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1、(10)申请公布号 CN 104255488 A (43)申请公布日 2015.01.07 CN 104255488 A (21)申请号 201410465089.9 (22)申请日 2014.09.12 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 甘肃省农业科学院生物技术研究所 地址 730070 甘肃省兰州市安宁区农科院新 村 1 号 (72)发明人 厚毅清 赵瑛 罗俊杰 王方 郭嘉玮 欧巧明 张运晖 裴怀弟 陈子萱 李淑洁 苏子桐 (74)专利代理机构 北京挺立专利事务所 ( 普通 合伙 ) 11265 代理人 王震秀 (54) 发明名称 一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法 (5。
2、7) 摘要 本发明公开了一种单瓣矮牵牛试管花卉的培 养方法, 是以长日照单瓣矮牵牛品种的种子为外 植体, 进行灭菌处理, 并置于 MS 培养基中表面进 行发芽, 待成苗后, 剪切带 2-3 片真叶的茎段插 入继代培养基中持续继代培养, 再从继代苗中剪 切带 4-6 片真叶的茎尖接种于花芽培养基, 通过 培养环境诱导产生花芽、 绽放, 最终形成试管花 卉。本发明的有益效果为 : 通过组织培养技术, 人工控制其在试管中的株形大小、 花芽诱导、 花芽 绽放、 最终获得试管花卉, 该试管花卉具有花色丰 富, 花期持续一个月, 且可以连续开花特性, 该制 作方法简单、 可靠, 具备生产的实用性, 可丰富。
3、试 管花卉新品种。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 (10)申请公布号 CN 104255488 A CN 104255488 A 1/1 页 2 1. 一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 其特征在于, 是以长日照矮牵牛种子为外植 体, 进行灭菌处理后, 置于 MS 培养基中表面进行发芽, 待成苗后, 剪切带 2-3 片真叶的茎段 插入继代培养基中持续继代培养, 再从继代苗中剪切带 4-6 片真叶的茎尖接种于花芽培养 基, 调整培养环境, 在玻璃瓶中诱导产。
4、生花芽, 花芽生长并绽放, 最终获得试管花卉。 2. 根据权利要求 1 所述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 其特征在于, 所述单 瓣矮牵牛种子外植体的灭菌方法是 : 先用体积百分浓度为 75的酒精灭菌 1min 后, 以无菌 水冲洗, 再以质量百分浓度为 0.1的氯化汞溶液震荡灭菌 5-9min, 最后以无菌水反复冲 洗四次。 3. 根据权利要求 1 所述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 其特征在于, 所述组 织培养继代培养基的组成为 1/2MS-MS 培养基、 琼脂 5g/L、 白砂糖 30g/L、 PH 值 5.8-6.2 ; 继 代培养温度为 18-25, 光照强度为 2000。
5、lx-4000lx, 光周期为 10hrs/d。 4. 根据权利要求 1 所述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 其特征在于, 所述花 芽培养基的组成为 : MS 培养基、 琼脂 5g/L、 白砂糖 38-40g/L、 PH 值 5.8-6.2, 花芽培养温度 为 22-28, 光照强度为 3000lx-24000lx, 光周期为 15-16hrs/d, 培养时间为 1-3 周。 5. 根据权利要求 1-4 任一所述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 其特征在于, 所述试管花卉采用的玻璃培养瓶的大小大于 7cm13cm ; 所述玻璃培养瓶瓶口需包装有透 气膜。 权 利 要 求 书 CN 1。
6、04255488 A 2 1/3 页 3 一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法 技术领域 0001 本发明涉及植物组织培养领域, 具体涉及一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法。 背景技术 0002 利用花卉植物美化环境是人类对舒适生活的追求方式, 随着人们对欣赏花卉的的 需求不断提升, 市场上出现了试管花卉, 因其植株小, 培养在精致的玻璃瓶内而出名, 它是 利用组织培养技术将植物小型化培养在无菌的玻璃瓶中, 外形较为美观的试管玻璃瓶为瓶 中植物提供生长空间。接种植物在狭小空间中生长并开花, 试管花卉具有无需施肥管理, 观赏花期长等优点, 受都市人群欢迎, 也称作 “迷你花卉” 。2004 年, 韩国。
