病组织切片染色处理镜检

土壤、肥料、气象等条件的不适宜

接触化学毒物、气体引起第18页/共55页（一）非传染性病害的识别

病原鉴定1、化学诊断法：土样分析、测其营养成分。（对缺素症及盐碱害有效）2、人工诱发及排除病因的检验法：对可疑病因，人为地提供发病条件或采取治疗的办法观察病害的发生条件。3、指示植物鉴定法：用于缺素症的鉴定。（指示植物是该植物缺某一营养元素其症状表现出来。）第19页/共55页诊断方法：现场调查、排除侵染性病害、治疗诊断。非侵染性病害的主要特点：（1）没有病征。（2）成片发生。（3）没有传染性。（4）可以恢复。第20页/共55页（二）传染性病害的识别1、田间观察：呈分散状分布，由点到面，由一个发病中心向四周扩展，有传染性。2、症状鉴别：传染性病害一般有病征。3、发病以后不能恢复4、病原鉴定第21页/共55页第22页/共55页第23页/共55页第24页/共55页第25页/共55页第26页/共55页第27页/共55页第28页/共55页第29页/共55页（1）常见病害诊断：症状鉴别—镜检病原—查阅资料（2）少见病害诊断：分离培养—接种—再分离

（柯赫氏证病律----Koch’sRule)

①在病植物上常伴随有一种病原生物存在；

②该病原生物可在离体的或人工培养上分离纯化而得到纯培养；

③将纯培养接种到相同品种的健株上，表现出相同症状的病害；

④从接种发病的植物上再分离到纯培养，性状与原来的记录②相同。（二）传染性病害的识别第30页/共55页四、病害诊断注意事项1、病害症状的复杂性

不同植物、或在同一植物不同部位、不同发育时期、不同的环境条件。

不同植物、或在同一植物不同部位、不同发育时期、不同的环境条件。同一病原

症状可不一样不同病原症状可相同第31页/共55页四、病害诊断注意事项2、伤害与病害的区别

伤害包括虫害、雹害、风害等机械损伤

虫害如螨类、蚜虫等可使叶变色、卷曲等不能与病害混淆第32页/共55页四、病害诊断注意事项3、病原菌与腐生菌的区分

植物受病原菌侵染，前期感染了病原菌、后期感染了腐生菌，镜检时要区分开来。4、并发性病害与续发性病害的区别

并发性病害——当植物发生一种病害时的同时，有另一种病害伴随发生。如柑桔线虫病发生时常并发衰退病发生。

续发性病害——当植物发生一种病害后，可继续发生另一种病害。感染苹果花叶病的果实常发生炭疽病。第33页/共55页五、植物病原鉴定技术第34页/共55页

植物病原菌的分离和培养(一）植物病原真菌的分离1、分离材料的选择2、分离方法：（组织分离法)（二)植物病原真菌的培养1、培养基的制备

2、病原菌接种3、病原菌培养（三）观察记录培养性状第35页/共55页第36页/共55页分离材料的选择分离材料的选择对分离培养的成败有着决定的影响，因为在感病植物受害部位的内外，常有多种腐生菌，为减少腐生菌的污染，分离所用的病害材料应尽可能新鲜，并且最好在病、健交接处选材取样。病、健交接处，除材料新鲜，污染的可能性小外，病原菌的生活力强、比较活跃，容易分离成功。第37页/共55页分离方法

病原菌分离的方法因材料不同而异，植病实验室常见的方法有组织分离法和稀释分离法；其中最常用的方法是组织分离法，而稀释分离法主要用于病组织上产生大量孢子的病原真菌的分离。

第38页/共55页组织分离法组织分离法适用于大部分病菌的分离。1.培养皿准备:取灭菌培养皿1个,置于湿纱布上，在皿盖上注明分离日期、材料和分离人姓名。2.培养皿平板制备：用无菌操作法向培养皿中加入25％乳酸1～2滴(可减少细菌污染)，然后将融化而冷至45℃左右的PDA培养基倒入培养皿中，每皿倒10～15ml，轻轻摇动使之成平面。凝固后即成平板培养基。注：分离细菌时不加乳酸第39页/共55页3.切取病组织小块(叶斑病类):取新鲜病叶，选择典型的单个病斑，用剪刀或解剖刀从病斑边缘(病健交界处，)切取小块(每边长3～4mm)病组织数块。4.表面消毒:将病组织放入70％酒精中浸3～5s后，按无菌操作法将病组织移入0.1％升汞液中分别表面消毒1-3min(也可使用其他表面消毒剂)，如植物组织柔嫩，则表面消毒时间宜短；反之则可长些。然后放入灭菌水中连续漂洗三次，除去残留的消毒剂。

