? ? 分子标记在绣球属育种中的应用研究进展 ? ? 陆泓锦,吴宜静,张一鸣,续 言,王 露,赵天祎,章 寒,蔡 明*,杨玉勇,张启翔 (1.花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室,国家花卉工程技术研究中心,城乡生态环境北京实验室,园林环境教育部工程研究中心,林木花卉遗传育种教育部重点实验室,北京林业大学 园林学院,北京 100083;2昆明杨月季园艺有限责任公司,云南 昆明 650500) 绣球(Hydrangeamacrophylla)又名八仙花、紫阳花,是虎耳草科绣球属植物[1]。绣球属植物花序硕大,花色丰富,观赏价值极高,可作为切花、盆花、园林绿化材料应用,深受世界各国人们喜爱[2]。我国是绣球属种质资源分布中心,但资源利用率低。目前国内生产与应用的品种多引自国外,缺少具备市场竞争力的自育品种,且育种技术落后,因此需要对绣球种质资源进行系统的收集与研究,改善育种技术,提高利用率。 分子标记是根据基因组DNA存在丰富的多态性而发展起来的可直接反映生物个体DNA水平上的差异的一类新型的遗传标记,它是继形态学标记、细胞学标记、生化标记之后最为可靠的遗传标记技术。通常所说的分子标记是指以DNA多态性为基础的遗传标记。可以分成以下3类:第1类是以分子杂交为核心的DNA分子标记 RFLP;第2类是以聚合酶链式反应(PCR)为核心的DNA分子标记 RAPD、SSR 、ISSR、AFLP、SCAR、STS等。第3类是一些新型分子标记如SNP、InDel、CNV、SV等。常见的分子标记名称以及定义如表1所示。DNA分子标记在种质资源鉴定与分子育种等方面具有广阔的应用前景。自20世纪80年代引入分子标记以来,育种研究得到了深度上的扩展和步骤上的简化[4],分子标记数量丰富,遗传稳定,多态性高,多为共显性,不仅广泛应用于植物种质鉴定与评价[5]、植物遗传多样性[6]、亲缘关系鉴定[7]、杂交后代鉴定[8]、重要性状基因定位以及分子标记连锁图的构建[9]等方面的研究,已成为观赏植物种质资源鉴定与评价、重要性状遗传规律分析、缩短育种周期、定向改良观赏性状和杂交后代早期鉴定与选择的重要手段。本研究整理了不同分子标记技术应用于绣球属植物研究的情况,为绣球属植物资源评价与利用奠定基础。 表1 常见分子标记名称及定义Table 1 Commonly used molecular marker names and definitions 1 分子标记在种质资源鉴定与评价研究中的应用 1.1 资源鉴定 分子标记能够较为准确地区分品种,便于后期管理与应用。T.A.Rinehart等[11]利用38个SSR位点构建系统发生树,对部分绣球品种名称提出了修改建议,绣球栽培品种Hydrangeamacrophylla‘Libelle’与Hydrangeamacrophylla‘Libelle White’为同一品种,品种名中‘White’用来描述颜色,是为了便于市场流通而后期添加;Hydrangeamacrophylla‘Pink Beauty’与Hydrangeamacrophylla‘Preziosa’的DNA指纹图谱相同,可能为同一品种;部分圆锥绣球(Hydrangeapaniculata)品种基因型一致,应进行统一命名;Hydrangeamacrophylla‘Reewee’的绣球品种实际上包含2个不同品种[12-13],应区分命名。P.Hempel等[14]利用SSR分子标记技术构建了W?denswil家族图谱,纠正了W?denswil家族中部分品种的命名。J.T.Lindstorm等[15]使用11个RAPD引物区别鉴定出7个绣球品种,包含5个多次开花品种,2个抗寒品种,其中5个多次开花品种得到了很好的区分,但上述引物未能区分开Hydrangeamacrophylla‘Endless Summer’与Hydrangeamacrophylla‘David Ramsay’,推测其为相同品种,或由于引物多态性较差,不足够将其区分。D.Zlesak等[16]发现绣球Hydrangeamacrophylla‘Bailday’与名称较为相似的Hydrangeamacrophylla‘Bailmer’可被156个AFLP条带区分,推测二者不是同一品种;而H.macrophylla‘Bailday’与表型相似的Hydrangeamacrophylla‘Varigata’仅在1个位点上有差别,推测‘Varigata’可能是‘Bailday’的衍生品种,或是同一品种。Y.H.Joung等[17]结合叶片等表型信息,将29种绣球资源利用RAPD进行聚类分析,此外还进行了基于rbcL基因获得的SNP标记的单体型分析。BS-UPGMA和IB-NJ聚类分析都将29个绣球资源
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