柳兰花提取物及其制备方法和应用与流程
本发明涉及化妆品技术领域，特别是涉及一种柳兰花提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
柳兰花，又名加拿大柳草，是来自加拿大北部大草原的非柳属植物，其不仅能够在严酷的气候下生存，而且还能够迅速地在被森林大火烧焦的地带生长。柳兰花提取物包含的生物活性分子，具有抗刺激、抗粉刺及抗超常雄性激素分泌的生物活性。
随着人们生活水平的提高和科学技术的快速发展，女性对于面膜的需求有了多样化的功能需求。目前市场上的面膜种类繁多，功效各异，但是可以同时具备控油，抗粉刺，舒缓肌肤炎症，并可赋予独特冰沙质感的面膜却很少见。
技术实现要素：
基于此，本发明的目的是提供一种柳兰花提取物的制备方法。
具体的技术方案如下：
一种柳兰花提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜柳兰花，干燥后打浆得浆液，加入纤维素酶进行酶解得酶解液，所述纤维素酶与所述浆液的质量比为1:10-20；
(2)于所述酶解液中加入嗜酸乳杆菌菌液，混匀后进行超声处理；其中所述嗜酸乳杆菌菌液与所述酶解液的质量比为1:20-50；
(3)将步骤(2)超声处理后的所述酶解液置于发酵罐发酵得发酵液；
(4)将所述发酵液进行离心，收集上清液；所述上清液经大孔树脂柱吸附、洗脱、浓缩、过滤、冷冻干燥，即得所述柳兰花提取物。
在其中一些实施例中，步骤(1)中，所述干燥步骤为将所述新鲜柳兰花干燥至含水量为5-10wt％；所述酶解的温度为50-60℃，酶解时间为2-3h。
在其中一些实施例中，步骤(2)中，所述嗜酸乳杆菌菌液中嗜酸乳杆菌的浓度为105-108cfu/ml；所述超声处理的工艺参数为：超声处理功率为10-50w，超声处理次数为2-4次，每次10-30s。
在其中一些实施例中，步骤(3)中，所述发酵的工艺参数为：发酵温度为25-35℃，发酵时间为3-4天，每天搅拌1-2次。
在其中一些实施例中，步骤(4)中，所述离心的工艺参数为：以转速4000-6000r/min离心10-20min；所述洗脱的工艺参数为：先用蒸馏水洗脱至接近无色，再用4-6倍量体积浓度为40-60％的乙醇水溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。
本发明的另一目的是提供上述制备方法制备得到的柳兰花提取物。
本发明的另一目的是提供上述柳兰花提取物在化妆品中的应用。
在其中一些实施例中，所述化妆品选自化妆水、乳液、膏霜、精华液、面膜或彩妆。
本发明的另一目的是提供一种面膜，包含上述柳兰花提取物。
在其中一些实施例中，所述面膜包括如下质量百分含量的组分：
上述制备方法得到的柳兰花提取物包含生物活性分子，具有抗刺激、抗粉刺及抗超常雄性激素分泌的生物活性。应用于化妆品中，可以控油，抗粉刺，有助于舒缓肌肤炎症。
上述面膜中除了含有柳兰花提取物，还含有o-伞花烃-5-醇，o-伞花烃-5-醇作为一种广谱性杀菌剂，对细菌、酵母菌、真菌、病毒等均有作用，可以在一定程度上作为抗粉刺剂，而且它本身不含卤素、重金属、激素等有害物质，还可以吸收特定波长的紫外线，同时具有抑制氧化的能力。
上述添加了柳兰花提取物的面膜合理科学地设计了多种组分及配比，除了具有控油，抗粉刺，有利于舒缓肌肤炎症的功效，还赋予面膜霜具有独特的冰沙质感。
附图说明
图1为实施例与对比例抑制率比较图。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
实施例1柳兰花提取物的制备
