月季CBF转录因子基因的克隆及表达分析
《园艺学报》 2012年08期
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翟俊峰 王法微 王南 宗俊梅 李海燕 开通知网号
【摘要】:根据CBF(C-repeat binding factor)AP2/EREBP保守区设计1对简并引物,采用PCR方法对月季‘寒锦4号’(Rosa hybrida‘Hanjin4’)CBF转录因子基因中间片段进行克隆;再根据中间片段区域设计了两对特异引物,采用反向PCR方法对该基因的5'和3'端的序列进行克隆,将中间片段与反向PCR产物拼接得到CBF基因全长序列,命名为RhCBF,GenBank注册编号为EF582843;该基因序列长758bp,ORF为603bp,编码200个氨基酸;同时,根据基因序列设计1对特异引物,利用荧光定量PCR分析月季CBF在不同逆境胁迫下的表达情况。结果显示低温和盐均可以诱导RhCBF的表达,而干旱处理不能诱导其表达。
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