‘月月粉’响应灰霉菌侵染的转录组与代谢组分析
灰霉病是由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的真菌病害,也是切花月季的主要病害之一。如今针对灰霉菌的防治措施主要是喷施农药,这样不仅增加花农生产成本,还对环境造成严重污染和破坏。所以为了能够更好掌握月季对灰霉病的防控,以及为今后月季抗灰霉病新品种培育、发掘抗灰霉病候选基因和选育抗病品种提供参考,本实验分别进行抗性材料的筛选评价、转录组测序、利用VIGS(病毒诱导沉默)技术初步验证RcWRKY22基因的功能以及代谢组分析,进一步了解月季-灰霉病菌互作机制。主要的研究结果如下:(1)利用离体花瓣圆片法分别对14份野生资源、16份中国古老月季、36份现代月季品种,共计66份材料进行月季种质材料对灰霉病的抗性评价,筛选出紫月季花等2份野生高抗种质资源,‘月月粉’等2份中国古老月季高抗种质资源,‘火影’等4份现代月季高抗种质资源,合计8份高抗种质资源(占12%)。(2)分别用灰霉病菌侵染了高抗材料‘月月粉’花瓣36h、60h、72h进行转录组测序分析。结果显示当灰霉菌侵染72h时差异表达基因数最多,有8683个(4165上调,4518下调),侵染36h时差异表达基因数最少,有3990个(2349个上调,1641个下调)。通过对差异基因GO富集分析,大部分差异表达基因富集新陈代谢、细胞过程、对刺激的响应、催化活性以及细胞膜和细胞器的形成等GO-Term中。KEGG富集分析发现,月季在响应灰霉菌感染差异表达基因显著富集在苯丙烷生物合成、谷胱甘肽代谢、MAPK信号通路、植物与病原菌互作等通路,说明了月季对灰霉病的抗性响应调节机制并不是单一的,而是多条途径共同参与。(3)通过转录组数据分析后选取MAPK信号通路中WRKY22基因进行VIGS技术处理初步验证该基因是否参与月季-灰霉病菌互作调节机制,处理后利用离体花瓣圆片法观察转基因植株接种灰霉菌后花瓣病斑直径大小和qPCR... （共109页)
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