果实、块茎、枝秆等组织内部的病原菌可用脱脂棉蘸70%酒精涂试病部表面，通过火焰去表面酒精。重复进行2-3次，达到表面消毒。

第40页/共55页5.用无菌操作法将病组织移至平板培养基上，每皿内放4～5块。6.将培养皿倒置放入25℃左右恒温箱内培养。一般3～4d后观察待分离菌的生长结果。7.若病组织小块上均长出较为一致的菌落，则多半为要分离的病原菌。在无菌条件下，用接种针(铲)自菌落边缘挑取小块移入斜面培养基上，在25℃左右恒温箱内培养，数日后，观察菌落生长情况，如无杂菌生长即得该分离病菌纯菌种，便可置于冰箱中保存。

第41页/共55页如果长出几种菌落,对长出的菌落分别转出，通过进一步的接种实验明确哪一种为其病原菌。

在组织分离工作中，如果植物材料体积较大且较软(如患灰霉病的番茄果实)，在分离过程中可直接挖取内部患病组织移r入平板培养基上，完成分离工作。

第42页/共55页讨论分离植物病原物时，为什么要选择新鲜病材料，并且在病健交界处取样?第43页/共55页

植物病理徒手制片技术徒手制片的方法有整体封藏法、徒手切片法、组织透明制片法和涂抹制片法等多种。最为常用的整体封藏法和徒手切片法两种。第44页/共55页整体封藏法对于生长在植物病部表面或培基上的菌丝体、分生孢子、分生孢子梗和其他孢子器官以及线虫等，可直接择取少许封藏在适当的浮载剂中，在显微镜下观察，根据材料的特点和观察的目的可采用不同的方法封藏制片。常用方法的概括为挑、刮、拨、撕四种。第45页/共55页挑：对于在植物受病部位或基质表面生长繁茂的霉状病原体(如霜霉菌)粉状病原体(如锈菌、白粉菌)以及培养基上的许多培养菌，可用尖细的解剖针等直接挑取封埋制片，挑取病原体的量，在保证选材典型的前提下，越少越好，以免互相重叠，分辩不清。取黄瓜霜霉病叶，小麦白粉病叶分别挑取霉状物和粉状物镜检病原菌的形态特点。第46页/共55页刮：对病部病原体稀少，或用放大镜也难辩认霉层的病害标本，可采用两侧具刀的三角刮针(或可用刀片代替)刮取病原物制片。刮的方法是，用刮针的一刃，蘸浮载剂少许，在病部顺同一个方向刮取2—3次，将刮得的病原体蘸在载玻片的浮载剂中封片镜检。浮载剂在保证浮载质量的前提下要尽量少，否则少量的病原体在大滴的浮载剂中极易分散漂流，在显微镜下难以寻找。第47页/共55页拨：对于产生在植物表皮下或半埋生于基物内的病原体孢子器官。如子囊壳、分生孢子器、闭囊壳等，可将病原体连同寄主组织一同拨下，放入浮载剂中，用两支解剖针，一支稳定材料，另一支拨出植物组织，使病原体外露制片。第48页/共55页撕：对于寄生在植物表皮细胞上的病原真菌，也可以将此有病原物的表皮撕下来制片镜检，这种方法不仅能看到病原物形态，而且可以观察病原物与寄主的解剖学关系。自田间取回感染白粉病的叶片，用刀片割破叶背表皮再用小镊子轻轻撕下，放在浮载剂中制片镜检白粉病菌分生孢子梗、分生孢子形态。第49页/共55页徒手切片法欲观察受病组织病变，病菌侵入和寄主体内扩展过程，以及埋生在基物内真菌子实体的形态结构等，都需将有关材料切成薄片，进行镜检，徒手切片是最常用的简便易行的方法，不需要特殊的设备，而且节省时间，切成的片子不仅可作临时观察，也可进一步制成永久性玻片标本。第50页/共55页徒手切片的基本用具是剃刀或刀片。切片时以左手的食指和姆指捏住材料，中指顶住材料下端，使材料上端突出于手指以上2—3毫米。右手握稳刀，从左向右后方斜向切割。注意刀口必须以材料面垂直，否则所得切面不正。同时双手不应紧靠身体，而是要活动自如。用臂力均匀地沿刀口后部起拉向前方，连续切割4—5片后，用毛笔蘸水轻轻沿刀口取下，放入盛有水的浅玻皿中，在此过程中左手握着的材料不要放下，否则再切时难按原位置拿材料。此外，在切片过程中，必须常用毛笔蘸水湿润材料，以免材料干涸不便切割。第51页/共55页切割一定数量的薄片后，用移置环在浅玻皿中选取合用的材料薄片，放在载玻片的水滴中，镜检合格者即酒精灯上将水烘干并摆正材料，然后加一滴乳酚油或其浮载剂；放在展片台上略加热，镜检如无气泡，即可小心加盖片，用吸水纸吸除多余的浮载剂，最后贴好标签，平放于切片板