PVT

• 花匠小妙招
• 2024-11-10 17:48

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引言

第一部分 PVT谷氨酸能神经元在七氟烷麻醉诱导、维持及觉醒中的作用

1 引言

2 材料

2.1 实验动物及分组

2.2 主要试剂

2.3 主要实验设备

3 方法

3.1 免疫荧光实验

3.2 小鼠脑立体定位病毒注射

3.3 化学遗传学

3.4 光遗传学

3.5 小鼠脑电图记录

3.6 脑电信号分析

3.7 脑片膜片钳记录

3.8 麻醉行为学测定

3.9 数据及统计分析

4 结果

4.1 七氟烷麻醉下PVT神经元活性被抑制

4.2 化学遗传学抑制 PVT 谷氨酸能神经元对七氟烷麻醉诱导及苏醒期行为学影响

4.3 化学遗传抑制 PVT 谷氨酸能神经元对七氟烷麻醉诱导及苏醒的皮层脑电影响

4.4 光遗传学激活PVT谷氨酸能神经元可促进七氟烷行为学觉醒

4.5 光遗传学激活PVT谷氨酸能神经元对七氟烷浅麻醉维持期的影响

4.6 光遗传学激活 PVT 谷氨酸能神经元对七氟烷麻醉诱导爆发抑制的影响

5 讨论

第二部分 PVT-BNST神经环路的结构鉴定

1 引言

2 材料

2.1 实验动物

2.2 主要试剂

2.3 主要仪器设备

3 方法

3.1 顺向病毒示踪

3.2 逆向跨单突触病毒示踪

3.3 免疫荧光

4 结果

4.1PVT谷氨酸能神经元的下游脑区追踪

4.2 PVT-BNST神经环路突触联系结构解析

5 讨论

第三部分 特异性调控PVT–BNST神经环路对七氟烷麻醉诱导、维持及觉醒的影响

1 引言

2 材料

2.1 实验动物及分组

2.2 主要试剂

3 方法

3.1 AAV-EF1α-DIO-hM4D(Gi)-mCherry和AAVretro-hSyn-Cre联合注射

3.2 AAV-EF1α-DIO-ChR2-mcherry病毒注射及光纤埋置

3.3 化学遗传学实验

3.4 光遗传实验

3.5 数据分析及统计分析

4 结果

4.1 化学遗传抑制PVT-BNST环路对七氟烷麻醉诱导及苏醒的影响

4.2 化学遗传抑制PVT-BNST环路对七氟烷麻醉诱导及苏醒的皮层EEG的影响

4.3 光遗传激活PVTvglut2+-BNST环路对七氟烷诱导及苏醒时间的影响

4.4 光遗传激活PVTvglut2+-BNST环路对七氟烷麻醉维持期行为学的影响

4.5 光遗传激活PVTvglut2+-BNST环路对七氟烷诱导爆发抑制的影响

5 讨论

第四部分 PVT-BNST神经环路对疼痛及焦虑负面情绪的影响

1 引言

2 材料

2.1 实验动物及实验分组

2.2 病毒及其他试剂

3 方法

3.1 AAV-EF1α-DIO-hM4D(Gi)-mCherry和AAVretro-hSyn-Cre联合注射

3.2 AAV-EF1α-DIO-ChR2-mCherry病毒注射及光纤埋置

3.3 疼痛行为学测定

3.4 焦虑行为学测定

3.5 数据及统计分析

4 结果

4.1 化学遗传抑制PVT-BNST神经环路对疼痛及焦虑相关行为学的影响

4.2 光遗传兴奋 PVTvglut2+-BNST环路对疼痛及焦虑行为学的影响

5 讨论

小结

参考文献

综述:全麻网络调控机制研究进展

附录 攻读博士学位期间发表论文

致谢

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