本实施例柳兰花提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜柳兰花，干燥后打浆得浆液，加入纤维素酶进行酶解得酶解液，所述纤维素酶与所述浆液的质量比为1:15；
所述干燥步骤为将所述新鲜柳兰花干燥至含水量为5wt％；所述酶解的温度为55℃，酶解时间为2h。
(2)于所述酶解液中加入嗜酸乳杆菌菌液，混匀后进行超声处理；其中所述嗜酸乳杆菌菌液与所述酶解液的质量比为1:30；
所述嗜酸乳杆菌菌液中嗜酸乳杆菌的浓度为108cfu/ml；所述超声处理的工艺参数为：超声处理功率为40w，超声处理次数为3次，每次20s。
(3)将步骤(2)超声处理后的所述酶解液置于发酵罐发酵得发酵液；
所述发酵的工艺参数为：发酵温度为30℃，发酵时间为3天，每天搅拌2次。
(4)将所述发酵液进行离心，收集上清液；所述上清液经大孔树脂柱吸附、洗脱、浓缩、过滤、冷冻干燥，即得所述柳兰花提取物。
所述离心的工艺参数为：以转速5000r/min离心10min；
所述洗脱的工艺参数为：先用蒸馏水洗脱至接近无色，再用4-6倍量体积浓度为40％的乙醇水溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。
制备对比例1
本对比例柳兰花提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜柳兰花，干燥后打浆得浆液，加入纤维素酶进行酶解得酶解液，所述纤维素酶与所述浆液的质量比为1:15；
所述干燥步骤为将所述新鲜柳兰花干燥至含水量为5wt％；所述酶解的温度为55℃，酶解时间为2h。
(2)于所述酶解液中加入双歧杆菌菌液，混匀后进行超声处理；其中所述双歧杆菌菌液与所述酶解液的质量比为1:30；
所述双歧杆菌菌液中双歧杆菌的浓度为108cfu/ml；所述超声处理的工艺参数为：超声处理功率为40w，超声处理次数为3次，每次20s。
(3)将步骤(2)超声处理后的所述酶解液置于发酵罐发酵得发酵液；
所述发酵的工艺参数为：发酵温度为30℃，发酵时间为3天，每天搅拌2次。
(4)将所述发酵液进行离心，收集上清液；所述上清液经大孔树脂柱吸附、洗脱、浓缩、过滤、冷冻干燥，即得所述柳兰花提取物。
所述离心的工艺参数为：以转速5000r/min离心10min；
所述洗脱的工艺参数为：先用蒸馏水洗脱至接近无色，再用4-6倍量体积浓度为40％的乙醇水溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。
制备对比例2(省略超声处理)
本对比例柳兰花提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜柳兰花，干燥后打浆得浆液，加入纤维素酶进行酶解得酶解液，所述纤维素酶与所述浆液的质量比为1:15；
所述干燥步骤为将所述新鲜柳兰花干燥至含水量为5wt％；所述酶解的温度为55℃，酶解时间为2h。
(2)于所述酶解液中加入嗜酸乳杆菌菌液，其中所述嗜酸乳杆菌菌液与所述酶解液的质量比为1:30；所述嗜酸乳杆菌菌液中嗜酸乳杆菌的浓度为108cfu/ml。
(3)将步骤(2)处理后的所述酶解液置于发酵罐发酵得发酵液；
所述发酵的工艺参数为：发酵温度为30℃，发酵时间为3天，每天搅拌2次。
(4)将所述发酵液进行离心，收集上清液；所述上清液经大孔树脂柱吸附、洗脱、浓缩、过滤、冷冻干燥，即得所述柳兰花提取物。
所述离心的工艺参数为：以转速5000r/min离心10min；
所述洗脱的工艺参数为：先用蒸馏水洗脱至接近无色，再用4-6倍量体积浓度为40％的乙醇水溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。
