蝴蝶兰试管苗生产技术规程.doc

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• 2024-11-17 13:50

蝴蝶兰试管苗生产技术规程

目 次 前言II 1 范围1 2 术语与定义1 3 基本设施与技术2 4 播种苗的生产2 5 分生苗的生产3 6 炼苗5 7 瓶苗质量5 8 包装与运输5前 言 本标准由广东省质量技术监督局、汕头市质量技术监督局提出。 本标准起草单位：汕头市农业科学研究所。 本标准主要起草人：朱饱卿、李军、王细燕、柴向华、曾宝珰蝴蝶兰试管苗生产技术规程 范围 本标准规定了蝴蝶兰试管苗生产技术中的基本设施与技术，播种苗的生产，分生苗的生产，炼苗，瓶苗质量，包装、运输等内容。 本标准适用于蝴蝶兰类（包括蝴蝶兰属Phalaenopsis、朵丽蝶兰属Doritaenopsis等属）的试管苗生产。 术语与定义 下列术语与定义适用于本标准 花 flower 是有性繁殖的器官，由花托、花萼、花瓣、蕊柱等组成。 唇瓣 lip 位于花朵下与中萼片对生的一片花瓣，形状特殊，是高度特化的花瓣，呈舌片状、唇状等，是兰花种类鉴定的一个重要标志。 蕊柱 column 兰科植物花的繁殖部分，也是区别兰科与其它所有科植物的主要特点。蕊柱由雌雄两部分器官组成，蕊柱上部一个有粘性的凹陷部分，称为柱头区。顶端着生一个雄蕊有二个花粉块，花粉块有花粉囊盖罩在外面。 茎 stem 一种变态茎，茎短而肥厚，不长新芽，为生长叶片、根系和花序的重要器官。 根 root 为气生根，呈圆柱状，分枝少或不分枝，肉质根粗大而肥壮，大都呈灰白色。 播种苗 seedling 也称实生苗，是指无菌条件下种子在适当培养基中发芽生长而成的苗。 分生苗 mericlone 也称组培苗、克隆苗，是利用植物细胞全能性原理，在无菌条件下将离体的植物细胞、组织或器官经过适当的培养长成的完整植株。 继代培养 subculture 将培养物转移到新的培养基上继续培养的过程。 灭菌 sterilization 经过高温灼烧、蒸煮或其它物理化学方法对物体或空间进行处理，使其达到无菌状态。 消毒 disinfection 用消毒剂对外植体进行处理达到无菌的状态。 试管苗 test-tube plantlet 或称瓶苗。在培养瓶内生长，出根培养后具有根、茎、叶等形态特征的苗。 炼苗 hardening 为使瓶苗出瓶后能正常生长，提高成活率而采取的措施。 外植体 explant 由活体植物上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。 原球茎 protocorm 是指由胚性细胞组成的呈圆球状的缩短的类似嫩茎的器官。 用于本标准的缩写词 MS:一种常用基本培养基,Murashige和Skoog（1962） 6-BA:6-苄基腺嘌呤,6-benzylaminopurine NAA:萘乙酸,naphthyleneacetic acid Ad:腺嘌呤,Adenine CW:椰乳,coconut water Hyponex No.1:花宝1号，N+P+K=7+6+19，美国Hyponex Corporation公司生产 HgCl2:氯化汞，也称升汞 NaClO:次氯酸钠 NaOH:氢氧化钠 HCl:盐酸 基本设施与技术 基本设施设备 拥有交通方便、环境清洁、空气干燥的实验室——化学试验室、洗涤室、灭菌室、接种室、培养室、炼苗室等；生产所需的生产设备——高压蒸汽灭菌器、超净工作台、天平、解剖镜、空调、培养架、加温器、培养瓶、紫外线灯、常用玻璃仪器、手术刀、镊子、酒精灯等，以及所需的化学试剂。 常用技术 培养基配制 按培养基的配方及所需的数量，分别加入所需的各类物质，混合后倒入煮培养基的锅中，加入少量的蒸馏水，加热至琼脂完全溶解后，用蒸馏水定容至所需的体积，用1mol/L的HCl溶液或1mol/L的NaOH溶液调节pH值后，趁热把100ml左右的培养基分装入三角培养瓶（Φ10cm，h13cm），塞上带通气孔（Φ0.5mm，塞棉塞）的橡皮塞。 灭菌（或消毒） 培养基 在高压蒸汽灭菌器内用湿热空气灭菌法（压力0.11MPa～0.14MPa、120℃～126℃、15min～20min）进行灭菌。 接种工具 镊子、手术刀、垫盘等接种工具在接种前可随培养基一起灭菌；镊子与手术刀在接种过程中采用酒精灯灼烧或高温灭菌器进行灭菌。 外植体 采用0.1%HgCl2溶液或5%NaClO溶液浸泡处理，不同的材料采用不同的方法和不同的消毒时间。 其它 实验室用紫外线灯杀菌；接种台、手等用75%酒精涂擦。 接种 在超净工作台上，摆放好接种工具，用镊子将需要接转的材料拿出后放在垫盘上，用镊子和手术刀将材料进行适当的切割，再用镊子将切割好的材料插植到新的培养基中。操作时要注意对瓶口及瓶塞进行灼烧，做完后及时塞上瓶塞，工具使用一段时间后应进行灼烧，以防止污染。 播种苗的生产 种子的获得 选择亲本 选择花色、

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