7、培育成功的 “手指 玫瑰” 是试管花卉成功的典型代表, 该品种不仅东南亚国家非常流行, 而且远销欧洲等国 家。由于在试管内的诱导开花, 难度较大, 开花不稳定, 目前已报道的试管花卉产品有花色 单一、 制作复杂等诸多缺点, 因此, 试管花卉产业需要持续开发新的产品, 以解决上述遇到 的难点, 满足市场需要。 0003 矮牵牛, 碧冬茄属。又称碧冬茄。多年生草本, 常作一二年生栽培, 高 20-45 厘米 ; 茎匍地生长, 被有粘质柔毛 ; 叶质柔软, 卵形, 全缘, 互生, 上部叶对生 ; 花单生, 呈漏斗状, 花朵颜色丰富, 非常美丽, 耐寒, 花期极长, 可开花 4 月至降霜, 且耐寒, 。
8、大部分矮牵牛属于 长日照植物, 即长日照可诱导开花, 由于矮牵牛花色丰富, 及生长的广泛适应性, 因此, 单瓣 矮牵牛试管花卉开发对试管花卉产业发展具有建设意义。 胡惠蓉在权威期刊 园艺学报 上 已阐明光照 16hr/d, 可诱导矮牵牛产生花芽, 该结果为探索矮牵牛生长习性, 也是本专利 内容中利用矮牵牛生长习性结合组织培养制作试管花卉的主要依据 ; CN102499091A 公开 了一种通过花药培养获得矮牵牛再生植株的方法, 该方法通过对矮牵牛花蕾进行处理, 放 置于诱导愈伤组织培养基中培养, 愈伤培养基中培养得到愈伤组织转接到分化培养基中, 分化出不定芽, 所得的不定芽达到 3-5 厘米时。
9、停止分化, 将培养的不定芽培养在生根培养 基中得到植株。该方法以花蕾为外植体进行愈伤分化得到再生植株, 不能得到试管花卉。 CN101578961A 公开了一种矮牵牛体细胞自然突变个体组培快繁方法, 其技术要点是在特别 配置的培养基中培养忠明显得到增长且分化出小芽, 将小芽接种到诱导生根的培养基中, 待小芽生长生根后驯化两周移栽到人工基质, 一周后移至温室栽种。该方法旨在克服矮牵 牛自花不育及扦插难发根的优良性状保存问题, 并最终进行盆栽, 该方法不能得到试管花 卉。 0004 综上所述, 目前矮牵牛试管花卉的制作方法在现有的技术中未见报道。 发明内容 0005 本发明的目的就是针对上述现有技。
10、术中的缺陷, 提供了可在培养瓶中连续开花且 花色种类丰富的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法。 0006 为了实现上述目的, 本发明提供的技术方案为 : 一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养 方法, 是以长日照矮牵牛种子为外植体, 进行灭菌处理后, 置于 MS 培养基 - 表面进行发芽, 说 明 书 CN 104255488 A 3 2/3 页 4 待成苗后, 剪切带 2-3 片真叶的茎段插入继代培养基中持续继代培养, 再从继代苗中剪切 带 4-6 片真叶的茎尖接种于花芽培养基, 调整培养环境, 诱导花芽并生长绽放, 形成试管花 卉。 0007 进一步的, 上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 所述单瓣。
11、矮牵牛种子外 植体的灭菌方法是 : 先用体积百分浓度为 75的酒精灭菌 1min 后, 以无菌水冲洗, 再以质 量百分浓度为 0.1的氯化汞溶液震荡灭菌 5-9min, 最后以无菌水反复冲洗四次。 0008 进一步的, 上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 所述置于 MS 培养基表面 进行发芽的培养环境为温度为 18-25, 光照强度为 2000lx, 光周期为 10hrs/d。 0009 进一步的, 上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 所述组织培养继代培养 基的组成为 1/2MS-MS 培养基、 琼脂 5g/L、 白砂糖 30g/L、 PH 值 5.8-6.2 ; 继代培养温度为 。
