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百合4个品种花粉生活力及3种测定方法的比较

花匠小妙招
2024-11-20 01:14

-63-中国园艺文摘2014年第1期

百合4个品种花粉生活力及3种测定方法的比较曹春燕陈立人吕文涛尤伟忠苏州农业职业技术学院江苏苏州215008摘要用花粉离体染色法、培养法测定‘白天堂’、‘爱莱尔’、‘晚安’、‘仙女宁芙’等4个百合品种花粉离体染色率和萌发率。结果表明4个百合品种的花粉离体染色率平均为57.13%花粉离体萌发率平均为58.63%其中‘白天堂’染色率、萌发率最高为68%和75%。对相对生活力最高的品种‘白天堂’的花粉采用I-KI染色法、TTC染色法2种方法测定花粉生活力以蔗糖硼酸培养法为对照。经研究花粉活力衰减规律表明I-KI染色法测定花粉与蔗糖硼酸培养法不一致不适用于百合花粉生活力的测定TTC染色法测定值与蔗糖硼酸培养法规律一致是一种快速测定百合花粉力活性的有效方法。关键词百合花粉生活力测定方法百合是重要的花卉作物之一。百合育种也一直是全球花卉业备受关注的领域之一。中国百合不仅种类繁多[1,2]而且生态习性各异为培育百合新品种奠定了良好的种质资源基础。迄今为止全球百合育种仍以常规杂交为主[3-8]。当前育成的百合新品种中大部分采用的是常规杂交育种方法一部分为远缘杂交种。在做杂交之前熟悉掌握亲本花粉的生活力是每个育种工作者的首要工作。该试验试图从花粉生活力作为亲本选择的标准入手进行亲本筛选提高杂交授粉成功率。因此选择恰当的花粉活力测定方法了解不同品种百合花粉的活性对提高其繁殖效率具有重要意义[9-13]。研究采用萌发法和染色法对不同百合品种的花粉活力进行测定比较它们在不同测定方法下的活性差异并对产生此差异的原因进行分析以期为百合杂交育种提供基础资料。1材料与方法1.1材料试验选用4个适合进行耐热育种的观赏百合亲本材料在苏州农业职业技术学院相城校区球宿根花卉基地进行。采集‘白天堂’、‘爱莱尔’、‘晚安’、‘仙女宁芙’等4个品种花蕾开放第1天的花药放入离心管中待花粉完全散出后于-4℃条件下密闭保存备用。1.2花粉生活力测定方法采用氯化三苯基四氮唑(TTC)法、碘-碘化钾(I-KI)法、蔗糖培养基培养法进行花粉生活力的测定。1.2.1氯化三苯基四氮唑(TTC)法取少量花粉放于载玻片上加12滴0.5%的氯化三苯基四氮唑溶液盖上盖玻片放在35℃的恒温箱中15min后置于低倍显微镜下观察染成红色的为有生活力的花粉。1.2.2碘-碘化钾(I-KI)法碘-碘化钾溶液的配制取2g碘化钾溶于510ml蒸馏水中然后加入1g碘待全部溶解后加入蒸馏水至300ml定容。取适量新鲜的花粉置载玻片上加1滴蒸馏水再加12滴碘-碘化钾溶液盖上盖玻片置低倍显微镜下观察。凡被染成蓝色的为生活力较强的花粉没有染色的为发育不良的花粉。每处理3次重复每个重复观察3个视野然后计算平均值。根据花粉的染色情况比较各品种的花粉活力。1.2.3蔗糖培养基培养法10%蔗糖、100mg/kg硼酸、5mg/kg赤霉素配制成蔗糖培养基。分别将待测新鲜花粉置于培养液中在25℃条件下光照培养4h每处理3次重复每个重复观察3个视野计算平均值。以花粉管长度超过花粉粒直径作为发芽标准发芽率(%)=已发芽的花粉粒数目/花粉粒总数×100根据花粉的发芽情况比较各品种的花粉活力。2结果与分析2.1百合4个品种花粉生活力比较供试百合品种的花粉离体染色率平均为57.13%花粉离体萌发率平均为58.63%品种间差异不大‘白天堂’品种花粉萌发率最高达68%染色率达75%其次为‘仙女宁芙’花粉萌发率为57%、染色率为52.5%‘爱莱尔’花粉萌发率为52%、染色率为63.5%‘晚安’花粉萌发率最低为44%、染色率为43.5%。表明该4个百合品种花粉离体萌发率、染色率均较高在生产上都能作为授粉植株应用(见附表)。2.2花粉生活力测定方法比较将‘白天堂’百合花粉用蔗糖硼酸培养基培养TTC、I-KI染色赵统利等认为培养法是测定花粉粒活性的一种较为准确的方法故该试验以蔗糖硼酸培养基培养作为对照分析经TTC、I-KI染色后百合花粉活力衰减情况以期找到一种可以准确快速进行花粉活力测定的方法。2.2.1I-KI溶液染色法从图1可以看出利用I-KI方法测定百合花粉的活力出现蓝色和褐色两种颜色反应而且不随时间的延长发生变化与同时进行的蔗糖硼酸培养基培养法测定花粉活力曲线相比差距甚大。分析认为I-KI法不能准确表示花粉的活力。因为多数植物正常的成熟花粉粒呈球形积累较多的淀粉I-KI溶液可将其染成第一作者简介曹春燕1983女助教从事植物生理及分子生物学教学与研究。项目来源苏州科技支撑项目《优质耐热观赏百合新品种选育》(SN201113)。