为了更好的说明本发明的有益效果，本发明给出实施例1和对比例3-6的面膜霜的配方(见表1)，并且对它们进行验证试验：
表1
实施例2以及对比例3-6的面膜霜的制备方法均为将各自实施例配方中的组分按照本领域常规的乳霜制备工艺步骤制得。
一、控油效果测试
1.试验人群：
选取年龄18-40岁，男女不限，既往对护肤类化妆品无过敏史，皮肤特征为油性皮肤的受试者共100人，随机分为5组，每组20人。
2.试验样品：
实验组为实施例2以及对比例3-6制备的面膜霜。
3.测试环境：
测试在恒温恒湿的实验室中进行，无强烈阳光或灯光直射，温度20±2℃，湿度40-60％。
4.试验仪器：
本测试采用的皮肤油脂测定仪(sebumeter,courage+khazakasm815)的测试原理是采用标准的透明吸油脂胶带，在胶带所吸收油脂50-250μg/cm2范围内，其透光率的改变与油脂吸收量的多少成正比，经光学仪器测试后，根据胶带的透光率的改变能够衡量测试部位皮肤表面的油脂分泌量。测量单位是μg/cm2。
5.试验方法：
1)测试前2-3天不能使用具有控油功效的产品。
2)测验前，受试者需要统一清洁面部皮肤，用干的面巾纸擦拭干净。让受试者在符合标准的房间内静坐至少30min，面部皮肤暴露，不能摩擦，保持放松。
3)测试时，选定左脸颊3cm×3cm区域为受试区域，产品用量为2mg/cm2左右，右脸颊3cm×3cm区域作为相应的空白对照区域，用再用皮肤油脂测试仪sm815测试上述两个区域的油脂含量，测试3-5次取平均值，记为实验组起始油脂含量和空白组起始油脂含量。
4)每组受试者使用试验样品后，在2h、4h、6h测试油脂含量，测试3-5次取平均值，记录实验组油脂含量和空白组油脂含量。
统计测得的数值，分析皮肤的油脂含量变化规律，具体结果分别见表6所示。其中，
油脂增加率＝(油脂含量-起始油脂含量)/起始油脂含量。
油脂相对增加率(即抑脂率)＝(实验组油脂含量-空白组油脂含量)/空白组油脂含量。该值越小，说明试验样品相对空白样品抑脂效果越明显。
结果如表2和图1所示。
表2控油效果测试结果
从表2实施例2和对比例3-6的结果可知，本发明范围内制得的面膜霜具有更好的控油的效果。
二、舒缓效果测试
1.试验人群：选取年龄20-40岁，男女不限，既往对护肤类化妆品无过敏史，面部有红斑肿痛的受试者共100人，随机分为5组，每组20人。
2.试验样品：
实施例2以及对比例3-6制备的面膜霜。
3.试验方法：
以上各组受试者每天早晚洁面后使用试验样品，使用28天后，受试者对舒缓效果进行使用感受评价，评价结果按人数统计，具体见表3所示。
评价标准：
(1)明显改善：红斑的肿痛消失；
(2)轻微改善：红斑的痛感减轻；
(3)无效：红斑的肿痛仍在。
表3舒缓效果测试结果
从表3实施例2和对比例3-6的结果可知，本发明范围内制得的面膜霜具有更好的舒缓肌肤炎症的效果。
三、抗粉刺效果测试
1.试验人群：选取年龄20-40岁，男女不限，既往对护肤类化妆品无过敏史，面部有粉刺的受试者共100人，随机分为5组，每组20人。
2.试验样品：
实施例2以及对比例3-6制备的面膜霜。
3.试验方法：
以上各组受试者每天早晚洁面后使用试验样品，轻轻按摩至其吸收，连续使用三个星期，观察面部粉刺并作出评价，统计每组受试者使用后粉刺改善情况，具体见表4所示。
表4抗粉刺效果测试结果
从表4实施例2和对比例3-6的结果可知，本发明范围内制得的面膜霜具有更好的抗粉刺的效果。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
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