—高二生物选修3导学案编号036植物的克隆班级姓名学习要求:1,简述植物细胞全能性的金义。2、简述植物组姻培养的程序。3、半例植物细胞金施的体现。4,简述植物细胞培养和器■官培养的有一份他意义。5、蔺述植物原生质体的获母方法信植物细胞工程的概念、操作过租粕应用。6,简述,植物多途径的克隆实践。■*点:1、植物细胞的全熊■性。2、植物包织培养程序。3、植物细胞工程。难点:植物组织培养程■序。一、基础知识1,生物的繁殖方式分为两大类:繁殖和繁殖。经过细胞的结合,产生,再由发育成下一代个体的繁殖方式叫做有性繁殖。不经过细胞的结合,直接由产生下一代个体的繁殖方式叫做无性繁殖。无性繁殖产生的个体保持了亲本的;,一次产生的后代数量可以«2、植物克隆的技术基础是,其原理是植物细胞性(即每个生活细胞都具有的潜能),原因是每一个植物细胞都包含有所特有的.植物细胞全能性的大小:分化程度的细胞>分化程度的细胞(填高或低);>生殖细胞,。3、植物组织培养的一般程序:⑴配制培养基并:按照培养基的物理状态,可分为一体、一体和体培养基;培养基中必需含有的两类物质是和;加入琼脂的作用是。⑵获取组织块(外植体):从消毒的切取组织块,原因是这些细胞低,全能性容易实现。⑶培养:将组织块放在培养基上进行培养,经过脱分化获得组织(组织),以适当配比的和诱导组织再分化形成幼苗(试管苗),(4)移栽(或定植):试管苗.经过一定的培育(称锻炼或炼苗)转栽到土壤中长成植株。4、脱分化和再分化细胞的后代在上发生稳定差异的过程叫细胞分化,细胞分化的实质是。在生物体内已经分化的细胞不能一,但在体外分化的植物细胞(离体细胞),在一定条件的刺激下,恢复能力(或状态)的过程称为脱分化。愈伤组织在一定的激素作用下分化出根或茎或叶的过程叫o和是植物组织培养过程中的两个重要阶段,需要多种的共同调节。5、影响植物细胞全能性实现(全能性表达)的因素理论上有细胞核的活细胞都具有的能力,实际上不同的植物细胞全能性实现的难易程度有较大的差异,影响因素主要有:(1)植物种类,植物种类不同,全能性表达大不相同,如拟南芥、和番茄的全能性比小麦、玉米和更容易表达。(2)细胞种类,同种植物不同类型的细胞全能性表达有差异,如分化程度(高或低)的细胞全能性更容易表达,生殖细胞全能性体细胞等。(3)细胞的基因型,同种.植物不同的个体之间全能性表达也有差异,这是决定的。(4)培养基的成分,培养基中影响细胞全能性表达的成分有营养物质、植物生长调节剂的和o(5)培养条件,如光照(光强和光质)、温度、氧气等。(6)细胞培养的次数,一般来说,培养次数越的细胞,全能性越表达,甚至会丧失一全能性表达能力。所以,为了提高克隆的成功率,我们要做到(1)深入探讨,(2)不断试验研究,选择基因型。6,植物克隆的起点根据植物克隆的条件和目的选择合适的起点,从植物结构的层次来看,可分为三个层次:器官水平,如离体、、的部分或全部,即营一养繁殖,一插、嫁接等。组织水平,从的植物体上切取某种组织,或经过培养得到的组织中分离.一部分。细胞水平,真正意义上的克隆,起点应该是一个离体的植物细胞。根据课本找出哪些细胞可作为克隆的起:、、、、、、等。7,植物克隆的终点克隆的终点从结构层次上有四种:第一,得到一,这一是常见的结果。第二,得到某种特定的。如愈伤组织直接培养成花器官。第三,得到相应的组织,如,外面包裹上人工种皮即成为人工种子。第四,培养特定细胞系得到大量的细胞,从细胞中提取,如某些一成分、色素等。从培养结果来分,植物组织培养可分为细胞培养、组织培养、器官培养和个体培养,广义的植物组织培养包含了这四种。狭义的植物组织培养即指个体培养。8、植物克隆的途径植物克隆有多种起点和终点,导致植物克隆有的途径。培养基有—和—之分,通过培养基中种类和比例不同,可以实现多途径的植物克隆。对课本上出现的培养途径进行综合归类,主要是以下两条:(1)外植体(器官或组织块)一-诱导生根发芽f试管苗一植株。(2)外植体(器官或组织块)一愈伤组织f-细胞团f球形胚一f胚状体一植株。9、植物细胞工程(1)植物细胞工程是指,培养(包括),在细胞水平上改变细胞内的遗传物质(改变遗传物质的方法有:细胞融合或体细胞杂交、显微注射或其它基因工程方法等),然后把这种遗传物质改变的细胞培养成有特定遗传性状的植物体0(2)原生质体是指植物细胞除去后具有代谢活性的原生质部分(包括、和);细胞壁主要成分是和,所以用酶和酶来处理植物细胞,可以将根尖、、或放在酶和成的混合液(高渗溶液)中处理,获得形的原生质体。(3)因远缘亲本难以杂交,植物杂交育种一般只适用于的不同品种之间。通过植物体细胞杂交可以克服这一困难,但植物细胞的阻碍两个或多个植物细胞融合在一起,必须除去。把不同种类植物的进行融合,可以实现植物体细胞杂交。10、植物组织块切口处的细胞在的刺激下发生成为分裂的细胞,并且可以继续不断的进行,在创伤表面形成一种由新生组织,这就是愈伤组织。该组织本身的分化程度,但再分化能力—o通过调节和的适当,可以从愈伤组织诱导出芽和根的组织,并可由此再生出新的植株。将含有组织培养物的试管放在上,通过培养可以分散成一细胞。胚性细胞的特征是细胞质、液泡而o该种细胞可发育成,继续发育成植株。11、植物的受精卵经过、、和而发育成胚。愈伤组织细胞经过培养得到的单个细胞,具有受精卵这种能力,即从单细胞依次到、、和,最后在生出完整的植株。12、植物细胞在长期培养过程中,培养物的和能力下降,原因可能有:、细胞核变异或等,而且;生长发育条件变化,指细胞或组织中激素被打破,或细胞对外源生长物质。敏感性(上升或下降);随着时间推移,由于其他各种原因了缺乏成胚性的o13、植物细胞全能性表达需要的条件包括:①离体(称为)和状态;②需要一定的营养包括水、无机盐、、维生素等:③植物生长调节剂如、;④需要温度、(愈伤组织再分化形成植物幼苗时,需处理)和PH.⑤培养需要在无菌条件下进行。二、思考归纳1、植物克隆的技术基础是什么?克隆的原理是什么?2、培养基中必需的成分有哪两类?它们的主要作用分别是什么?3、影响植物细胞全能性表达的内因和外因分别有哪些?4,引起细胞在培养过程中全能性下降原因有哪些?5,为什么要在较高渗透压环境中获得原生质体?甘露醇起什么作用?6、举例说明选择具有特定性状突变体的思路是什么?7、改变植物细胞内的遗传物质有哪些方法?请说出四种方法?8、细胞培养、组织培养和器官培养是什么关系?9、植物组织培养的条件有哪些?10、植物组织培养有哪些具体应用?11、根据填空的6、7、8写出两条具体的组织培养途径。三、本节的概念、专用术语、仪器、操作植物组织培养细胞全能性愈伤组织(创伤组织)新生组织顶端分生组织分生状态脱分化再分化诱导分化胚性细
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