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花卉的组织培养方法和步骤.doc

花匠小妙招
2024-11-12 11:36

花卉的组织培养方法和步骤

花卉的组织培养方法和步骤　　18 　　2009.9 　　花卉的组织培养　　料，则可只用70%酒精处理稍长的时间。处理完的材料在无菌条件下，待　　酒精蒸发后再　　剥除外层，取　　1、培养材料的采集　　要根据培养目的适当选取材料，选带菌少。要选取植物择原则：易于诱导、　　组织内部无菌的材料。这一方面要从健壮的植株上取材料，不要取有伤口的或　　另一方面要在晴天，最好有病虫的材料。　　是中午或下午取材料，决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织，有自身消毒作用，这种组织一般是无菌的。2、培养材料的消毒　　从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带入培养基，便会造成培养基污染。因此，植物材料必须经严格的表面灭菌处理，再经无菌操作接到培养基上。第一步是将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净，如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小，即灭菌容器能放人为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而可装入纱布宜。易漂浮或细小的材料，　　袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗，然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。当然，最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。　　第二步是对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。用70%酒精浸10～30s 。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之70%酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过　　如果实、花蕾、长。有一些特殊的材料，　　包有苞片、苞叶等的孕穗，多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材　　用内部材料。第三步是用灭　　4、接种和培养1）接种：在无菌坏境下，将切好的外植体立即接在培养基上，每瓶接种1～2个，以防止交叉污染。2）封口：接种后，瓶、管用无菌药棉或盖封口，培养皿用无菌胶带封口。3）温度：培养基大多应保持在25℃左右，但要因花卉种类及材料部位的不同　　菌剂处理。表面灭而区别对待。　　菌剂的种类较多，5、增殖可根据情况选取。外植体的增殖是组培的关键阶段，　　第四步是用无菌水涮洗，涮洗要每在新梢等形成后为了扩大繁殖系数，需次3min 左右，视采用的消毒液种类，涮要继代培养。把材料分株或切段转入增洗3～l0次左右。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用。注意：①酒精渗透性强，幼嫩材料易在酒精中失绿，所以浸泡时间要短，防止酒精杀死植物细胞。②老熟材料，特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些，如种子可以浸泡5分钟。③升汞的渗透力弱，一般浸泡10分钟左右，对植物材料的杀伤力不大。④漂白粉容易导致植物材料失绿，所以对于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入浓度为0.08～0.12%的吐温20或80（一种湿润剂），可以降低植物材料表面的张力，达到更好的消毒效果。　　3、制备外植体　　将已消毒的材料，用无菌刀、剪、镊等，在无菌的环境下，剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等，叶片则不需剥皮。在操作中严禁用手触动材料。　　殖培养基中，增殖培养基一般在分化培养基上加以改良，以利于增殖率的提高。增殖1个月左右后，可视情况进行再增殖。　　6、根的诱导　　继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根，必须转到生根培养基上进行生根培养。1个月后即可获得键壮根系。　　7、组培苗的炼苗移栽试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境，必须进行炼苗。一般移植前，先将培养容器打开，于室内自然光　　然后取出小苗，用自来水把照下放3天，　　根系上的营养基冲洗干净，再栽入已准备好的基质中，基质使用前最好消毒。移栽前要适当遮荫，加强水分管理，保持较　　），但高的空气湿度（相对湿度98％左右　　基质不宜过湿，以防烂苗。　　水仙百合的栽培养护要点　　水仙百合属喜温暖和光照的植　　物，但也较耐半阴，因此既适宜于花坛、花境的种植，也适宜盆栽和用作切花。在栽培养护中需注意：　　3、生长期间需经常浇水，保持土壤湿润，避免脱水。夏季半休眠期和冬季低温时要控制浇水。夏季和气候干燥时节，要经常喷雾，以增加空气湿度。　　1、选好土壤。选土层深厚肥沃、排4、作为切花用的高杆品种，必须　　水良好的沙质壤土为好。搭架拉网，以防倒伏。　　2、种植前需施入腐熟的有机肥5、分株繁殖时，应在9月中下旬作为基肥，生长期肥水必须充足，每进行，每丛新株至少带2～3个芽。播隔2周施1次氮、磷、钾（比例为3：1：种繁殖也要在秋季进行，待小苗长出3）的无机肥。3片真叶时即可移植。