柑橘黄化脉明病毒DTBIA检测方法的建立
摘要： 通过柑橘黄化脉明病毒（Citrus yellow vein clearing virus，CYVCV）兔源多克隆抗体（一抗）及Ap标记羊抗兔IgG（二抗）最佳稀释度等条件优化建立了CYVCV直接组织点免疫（Direct tissue blot immunoassay，DTBIA）检测方法，并对其特异性、稳定性和检测效果进行了评价。试验结果显示，一抗、二抗稀释比例分别为1︰8 000和1︰2 000时，DTBIA检测CYVCV效果最佳；应用所建立的DTBIA方法对携带9种不同柑橘病害的柑橘样品进行检测时，仅携带CYVCV样品呈阳性反应；柑橘黄脉病样品植物组织印迹后，印迹膜于4 ℃保存，90 d内可进行有效的CYVCV检测；对田间不同柑橘品种利用DTBIA法检测CYVCV，其结果与一步法RT-PCR符合率为97.92%。可见，该CYVCV检测方法快速、简便、稳定、特异及可靠，可推广应用于田间快速检测CYVCV，对于防范柑橘黄化脉明病毒大面积传播流行具有重要的现实意义。
中图分类号:
S 666
引用本文
宾 羽，宋 震*，李中安，周常勇. 柑橘黄化脉明病毒DTBIA检测方法的建立[J]. 园艺学报, 2015, 42(9): 1843-1850.
BIN Yu，SONG Zhen*，LI Zhong-an，and ZHOU Chang-yong. Direct Tissue Blot Immunoassay for Detection of Citrus yellow vein clearing virus[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2015, 42(9): 1843-1850.
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