12、18-25, 光照强度为 2000lx, 光周期为 10hrs/d。 0010 进一步的, 上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 所述花芽培养基的组成 为 : MS 培养基、 琼脂 5g/L、 白砂糖 38-40g/L、 PH 值 5.8-6.2, 花芽培养温度为 22-28, 光照 强度为 3000lx-24000lx, 光周期为 15-16hrs/d, 培养时间为 1-3 周。 0011 进一步的, 上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 所述试管花卉采用的玻 璃培养瓶的大小大于 7cm13cm ; 所述玻璃培养瓶瓶口需包装有透气膜。 0012 本发明的有益效果为 : 本发明提供的一。
13、种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 通过 组织培养技术, 人工控制其在试管中的株形大小、 花芽诱导、 花芽绽放、 最终获得试管花卉, 该试管花卉具有花色丰富, 花期持续一个月, 且可以连续开花特性, 该制作方法简单、 可靠, 具备生产的实用性, 可丰富试管花卉新品种。 附图说明 0013 图 1 为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的花芽诱导结果。 0014 图 2 为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的试管花卉形成前 期 ( 剪切花芽及携带 4 6 片真叶茎节的接种 )。 0015 图 3 为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的连续开花结果。 0016 图 。
14、4 为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的多花色单瓣矮牵 牛试管花卉品种实例 ( 图中从左至右, 前三瓶花朵颜色为粉红脉纹、 第四瓶花朵颜色为紫 红、 第五瓶花朵颜色为红色, 其中不同花色为不同矮牵牛品种 )。 具体实施方式 0017 实施例 1 : 0018 一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法, 具体操作过程如下 : 0019 1、 在市场上购得 “梦幻” 粉红脉纹品种的矮牵牛种子 ; 0020 2、 外置体灭菌发芽 : 0021 带无菌手套数取 40 50 粒矮牵牛种子放置于无菌三角瓶中, 倒入 75酒精 30ml, 振荡灭菌1min, 倒出酒精废液, 加入无菌水50ml冲洗, 。
15、倒出废水, 加入0.1氯化汞溶 液 50ml 震荡灭菌 5-7min, 倒出氯化汞废液, 加入无菌水 100ml 振荡冲洗, 反复四次, 倒出最 终废液后, 利用镊子将灭菌后的种子放置于 MS 培养基表面发芽, 培养温度 22-24, 光照强 说 明 书 CN 104255488 A 4 3/3 页 5 度 2000lx, 光周期 10hrs/d( 种子极小, 需要精细操作, 倒出残液时, 可转瓶, 将漂浮种子荡 在瓶面上吸附 ) ; 0022 3、 继代培养 : 0023 待发芽生长至成苗后, 剪切带23片真叶的茎段扦插于MS培养基, 琼脂5g/L、 白 砂糖 30g/L, PH 值 5.8。
16、-6.2 的培养基中生长。培养温度 18 25, 光照强度 2000LX, 光周 期 10hrs/d, 可反复继代快繁。 0024 4、 花芽培养 : 0025 剪切无菌成苗带46片真叶的茎尖接种于花芽培养基培养花芽, 花芽培养基为 : MS 培养基、 琼脂 5g/L、 白砂糖 35g/L、 PH 值 5.8-6.2, 光照强度 18000lx, 光周期 16hrs/d, 温 度 25, 用 “振泰” 品牌透气膜包瓶, 三周内, 可产生花芽。 0026 剪切花芽及携带 4 6 片真叶的茎节扦插于 MS 培养基中, 其中琼脂 5g/L、 白砂糖 40g/L、 PH 值 5.8-6.2, 获得试管花卉, 在光照强度 18000lx, 光周期 16hrs/d, 温度 25下生 长绽放。 0027 最后应说明的是 : 以上所述仅为本发明的优选实施例而已, 并不用于限制本发明, 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明, 对于本领域的技术人员来说, 其依然可 以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改, 或者对其中部分技术特征进行等同替换。 凡在本发明的精神和原则之内, 所作的任何修改、 等同替换、 改进等, 均应包含在本发明的 保护范围之内。 说 明 书 CN 104255488 A 5 1/1 页 6 图 1图 2 图 3图 4 说 明 书 附 图 CN 104255488 A 6 。
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