‘杜丽’绣球MADS
‘杜丽’绣球MADS-box B类基因的编辑研究
绣球是一类具有极高观赏价值的花卉,基因编辑是未来绣球分子育种发展的重要方向,本研究重点研究绣球基因编辑技术,编辑控制花器官发育的MADS-box B类基因,希望能够实现花瓣向萼片的转变,从而获得观赏性更高的品种。试验的主要结果如下:(1)建立了绣球‘杜丽’的间接再生和直接再生体系。以绣球‘杜丽’叶片为外植体,最佳的诱导愈伤组织培养基为MS+2.25 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,诱导率可达85.34%,最佳的诱导出芽培养基为MS+2.25 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,不定芽分化率可达80.32%。最佳的直接再生培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,再生频率可达84.42%,平均再生芽数可达5.33个。最佳的生根培养基为1/2 MS+0.2mg/L IBA。(2)克隆了绣球‘杜丽’三个MADS-box B类基因:BWPI,BWTM6,BWAP3,其中BWPI基因序列全长为639bp,BWAP3基因序列全长为546bp,BWTM6基因序列全长为681bp,均不含内含子区域。进行系统进化分析和保守结构域鉴定,发现三个基因均具有K-box保守结构域;属于绣球‘杜丽’的MADS-box B类基因。(3)以绣球‘杜丽’三个MADS-box B类基因为靶基因设计g RNA,其中BW PI和BWTM6分别都选择了2个合适的靶位点,BWAP3选择了3个合适的靶位点,构建了7个单靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体。(4)利用农杆菌GV3010对绣球‘杜丽’B类基因进行了编辑初探,分别以叶片,叶柄,愈伤组织为外植体进行试验,得到以下结果:以绣球‘杜丽’叶片和叶柄为试验受体,筛选培养的潮霉素选择压为3 mg/L,最佳侵染时间为15min。以愈伤组织为试验受体的筛选培养选择压为2 mg/L,最佳的侵染时间为10min,最佳的菌液OD_(600)=0.4,获得了叶柄,愈伤组织直接再生出的抗性芽15个,混合检测发现抗性苗中含有Cas9序列,为后续绣球的基因编辑提供良好研究基础。
硕士论文
相关知识
植物MADS盒基因与花器官的进化发育
MADS
杜乐丽花园：一座天然实验室
棉花（Gossypium hirsutum L.）花器官特异MADS
手工花卉图案。美丽温柔浪漫的夏日杜丽花图片
链状植物中MIKC型MADS
山茶花MADS
绣球在园林景观中的应用初探
器官决定基因属于MADS基因，在花发育过程中起着“开关”的作用
建立烏腳綠竹次世代定序database及其花朵發育相關之MADS基因
网址: ‘杜丽’绣球MADS https://m.huajiangbk.com/newsview530990.html
| 上一篇: 什么叫基因编辑 |
下一篇: 为什么附合导线计算中角度闭合差调 |
